Claudin在铜绿假单胞菌感染所致急性肺损伤中表达变化及其意义

发布时间：2017-03-18 07:02

  本文关键词：Claudin在铜绿假单胞菌感染所致急性肺损伤中表达变化及其意义，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：第一部分Claudin在铜绿假单胞菌感染所致急性肺损伤中表达变化情况 目的本实验通过建立大鼠肺损伤模型,旨在研究claudin在铜绿假单胞菌(PA)感染所致急性肺损伤(ALI)中的表达变化情况及其可能的意义。 方法实验选用清洁级SD大鼠,随机分为正常大鼠(N组)、阴性对照组(C组)和铜绿假单胞菌组(P组),C组和P组分别设气道滴入生理盐水(NS)或PA后3h、9h和24h三个时间点。腹主动脉抽血行动脉血气分析；腹腔放血处死后,收集肺组织标本,行肺泡灌洗术,检测肺泡灌洗液(BALF)中总蛋白浓度；HE染色光镜下观察肺组织病理改变情况并行肺损伤评分,以评价造模后肺损伤程度。检测肺组织mRNA及蛋白水平claudin-3、-4、-18和-5表达,以观察PA感染所致肺损伤中claudin表达变化情况。 结果P组各个时间点动脉血氧分压均较N组和C组各个时间点下降,P-24h下降与P-3h、P-9h比较有显著差异：BALF中总蛋白浓度P组较N组和C组各个时间点有明显升高,P-3h、P-9h、P-24h总蛋白浓度显著逐渐增高。光镜下可见P组有明显病理改变,P-3h有少许炎性细胞浸润；P-9h肺泡腔增宽,肺泡间隔内大量中性粒细胞浸润：P-24h可见肺泡间隔增宽更为明显,有大量中性粒细胞浸润,伴肺泡间隔内毛细血管扩张、充血和部分肺不张；肺损伤评分P-24h显著高于P-3h、P-9h。Claudin-4、-18和-5mRNA在P-24h时显著增高而claudin-3mRNA则无明显变化；claudin-3、-4、-18和-5蛋白水平均无明显变化。 结论1.大鼠气道内注入PA出现病理生理学变化,时间越长损伤越明显,以P-24h损伤最为严重。2.Claudin-4、-18和-5mRNA在损伤最重的P-24h表达明显高于其他时间点以及C组、N组,而claudin-3、-4、-18和-5蛋白水平则没有明显改变,肺组织中claudin-4、-18和-5mRNA增高可能是肺损伤早期增强上皮屏障功能的一种保护性机制。 第二部分Claudin在铜绿假单胞菌所致急性肺损伤中表达变化的意义 目的本实验通过建立大鼠肺损伤模型,观察PA引起的claudin表达改变对紧密连接(TJs)结构的影响,并在BALF中检测claudin蛋白的变化,分析其与肺损伤程度的相关性,以了解claudin对肺损伤的意义。 方法电镜下观察肺泡上皮细胞、肺血管内皮细胞以及上皮细胞之间的TJs结构；检测肺组织表面活性蛋白SP-A、SP-B和SP-C,假性血管性血友病因子(vWF)mRNA表达情况；行肺泡灌洗术,检测BALF中claudin-3、-4、-18和-5浓度并对BALF中claudin的含量与肺损伤评分做spearman相关分析,分析claudin表达变化在急性肺损伤中的意义。 结果电镜观察P组肺组织超微结构呈现病理变化,P-3h肺泡上皮细胞轻度破坏,细胞之间TJs较正常。P-9h肺泡上皮细胞特别是I型肺泡上皮细胞明显破坏,肿胀、呈空泡状,TJs不紧密。P-24h I型肺泡上皮翘起、呈空泡状、部分上皮结构消失,可见内皮细胞破裂,严重处可见气血屏障三层结构均破坏,TJs结构不易在镜下找到。肺组织SP-A、SP-B、SP-C及vWF mRNA表达P组各个时间点与C组各个时间点及N组之间均无显著变化。BALF中claudin-3、-4和-18在N组和C组各个时间点含量均较低,而在P组明显增高,且P-3h、P-9h、P-24hBALF中claudin含量显著逐渐增高,spearman相关分析显示BALF中claudin-3、-4和-18含量分别与肺损伤评分显著正相关。Claudin-5在N组和C组各个时间点含量低,在PA造模后3h迅速增高,9h、24h较3h略有增高,claudin-5与肺损伤评分无明显相关性。 结论1BALF中Claudin-3、-4和-18含量在P-3h、P-9h和P-24h逐渐升高,并与肺损伤严重程度正相关,可能成为PA感染所致ALI早期肺泡上皮细胞损伤潜在的分子标记物。2.BALF中claduin-5含量在3h、9h和24h均升高但与肺损伤严重程度无明显相关,提示BALF中claduin-5含量增高不能作为早期肺损伤微血管内皮细胞破坏的分子标记物。
【关键词】：Claudin 急性肺损伤 铜绿假单胞菌 Claudin 急性肺损伤 肺泡灌洗液 超微结构
【学位授予单位】：复旦大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R563.8
【目录】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-9
• 引言9-14
• 参考文献11-14
• 第一部分 Claudin在铜绿假单胞菌感染所致急性肺损伤中表达变化情况14-40
• 前言14-15
• 材料和方法15-25
• 结果25-33
• 讨论33-36
• 参考文献36-40
• 第二部分 Claudin在铜绿假单胞菌感染所致急性肺损伤中表达变化的意义40-58
• 前言40-41
• 材料与方法41-47
• 结果47-54
• 讨论54-56
• 参考文献56-58
• 全文小结58-59
• 综述59-68
• 参考文献64-68
• 硕士期间成果68-69
• 致谢69-71

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 宋琳,瞿介明;铜绿假单胞菌肺部炎症及其肺损伤的发病机制[J];国外医学.呼吸系统分册;2005年07期

2 王志芳;张旭刚;;呼吸道感染的铜绿假单胞菌质粒介导的AmpCβ-内酰胺酶耐药性研究[J];临床荟萃;2007年24期

3 李倬哲,瞿介明,何礼贤,陈雪华,王葆青;粒细胞减少大鼠铜绿假单胞菌肺部感染模型的建立及炎症反应研究[J];中华结核和呼吸杂志;2001年11期

4 程晓明,朱波,张彦琦,钱桂生;急性肺损伤和急性呼吸窘迫综合征604例临床分析[J];中国现代医学杂志;2004年15期

  本文关键词：Claudin在铜绿假单胞菌感染所致急性肺损伤中表达变化及其意义，由笔耕文化传播整理发布。

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本文编号：254068