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上调miR-21表达促进肺成纤维细胞增殖和胶原蛋白合成

发布时间:2017-11-26 00:14

  本文关键词:上调miR-21表达促进肺成纤维细胞增殖和胶原蛋白合成


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【摘要】:目的探讨miR-21在肺纤维化小鼠肺组织中的表达及其在肺成纤维细胞增殖、转分化、胶原蛋白合成中的作用。方法将30只C57BL/6小鼠随机分为对照组(n=5)和模型组(n=25)。经气管内注入博莱霉素A5建立肺纤维化模型,分别于第3、7、14、28、56天随机处死5只小鼠,而对照组于第56天全部处死作为总体对照,采用荧光实时定量PCR测定肺组织中miR-21表达。另外,NIH3T3肺成纤维细胞分别予LipofectamineTM2000转染试剂(空白对照组)以及miR-21阴性对照物、模拟物、抑制物处理,通过MTT法检测细胞增殖能力,应用荧光实时定量PCR和Western blot法分别检测α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、含1型血小板结合蛋白基序的去整合素和金属蛋白酶1(ADAMTS-1)、1型胶原蛋白(Col1)、3型胶原蛋白(Col3)mRNA与蛋白表达情况。结果模型组第7~56天,肺组织中miR-21表达水平明显高于对照组,第28天达到高峰。在共同培养24、48、72、96 h后,miR-21模拟物组细胞活力较空白对照组增加,而miR-21抑制物组细胞活力较空白对照组降低。与空白对照组比较,miR-21模拟物组α-SMA、Col1、Col3 mRNA与蛋白表达水平升高,ADAMTS-1 mRNA与蛋白表达水平减少;然而miR-21抑制物组α-SMA、Col1、Col3 mRNA与蛋白表达水平下降,ADAMTS-1 mRNA与蛋白表达水平上升。阴性对照组上述指标与空白对照组比较,无显著性差异。结论 miR-21在肺纤维化小鼠肺组织中表达上调,miR-21高表达可促进肺成纤维细胞增殖、转分化以及胶原蛋白的合成。
【作者单位】: 湖南医药学院临床医学系;
【基金】:湖南省教育厅优秀青年项目(14B142)
【分类号】:R563
【正文快照】: 肺纤维化(pulmonary fibrosis)是由感染、药物、化学制剂、粉尘等因素引起的一种肺间质性疾病,其主要病理特征是早期呈现弥漫性肺泡炎,后期发生大量成纤维细胞病理性增殖、转型以及细胞外基质(extracellular matrix,ECM)在肺间质不断沉积,迄今尚无有效的治疗方法[1-4]。含1型

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本文编号:1227891


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