二氧化硅刺激A549细胞水通道蛋白-1表达:体外研究

发布时间：2017-11-15 18:22

  本文关键词：二氧化硅刺激A549细胞水通道蛋白-1表达:体外研究

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【摘要】：[目的]研究二氧化硅(Si O2)粉尘刺激对人肺泡上皮A549细胞水通道蛋白-1(AQP-1)的表达及意义。[方法]将A549细胞分为对照组、染毒组及抑制剂组。其中染毒组细胞利用50 mg/L的Si O2混悬液刺激细胞,Si O2分别刺激0.5、1、2、4、8 h后检测m RNA表达;Si O2分别刺激3、6、12、24 h后检测蛋白表达。抑制剂组则先加入AQP-1特异性的通道抑制剂氯化汞(Hg Cl2)孵育3 min后再加Si O2刺激2 h检测m RNA,刺激6 h检测蛋白表达。各组采用实时聚合酶链反应法检测AQP-1 m RNA表达水平,Western blot、免疫细胞化学检测AQP-1蛋白表达水平。[结果]AQP-1m RNA表达:与对照组相比,Si O2刺激后的0.5、1、2、4 h A549细胞AQP-1 m RNA的表达量分别是对照组的2.78、3.52、3.85、1.98倍,8 h时回到对照组水平(P0.01);抑制剂组的表达水平为相同刺激时间Si O2染毒组的65%。AQP-1蛋白表达:1免疫印迹检测结果显示,与对照组相比,Si O2刺激后的3、6、12、24 h A549细胞的表达量分别为对照组的1.44、2.56、1.93、1.35倍(P0.05或P0.01);抑制剂组的表达水平低于相同刺激时间Si O2染毒组,为其70%(P0.01)。2免疫细胞化学结果显示,与对照组相比,Si O2刺激后的3、6、12、24 h A549细胞的表达量分别为对照组的1.17、1.49、1.29、1.07倍(P0.05或P0.01)。抑制剂组的表达水平低于相同刺激时间Si O2染毒组,为其71%(P0.01)。[结论]Si O2刺激使A549细胞的AQP-1表达增高,其特异性抑制剂氯化汞可抑制Si O2刺激引起的AQP-1的表达增高,推测AQP-1可能参与了矽肺的发生发展过程。
【作者单位】： 华北理工大学医学实验研究中心;华北理工大学临床医学院;华北理工大学基础医学院;
【基金】：河北省科技厅科技支撑项目(编号:10276116D)
【分类号】：R135.2
【正文快照】： 众所周知,二氧化硅(Si O2)粉尘是引起矽肺的关键致病因子和始动因素[1],其进入肺组织后肺泡上皮细胞是Si O2损伤作用的关键靶细胞之一,尤其在损伤的初始阶段。但Si O2诱导上皮细胞损伤的分子机制尚不清楚[2]。水通道蛋白(aquaporins,AQPs)是一组与水通透性有关的细胞膜转运蛋

【参考文献】

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1 檀俊涛;王U，

本文编号：1190763