姜黄素mPEG-PLGA纳米粒对香烟提取物刺激巨噬细胞RAW264.7所致激素抵抗现象逆转作用的研究

发布时间：2017-12-12 04:12

  本文关键词：姜黄素mPEG-PLGA纳米粒对香烟提取物刺激巨噬细胞RAW264.7所致激素抵抗现象逆转作用的研究

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【摘要】：目的制备以单甲氧基聚乙二醇-聚乳酸羟基乙酸共聚物(mPEG-PLGA)为载体的姜黄素纳米粒(CUR-NPs),探讨姜黄素(CUR)和CUR-NPs逆转香烟提取物(CSE)暴露所致的激素抵抗现象,比较CUR-NPs和CUR生物学作用的差异。方法采用乳化溶剂挥发法制备CUR-NPs,激光粒度测定仪和透射电子显微镜分别对CUR-NPs的粒径分布和形貌进行表征。脂多糖(LPS)刺激巨噬细胞RAW264.7布地奈德(BUD)(10~(-10)~10~(-5)mol/L)干预。LPS+CSE刺激巨噬细胞RAW264.7,BUD(10~(-10)~10~(-5)mol/L)、CUR(10~(-10)~10~(-5)mol/L)、CUR(10~(-7)mol/L)+BUD(10~(-9)~10~(-5)mol/L)、CUR(10~(-9)~10~(-5)mol/L)+BUD(10~(-7)mol/L)、CUR-NPs(10~(-9)~10~(-5)mol/L)+BUD(10~(-7)mol/L)干预,酶联免疫吸附试验(ELISA)检测巨噬细胞RAW264.7所分泌的IL-8。CES刺激巨噬细胞RAW264.7,BUD(10~(-7)mol/L)、CUR(10~(-7)、10~(-6)mol/L)和CUR-NPs(10~(-7)、10~(-6)mol/L)干预,实时定量PCR检测细胞中组蛋白去乙酰化酶2(HDAC2)mRNA的表达,蛋白免疫印迹(Western blot)检测细胞中HDAC2蛋白的表达。共聚焦显微镜检测巨噬细胞RAW264.7对CUR和CUR-NPs内CUR的摄取量。结果 CUR-NPs外观呈圆形或类圆形,平均粒径为(356.4±146.6)nm。与LPS刺激相比,LPS+CSE共刺激时BUD(10~(-10)~10~(-5)mol/L)对IL-8分泌的最大抑制率显著降低(P0.05),半数抑制浓度(IC50)显著增高(P0.05)。LPS+CSE共刺激时,与BUD(10~(-10)~10~(-5)mol/L)组相比,CUR(10~(-7)mol/L)+BUD(10~(-9)-10~(-5)mol/L)组BUD对IL-8分泌的最大抑制率显著增高(P0.05),IC50显著降低(P0.05)。在LPS+CSE共刺激,CUR和CUR-NPs浓度梯度同为10~(-9)、10~(-8)和10~(-7)mol/L时,CUR-NPs+BUD(10~(-7)mol/L)组对IL-8分泌的抑制率显著高于CUR+BUD(10~(-7)mol/L)组(P0.05)。CSE刺激后细胞中HDAC2的mRNA和蛋白表达量显著降低(P0.05);与CSE组相比,CUR(10~(-7)、10~(-6)mol/L)组及CUR-NPs(10~(-7)、10~(-6)mol/L)组细胞中HDAC2的mRNA和蛋白表达量显著增高(P0.05)。浓度梯度同为10~(-7)mol/L时,CUR-NPs组细胞中HDAC2的mRNA和蛋白表达量高于CUR组(P0.05)。浓度梯度同为10~(-7)mol/L时,巨噬细胞RAW264.7对CUR-NPs内CUR的摄取量显著高于CUR(P0.05)。结论 CUR及CUR-NPs能够逆转CSE暴露所致的激素抵抗,CUR-NPs能够提高细胞对CUR的摄取量在低浓度梯度情况下,CUR-NPs具有更强的逆转激素抵抗的作用。
【作者单位】： 上海交通大学医学院附属新华医院呼吸科;
【基金】：上海市科委科技创新行动计划重点项目(编号:14401970500)
【分类号】：R56
【正文快照】： 慢性阻塞性肺疾病(简称慢阻肺)是以不完全可逆、呈进行性发展的慢性气流受限为特征的疾病,相对于其他的气道慢性疾病,慢阻肺的死亡率和致残率都较高,而对激素药物不敏感是导致慢阻肺治疗效果不佳的主要的原因[1]。姜黄素(curcumin,CUR)是从姜黄(curcuma longa)中分离出来的一

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本文编号：1281113