HTR2B在纤维化大鼠肺组织中的表达变化及其与上皮细胞间质转化的关系

  本文关键词：5-HTR2B在纤维化大鼠肺组织中的表达变化及其与上皮细胞间质转化的关系，，由笔耕文化传播整理发布。

《南华大学》 2014年

5-HTR2B在纤维化大鼠肺组织中的表达变化及其与上皮细胞间质转化的关系

涂容芳  

【摘要】：目的： 观察5-羟色胺2B受体（5-Hydroxytryptamine2B receptor,5-HTR2B）在博莱霉素(bleomycin,BLM)致大鼠肺纤维化中的表达变化，探讨5-HTR2B在肺纤维化发生中的作用及与上皮细胞间质转化(epithelial-mesenchymal transition,EMT)的关系。 方法： 健康雄性SD大鼠45只，随机数字表法分为对照组、BLM组、泼尼松+BLM组，每组各15只。BLM组和泼尼松+BLM组用BLM(5mg／kg)一次性气管内灌注复制肺纤维化模型。从造模当天开始，对照组、BLM组分别每天给予生理盐水灌胃，剂量为14mL/kg。泼尼松+BLM组大鼠给予醋酸泼尼松混悬液，给药剂量为每天0.56mg/kg。各组分别于第7、14和28d处死动物5只，取出肺组织，行苏木精-伊红（Haematoxylin–eosin,HE)、Masson染色，观察大鼠肺组织炎症和纤维化的程度；碱性水解法检测肺组织中羟脯氨酸的量；免疫组化法及逆转录-聚合酶链反应（Reverse Transcription Ploymerase Chain Reaction,RT-PCR）法检测肺组织中5-HT R2B、上皮细胞标记物E-钙粘素(e-cadherin,E-Cad)和间质细胞标记物α-平滑肌肌动蛋白（α-smooth muscle action,α-SMA）mRNA及蛋白的表达水平。 结果： 1、HE染色：与对照组相比，BLM组7d以炎症反应为主，14d开始出现较多肺成纤维细胞；28d肺组织见大量肌成纤维细胞，肺纤维化模型形成；泼尼松+BLM组也出现肺纤维化改变，但纤维化程度较BLM组轻。 2、HYP含量：与对照组相比，BLM组HYP含量均增高（P 0.05），以28d时达最高。泼尼松+BLM组较BLM组含量下降（P 0.05）。 3、5-HTR2B、α-SMA及E-cad蛋白与mRNA表达情况：正常肺组织中，5-HTR2B、α-SMA为低表达，E-cad为高表达。与对照组织相比较，免疫组化及RT-PCR结果显示肺纤维化大鼠肺组织中5-HTR2B、α-SMA的蛋白及mRNA表达均增强（P0.05），28d时达高峰；E-cad蛋白及mRNA表达均减弱（P0.05），28d时达最低；泼尼松+BLM组，相应时间点5-HTR2B、α-SMA蛋白及mRNA表达有所下降（P0.05），E-cad蛋白及mRNA表达不同程度增强（P0.05）。 4、相关性分析：肺纤维化大鼠肺组织中5-HTR2B与α-SMA间的蛋白表达呈正相关性（r=0.976，P0.05），5-HTR2B与E-Cad间的蛋白表达呈负相关性（r=-0.927，P0.05）。 结论： 5-HTR2B参与BLM致肺纤维化机制，机制之一可能与诱导EMT发生有关。

【关键词】：
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R563.9
【目录】：

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