IL-35蛋白对小鼠铜绿假单胞菌肺炎的干预作用

  目的:研究白介素35(IL-35)蛋白在小鼠铜绿假单胞肺炎中的作用,并同步观察其对白介素8(IL-8)和白介素17(IL-17)表达水平的影响,探讨白介素35蛋白在铜绿假单胞菌肺炎中的可能效用,期望为绿假单胞菌肺炎的临床治疗提供新的治疗方式和途径。方法:1.选用雄性健康清洁级昆明小鼠90只,其鼠龄为6-8周、体重约为20-30g,按随机分配原则分成正常对照组(生理盐水组:30只)、肺部感染组(PA组:30只)、干预组(30只)。PA组:造模前12小时自腹腔注射生理盐水1ml,戊巴比妥钠(50mg/kg)麻醉小鼠后固定,待麻药显效后,常规消毒铺巾,依次切开小鼠颈部皮肤、皮下、皮下组织,显露气管上段,从气管环状软骨间隙内穿刺注入铜绿假单胞菌(PA)菌液0、03ml(2个麦氏单位浓度即6×108cfu/ml),以建立小鼠肺炎模型;干预组:在造模前12小时自腹腔注射白介素35蛋白1ml(含白介素35蛋白2ug),然后用戊巴比妥钠麻醉小鼠后固定,待麻药显效后,常规消毒铺巾,依次切开小鼠颈部皮肤、皮下、皮下组织,显露气管上段,从气管环状软骨间隙内穿刺注入铜绿假单胞菌(PA)菌液0、03ml(2个麦氏单位浓度即6×108cfu/ml),以建立小鼠干预组模型;正常对照组:操作同前两组,在造模前12小时自腹腔注射生理盐水1ml,戊巴比妥麻醉小鼠后固定,其后步骤同前两组,最后从气管环状软骨间隙内穿刺注入生理盐水0.03ml作为正常对照。造模成功后,三个实验组均在第3、9、24小时随机抓取10只小鼠,留置标本后处死小鼠。2.取各个实验组在不同时间点小鼠右肺肺泡灌洗液,经离心后,用酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbnent assay,ELISA)检测各组肺泡灌洗液中IL-17、IL-8的浓度;取处死小鼠左肺大部分肺组织经甲醛固定后,行HE染色比较肺炎炎症的范围和程度,取处死小鼠左肺小部分肺组织,用于制作肺组织匀浆并行细菌培养及菌落计数。3.统计学方法:采用SPSS 19.0软件对实验数据进行统计分析。结果:1.感染组、干预组小鼠肺组织在各个时间点存在明显的炎症改变,以24小时组炎症改变最明显,但干预组在3、9、24小时炎症改变明显轻于感染组,两者比较存在显著性差异(P0.05);2.干预组各时间组IL-17,IL-8表达水平明显低于感染组,且有显著的统计学意义(P均0.05)。结论:(1).IL-35对小鼠铜绿假单胞菌肺炎具有保护作用,可明显减轻其炎症反应。(2)IL-35减轻小鼠铜绿假单胞菌肺炎炎症反应可能与抑制炎性介质IL-8,IL-17有关。

【学位授予单位】：四川医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R563.1
【目录】：

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 叶新明;钱克俭;;重症肺炎支原体肺炎肺泡灌洗液中TNF-α、IL-6、IL-8、IL-10水平观察[J];南昌大学学报(医学版);2010年04期

2 王宝西,杨敏,李武军;IL-8、TNF-α在小儿肺炎支原体感染性肺炎中作用[J];临床儿科杂志;2004年04期

3 周艳春;李明才;牛青霞;柳晓金;谢燕飞;;流体力学注射IL-35质粒对ConA诱导小鼠肝损伤的保护作用[J];现代生物医学进展;2010年06期

中国硕士学位论文全文数据库 前1条

1 胡亚东;IL-35在病毒性心肌炎发病中的作用及其机制研究[D];苏州大学;2013年

【共引文献】

中国期刊全文数据库 前10条

1 李劲松;张利;江星;高海英;;联合方案治疗儿童重症支原体肺炎临床疗效评价[J];安徽医药;2011年06期

2 侯春蕾;毕秀杰;杜娇娇;;联合方案治疗儿童重症支原体肺炎分析[J];当代医学;2009年16期

3 孙激扬;季伟;周卫芳;陈正荣;;肺炎患儿血小板增高的临床意义[J];中国儿童保健杂志;2011年12期

4 唐弋均;王三亨;;重症肺炎患者血清肿瘤坏死因子α和白介素-10的变化及临床意义[J];广西医学;2014年03期

5 田芳;韩波;段梅;;肺炎支原体肺炎患儿血清TNF-α、IL-6及半乳凝素3浓度测定的临床意义[J];中国当代儿科杂志;2014年10期

6 童佳兵;李泽庚;季红燕;;清肺解毒饮对不同老龄肺炎大鼠模型肺组织细胞因子含量变化的影响[J];中华中医药杂志;2015年11期

7 郭平;周德媛;;甲泼尼龙辅助治疗儿童难治性肺炎支原体肺炎疗效分析[J];海峡药学;2011年12期

8 柳卫凰;刘先洲;饶帮忠;汤纪路;白瑞珍;宗润芝;;肺炎支原体诱导A549细胞分泌白细胞介素-8及核因子-κB阻断剂的抑制作用[J];武汉大学学报(医学版);2006年03期

9 王晓花;张莉;于莹;;儿童支原体肺炎血清IL-8、TNF-α和hs-CRP的检测意义[J];南京医科大学学报(自然科学版);2012年07期

10 李寿军;张云;武能舜;孙剑华;;小儿支原体肺炎IL-6、IL-10、TNF-α检测及其与病情严重程度的关系[J];南昌大学学报(医学版);2012年08期

中国硕士学位论文全文数据库 前10条

1 宋婧;453例小儿支原体肺炎临床分析[D];吉林大学;2011年

2 彭波;沙白肺炎合剂对反复SP感染老龄大鼠肺脏TNF-α、IFN-γ等因子的调节作用[D];成都中医药大学;2011年

3 肖光文;肺炎嗜衣原体Cpn0425重组蛋白的克隆表达及诱导THP-1细胞产生前炎症细胞因子和凋亡的研究[D];南华大学;2010年

4 田芳;肺炎支原体肺炎患儿对照组TNF-α、IL-6及半乳凝素-3的含量及意义[D];山东大学;2011年

5 孙迪;白细胞介素-8基因多态性与尘肺易感性研究[D];河北联合大学;2011年

6 储矗;NF-κB、TNF-α、IL-8及细胞免疫在儿童社区获得性肺炎的表达[D];苏州大学;2011年

7 包海军;体外循环心脏直视手术中乌司他丁对肝脏的保护作用[D];兰州大学;2006年

8 王峻;婴幼儿肺炎患儿血清IL-8、TNF-α、IgE和外周血EOS水平临床意义的研究[D];山东大学;2006年

9 胡向文;极端气候条件下新生儿感染性肺炎发生规律和病原学研究及其TNF-a、IL-6、sIL-2R水平的变化[D];南昌大学;2012年

10 李成帅;肺炎支原体合并EB病毒感染的临床研究及免疫分析[D];大连医科大学;2012年