硫化氢对大鼠蝮蛇毒急性肺损伤肺泡表面活性物质形成的影响

发布时间：2018-11-02 19:51

【摘要】：目的观察增加或减少外源性H2S的生成是否影响蝮蛇毒致急性肺损伤中肺泡表面活性物质的变化，探究H2S对蝮蛇毒致大鼠ALI的作用机制。方法 1.分组：健康成年雄性SD大鼠(200±20g)共36只，随机分为6组，每组6只，分别为I组生理盐水对照组，II组蝮蛇毒素组(1.5mg/kg)，III组低剂量硫氢化钠(sodiumhydrosulfide，NaHS)组(蝮蛇毒+NaHS0.78mg/kg)，IV组中剂量硫氢化钠组(蝮蛇毒+NaHS1.56mg/kg)，V组高剂量硫氢化钠组(蝮蛇毒+NaHS3.12mg/kg)，VI组CSE抑制剂L-炔丙基甘氨酸(PPG)处理组(蝮蛇毒素+PPG30mg/kg)。 2.方法：将生理盐水和蝮蛇毒素分别腹腔注射给I组和剩余组，3小时后各组再分别腹腔注射生理盐水、低中高剂量硫氢化钠和L-炔丙基甘氨酸。蝮蛇毒素注射6小时后收集肺泡灌洗液(BALF)和相应的肺组织标本，然后处死大鼠。使用光学显微镜对各组肺组织的病理学改变进行观察并对其进行肺损伤病理评分(HE染色)；测定肺组织中SP-A、B、C mRNA基因表达的变化(RT-PCR法)；测定各组大鼠BALF中总蛋白(TP)(BCA法)及总磷脂(TPL)含量(比色法)的变化。结果 1.肺组织病理学改变（1）大体观：I组肺组织肉眼观大致正常，呈粉红色，质软，表面光滑，无明显出血点和水肿。II组肺组织表面散在点片状出血灶，充血水肿明显。III~V组肺组织充血水肿较II组减轻，尤以V组明显。VI组肺损伤程度最严重，肺组织外观呈暗红色，表面可见大片出血灶。（2）光镜下观：I组肺组织结构正常，肺泡无水肿及透明膜形成，肺间质没有增宽，肺泡腔及肺间质未见红细胞漏出及炎症细胞侵润，无肺不张。与I组相比，II组肺组织结构被损坏，可见肺泡塌陷，肺泡间隔增宽，大量炎性细胞浸润，部分肺泡还有透明膜形成，IQA显著升高(P0.01)。与II组相比，III组肺损伤未见明显改善(P0.05)；IV、V组可见肺损伤情况减轻，IQA下降(P0.01)，但与I组比仍有明显肺损伤(P0.01)；与II组相比，VI组肺损伤明显加重，肺泡塌陷，广泛透明膜形成，伴有肺不张，IQA升高(P0.01)。 2.肺组织中SP-A、SP-B和SP-C mRNA基因表达水平变化与I组比较，II组肺组织中SP-A、SP-B和SP-C mRNA基因表达均明显降低，两组间比较有统计学意义(P 0.01)。与II组比较，III组肺组织SP-A、SP-B、SP-C mRNA基因表达升高不显著(P0.05)；IV、V组肺组织中SP-A、SP-B、SP-C mRNA基因表达均升高(P0.01)；VI组肺组织SP-A、SP-B、SP-C mRNA基因表达均有明显降低(P 0.05)，有统计学意义。 3.肺泡灌洗液中TP和TPL的水平变化与I组比较，II组BALF中TP含量明显升高(P0.01)，TPL含量明显降低(P0.01)。与II组比较，IV、V组BALF中TP含量明显降低(P0.05)，TPL含量明显升高(P0.05)。与II组比较，VI组BALF中TP含量明显升高，，TPL含量明显降低，有统计学意义(P0.01)。结论 1.给予NaHS能使SP-A、SP-B和SP-C mRNA的基因表达增强， TP含量降低和TPL含量提高，肺组织病理评分降低，从而减轻大鼠的肺损伤程度。而给予PPG能抑制SP-A、SP-B和SP-C mRNA的基因表达，TP含量升高和TPL含量降低，肺组织病理评分升高，从而加重大鼠的肺损伤程度。 2.H2S对蝮蛇毒大鼠急性肺损伤的保护作用可能是通过增强肺泡SP-A、SP-B和SP-C mRNA的基因表达，降低TP和升高TPL含量，降低肺组织病理评分来实现的。
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【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R563

【共引文献】