IRE1及JNK在慢性阻塞性肺疾病内质网应激中的作用
发布时间:2018-02-14 04:11
本文关键词: 香烟烟雾 内质网应激 凋亡 慢性阻塞性 肺疾病 出处:《南华大学》2013年硕士论文 论文类型:学位论文
【摘要】:目的:研究香烟烟雾(CS)诱导诱导肺内质网应激(ERS)时IRE1及JNK激活情况及其与慢性阻塞性肺疾病(COPD)的关系。 方法:研究分为动物实验和临床实验两部分。 1.动物实验部分:40只雄性SD大鼠随机分为对照组、吸烟2个月组、吸烟4个月组和戒烟组(吸烟4个月然后戒烟1个月),单纯被动吸烟法复制COPD模型。收集各组大鼠肺组织标本,免疫组织化学、Western blot检测IRE1α、P-IRE1、JNK、P-JNK蛋白表达水平。 2.临床实验部分:通过肺癌肺叶切除手术收集非吸烟非COPD、吸烟非COPD、吸烟COPD患者肺组织标本各10例;Western blot检测IRE1α、P-IRE1、JNK、P-JNK蛋白表达水平。 结果: 1.动物部分 1.1肺组织病理学观察结果:与对照组相比,吸烟2月组大鼠肺结构紊乱,部分肺泡壁变薄,出现断裂;吸烟4月组大鼠肺结构紊乱更明显,肺泡破裂,,肺泡腔扩大,部分融合成肺大泡;戒烟组大鼠肺泡腔扩大较吸烟4月组无显著改变。 1.2大鼠肺功能结果示吸烟2个月组大鼠0.3秒用力呼气容积(FEV0.3)和呼气峰流速(PEF)较对照组显著降低(FEV0.375.48±2.57(%) VS83.47±4.98(%),PEF33.42±3.21VS40.11±3.66(ml/s) P均0.05);吸烟4月组大鼠肺通气功能较吸烟2月组进一步降低(FEV0.366.18±4.12(%) VS75.48±2.57(%),PEF25.89±2.22(ml/s)VS33.42±3.21(ml/s),P均0.05);戒烟组与吸烟4月组大鼠肺通气功能无显著性差异(P值均0.05)。 1.3免疫组化结果显示IRE1α主要表达于肺结构细胞的胞浆,在对照组和吸烟组没有显著差别;P-IRE1主要定位于肺泡上皮细胞,血管内皮细胞,支气管上皮细胞的胞浆,在对照组大鼠表达最低,吸烟2月组表达较对照组显著升高(P0.05),吸烟4月组表达较吸烟2月组进一步升高(P 0.05),而戒烟组较吸烟4月组相比较则没有显著差别(P0.05);JNK主要定位于肺泡上皮细胞,血管内皮细胞,支气管上皮细胞的胞浆中,胞核也有少量表达,各组大鼠JNK蛋白表达无显著性差异;P-JNK主要定位于肺泡上皮细胞,血管内皮细胞,支气管上皮细胞的细胞核,细胞浆也有少量分布,在对照组大鼠表达最低,吸烟2月组表达较对照组显著升高(P 0.05),吸烟4月组表达较吸烟2月组明显升高(P0.05),而戒烟组表达较吸烟4月组相比无显著差别(P0.05);Western blot结果和免疫组化一致。 1.4相关分析结果示P-IRE1表达、P-JNK蛋白表达与肺功能呈负相关,与细胞凋亡率正相关, P-IRE1蛋白表达与P-JNK蛋白表达呈正相关。 2.临床部分 2.1肺组织形态学观察:与对照组比,COPD组上皮层及平滑肌层增厚,肺泡结构紊乱,上皮细胞脱落,管壁大量炎性细胞浸润,肺泡管、肺泡囊及肺泡腔扩大,肺泡壁断裂,可见部分肺泡融合成肺大泡。非COPD吸烟者肺组织结构与对照组无明显差异。 2.2Western blot结果显示IRE1α各组表达没有区别;P-IRE1在对照组表达最低,吸烟非COPD组表达较对照组显著升高(P 0.05),吸烟COPD组表达较吸烟非COPD组人群进一步升高(P 0.05);JNK各组表达没有显著性差异。P-JNK吸烟非COPD组P-JNK较对照组明显升高(P 0.05),吸烟COPD组较吸烟非COPD组人群比较则进一步升高(P 0.05)。 2.3相关分析显示P-IRE1表达、P-JNK蛋白表达与肺功能呈负相关,与细胞凋亡率正相关, P-IRE1蛋白表达与P-JNK表达呈正相关。 结论: 1. IRE1及JNK参与了香烟烟雾诱导的COPD内质网应激的机制。 2. IRE1及JNK在香烟烟雾诱导内质网应激时UPR反应及肺结构细胞凋亡中发挥作用。
[Abstract]:Objective: To study the activation of IRE1 and JNK and its relationship with chronic obstructive pulmonary disease (COPD) induced by endoplasmic reticulum stress (ERS) induced by cigarette smoke (CS).
Methods: the study was divided into two parts: animal experiment and clinical experiment.
1. animal experiment: 40 male SD rats were randomly divided into control group, 2 month smoking group, smoking group and smoking cessation group 4 months (4 months and then quit smoking for 1 months), the simple passive smoking method to establish COPD model. Each group were collected in rat lung tissue specimens, immunohistochemistry, Western blot detection of IRE1 alpha, P-IRE1, JNK, P-JNK protein expression levels.
2. clinical trial Part: through lung cancer lobectomy, we collected non-smoking non COPD, smoking non COPD, smoking COPD patients lung tissue specimens in 10 cases, Western blot detected IRE1 alpha, P-IRE1, JNK and P-JNK protein expression level.
Result锛
本文编号:1509844
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