骨髓间充质干细胞对肺气肿模型大鼠的影响

发布时间：2016-11-24 02:14

本文关键词：骨髓间充质干细胞对肺气肿模型大鼠的影响，由笔耕文化传播整理发布。

《安徽医科大学》 2014年

骨髓间充质干细胞对肺气肿模型大鼠的影响

王丽雁

【摘要】：目的： 1、本实验通过1次性气管内注入猪胰蛋白酶（PPE）建立大鼠肺气肿模型； 2、从SD大鼠骨髓中分离间充质干细胞，体外培养、传代、扩增、鉴定； 3、建立大鼠肺气肿模型后，通过尾静脉注入骨髓间充质干细胞，通过观察骨髓间充质干细胞（BMSC）对肺气肿模型大鼠中炎症因子和肺组织病理学变化的影响，探讨骨髓间充质干细胞对肺气肿的影响以及肺气肿的发病机制。方法： 1、选择2只体重约80-100g的雄性SD大鼠，去除股骨周围肌肉组织，剪去包括骺板在内的两侧骺端，用DMEM液反复冲洗骨髓腔，收集骨髓细胞悬液，并将其接种于塑料培养瓶，用DMEM-LG培养液（10%FBS，100u/L青霉素，100u/L链霉素）培养，置于37℃、5%CO2培养箱内，48小时半量换液，之后每72小时全量换液，待融合80%时，按1:2传代。倒置相差显微镜观察细胞生长情况及形态特征。 2、将30只体重约180-220g的健康雄性SD大鼠，随机分成3组：正常对照组、肺气肿模型组和BMSC治疗组。气管内注入PPE诱导建立肺气肿模型，经大鼠尾静脉注射BMSC进行治疗。普通饲养2周后处死大鼠，观察肺组织病理学变化以及肺泡灌洗液细胞计数，使用ELISA方法检测各组大鼠BALF中IL-17和IL-6水平。实验数据采用SPSS13.0软件进行统计学分析，检验水平为α=0.05。结果： 1、支气管肺泡灌洗液(BALF)中细胞总数及分类，肺气肿模型组BALF中白细胞总数、淋巴细胞数及中性粒细胞百分数均高于正常对照组，经BMSC治疗后的大鼠BALF中白细胞数、淋巴细胞数及中性粒细胞百分比均低于肺气肿模型组(P0.05)。 2、ELISA结果显示BMSC治疗组中IL-17、IL-6水平较正常对照组显著升高（P0.05），但低于模型组（P0.05）； 3、肉眼观BMSC治疗组、肺气肿模型组均可见肺体积增大，肺气肿样改变，BMSC治疗组较模型组肺气肿样改变减轻；肺组织病理切片比较肺组织平均内衬间隔(MLI)、单位面积平均肺泡数(MAN)差异均有统计学意义（P0.05）。结论： 1、利用全骨髓贴壁法可成功分离纯化间充质干细胞（BMSC），分离培养所得的间充质干细胞性状稳定，状态良好，细胞形态学和表型鉴定符合骨髓间充质干细胞的特点，多次传代后能保持其原有的形态学特点； 2、按1u/g猪胰蛋白酶气管内滴注可以成功建立大鼠肺气肿模型，其病理学改变与人类全小叶型肺气肿相似； 3、经尾静脉注射的BMSC能在肺气肿模型肺组织内存留，除能改善肺气肿的病理改变外，还可以调节炎症因子水平。炎症反应和自身免疫的紊乱可能是导致的肺实质破坏可能是肺气肿主要的发病机制。

【关键词】：
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R563.3
【目录】：

下载全文更多同类文献

CAJ全文下载

(如何获取全文？欢迎：购买知网充值卡、在线充值、在线咨询)

CAJViewer阅读器支持CAJ、PDF文件格式

【参考文献】

中国期刊全文数据库前3条

1 陈辉;屈晓娜;吴世满;;豚鼠肺气肿模型肺组织Foxp_3、RORγt及IL-17的表达及意义[J];中国呼吸与危重监护杂志;2012年03期

2 罗登攀;欧阳瑶;张洪球;;白细胞介素-17在慢性阻塞性肺疾病急性加重期的变化及意义[J];中国预防医学杂志;2010年04期

3 马碧蔓;刘朝晖;梁志科;关丽君;汪新龙;;蛋白酶体抑制剂MG-132对慢性阻塞性肺疾病大鼠炎症因子表达的影响[J];中国呼吸与危重监护杂志;2013年03期

【共引文献】

中国期刊全文数据库前10条

1 刘磊;刘作金;;骨髓间充质干细胞诱导免疫耐受的研究进展[J];国际检验医学杂志;2013年18期

2 许键炜;申长清;赵芳芳;舒莉萍;何志旭;;骨髓间充质干细胞对大鼠佐剂性关节炎防治的实验研究[J];重庆医学;2013年29期

3 WahWah TheinHan;Jun Liu;Minghui Tang;Wenchuan Chen;Linzhao Cheng;Hockin H.K.Xu;;Induced Pluripotent Stem Cell-derived Mesenchymal Stem Cell Seeding on Biofunctionalized Calcium Phosphate Cements[J];Bone Research;2013年04期

4 魏健平;叶小群;;成体干细胞在慢性肺疾病中应用的研究现状[J];重庆医学;2013年32期

5 袁茵;陈丹亮;陈璇;邵红伟;黄树林;;人脐带间充质干细胞通过激活Notch信号通路促进白血病细胞株Jurkat的体外存活(英文)[J];南方医科大学学报;2014年04期

6 刘丽华;梁秋丽;覃寿明;;慢性阻塞性肺病急性加重期合并焦虑抑郁的临床分析[J];华夏医学;2014年04期

7 赵立强;栾巍;;ARDS16例诊治分析[J];内蒙古医学杂志;2013年08期

8 王芳;汤永红;;间充质干细胞免疫原性和免疫调节作用的研究进展[J];中南医学科学杂志;2014年01期

9 孙燕妮;杨洁;王丽敏;承解静;刘军;;大黄素对脓毒症急性肺损伤大鼠水通道蛋白1表达的影响[J];临床荟萃;2014年08期

10 金国民;陆志峰;;慢性阻塞性肺病合并支气管扩张的临床研究[J];大家健康(学术版);2014年14期

中国重要会议论文全文数据库前1条

1 陈常辉;余方圆;;干细胞关节腔内注射修复软骨损伤的研究与进展[A];中国医药教育论坛-中国医药教育协会第三届三次理事大会暨学术年会论文专辑[C];2013年

中国博士学位论文全文数据库前10条

1 褚淑媛;慢性阻塞性肺疾病患者调节性T细胞核转录因子Foxp3的表达及单核苷酸多态性的研究[D];广西医科大学;2013年

2 朱天琦;GDNF和NT-3双基因诱导BMSCs分化为神经样细胞的实验研究[D];华中科技大学;2013年

3 杨舟鑫;CD106是具有强免疫调节功能的胎盘绒毛膜间充质干细胞的标志[D];北京协和医学院;2013年

4 王有为;脐带间充质干细胞临床前安全性研究[D];北京协和医学院;2013年

5 解芳;构建同种异体组织工程骨及修复犬颅骨临界骨缺损的实验研究[D];北京协和医学院;2013年

6 李阳;人脂肪间充质干细胞向雪旺细胞的诱导分化及对外周面神经损伤修复的实验研究[D];北京协和医学院;2013年

7 农耀明;膜片钳原位检测HCN4基因修饰的MSCs移植至大鼠心脏后的细胞电生理变化[D];第三军医大学;2013年

8 张明慧;人骨髓间充质干细胞对肺癌细胞增殖转移及自噬凋亡的调控作用研究[D];第三军医大学;2013年

9 李廷军;自体骨髓间充质干细胞移植促进肝硬化肝脏门静脉栓塞剩余肝脏再生的研究[D];第三军医大学;2013年

10 张嵬;hUC-MSC_S/hHGF基因修饰的hUC-MSC_S移植在心肌损伤修复中的实验研究[D];天津医科大学;2013年

中国硕士学位论文全文数据库前10条

1 张睿花;不同剂量舒利迭对COPD稳定期治疗及细胞因子的相关性研究[D];吉林大学;2011年

2 马晓峰;维生素D对慢性阻塞性肺疾病的影响[D];兰州大学;2013年

3 施凯;PM2.5对COPD患者单核细胞来源巨噬细胞的吞噬功能和氧化损伤的影响[D];兰州大学;2013年

4 高增艳;红霉素对COPD大鼠组蛋白去乙酰化酶2活性与糖皮质激素抵抗的影响及机制[D];郑州大学;2013年

5 李金红;CCL-18在慢性阻塞性肺疾病患者血清中的表达水平及意义[D];郑州大学;2013年

6 于晓云;骨髓间充质干细胞移植对慢性脑缺血大鼠海马区Cdc42表达及认知功能的影响[D];郑州大学;2013年

7 马云鹏;应用大块平铺法对人脐带间充质干细胞分离、传代、冻存及复苏的研究[D];河北医科大学;2013年

8 马欣;模拟肝脏组织微环境对人脐带间充质干细胞向肝细胞样细胞分化的影响[D];河北医科大学;2013年

9 吴明霞;AECOPD患者病情严重程度与TNF-a、IL-10、RANTES水平的相关性研究[D];河北医科大学;2013年

10 李海锋;骨髓间充质干细胞治疗溃疡性结肠炎的可行性研究[D];山西医科大学;2013年

【二级参考文献】

中国期刊全文数据库前6条

1 宋小莲;王昌惠;白冲;;脂多糖结合熏烟法和单纯熏烟法建立慢性阻塞性肺病大鼠模型的比较[J];第二军医大学学报;2010年03期

2 钟小宁,柳广南,熊君福;慢性阻塞性肺疾病气道炎症研究进展[J];国外医学(内科学分册);2000年01期

3 邢莎莎;罗坤;吴世满;;弹性蛋白抗体自体免疫与肺气肿形成[J];中国医疗前沿;2011年04期

4 范伟;刘朝晖;张溪林;梁志科;曾祥富;;慢性阻塞性肺疾病大鼠膈肌萎缩信号通路与白细胞介素17相关性的研究[J];中国呼吸与危重监护杂志;2011年06期

5 许三林,吴人亮,陈春莲,郝春荣;上皮钙粘附素在吸烟小鼠呼吸道上皮损伤修复中表达的研究[J];中华结核和呼吸杂志;1999年07期

6 张颖,李廷谦,王刚,常静,毛兵,王蕾,迟焕海,万美华;痰热清注射液治疗慢性阻塞性肺疾病急性加重期(痰热阻肺证)的随机对照试验[J];中国循证医学杂志;2004年05期

【相似文献】

中国期刊全文数据库前1条

1 郑顺利,孙上云,马小红,梁红;肺叶切除作为一种肺减容术方法的可行性[J];广东医学;2005年06期

中国硕士学位论文全文数据库前2条

1 王丽雁;骨髓间充质干细胞对肺气肿模型大鼠的影响[D];安徽医科大学;2014年

2 邓丹;蛋白酶诱导猪肺气肿模型的建立与肺气肿引起早期心脏大血管形态学改变的初探[D];川北医学院;2014年