腺病毒感染对CSE腹腔注射肺气肿小鼠肺部炎症及凋亡的影响

发布时间：2019-10-02 11:10

【摘要】：目的： 探讨腺病毒感染对CSE(cigarette smoke extract,香烟烟雾提取物)腹腔注射肺气肿小鼠肺功能、肺病理、肺部炎症、蛋白酶、凋亡及增殖的影响。 方法： 36只SPF级BALB/c小鼠随机分为PBS组、CSE组和CSE+Adenovirus组,每组12只,制备CSE。各组分别在第1、11、22天注射PBS或CSE,第15天气管内滴注PBS或腺病毒,第28天处理各组小鼠。病毒处理后第7天(造模第22天)每组随机选取2只小鼠制备肺组织冰冻切片观察RFP荧光；小动物肺功能检测系统检测肺功能；HE染色观察肺部病理形态学改变,测定平均内衬间隔(MLI)、肺泡破坏指数(DI)和平均肺泡隔厚度(MAST),行气道和血管炎症半定量评分；免疫组化法检测肺组织MMP-2和MMP-9表达；TUNEL法检测肺组织凋亡并计算凋亡指数(AI)；免疫组化法检测增殖标志物Ki67表达,反映肺组织增殖情况,并计算增殖指数(PI)。 结果： (1) CSE+Adenovirus组肺组织可见红色荧光,PBS组和CSE组均未观察到红色荧光。 (2)肺功能：与PBS组比较,CSE组与CSE+Adenovirus组小鼠肺阻力(RAW)增高,动态肺顺应性(Cdyn)降低,差异均具有统计学意义(p0.05)。与CSE组比较,C SE+Adenovirus组RAW及Cdyn无明显差异(p0.05)。各组间小鼠呼吸频率、潮气量、每分钟通气量、呼气时间、吸呼比差异均无统计学意义(p0.05)。 (3)肺病理：与PBS组比较,CSE组及CSE+Adenovirus组肺泡破坏更重,MLI和DI增高,差异有统计学意义(p0.05),MAST降低,差异亦具有统计学意义(p0.05)。与CSE组比较,CSE+Adenovirus组肺泡破坏程度无明显区别,MLI、DI及MAST均无明显区别,差异无统计学意义(p0.05)。 (4)气道及血管炎症：CSE+Adenovirus组气道管壁周围可见大量炎症细胞浸润,气道炎症半定量评分示,与PBS组比较,CSE组评分均值稍高于PBS组,但无统计学意义(p0.05),CSE+Adenovirus组评分显著增高,有统计学意义(p0.05)；与CSE组比较,CSE+Adenovirus组气道炎症评分也显著增高,有统计学意义(p0.05)。CSE+Adenovirus组血管管壁周围可见炎症细胞浸润,血管炎症半定量分析显示,与PBS组比较,CSE组血管炎症评分无统计学差异(p0.05), CSE+Adenovirus组血管炎症评分显著增高,有统计学意义(p0.05)；与CSE组比较,CSE+Adenovirus组血管炎症评分显著增高,有统计学意义(p0.05)。 (5)MMP-2及MMP-9表达：与PBS组比较,CSE组和CSE+Adenovirus组MMP-2和MMP-9表达均增高,有统计学意义(p0.05)；与CSE组比较,CSE+Adenovirus组该两组蛋白表达亦增高,有统计学意义(p0.05)。 (6)凋亡：与PBS组比较,CSE组与CSE+Adenovirus组DI增高,差异有统计学意义(p0.05)；与CSE组比较,CSE+Adenovirus组DI显著增高,差异有统计学意义(p0.05)。 (7)增殖：与PBS组比较,CSE组与CSE+Adenovirus组肺组织Ki67表达增多,PI增高,差异有统计学意义(p0.05)。与CSE组比较,CSE+Adenovirus组PI无显著差别(p0.05)。 结论： CSE腹腔注射能建立肺气肿小鼠模型。腺病毒感染可促进CSE腹腔注射肺气肿小鼠肺部炎症反应,上调蛋白酶的表达,增加凋亡水平。
【图文】：

镜（xlOO)下观察，CSE+Adenovims组肺组织可见红色焚光，分布较为均勾，而PBS组和CSE组均未观察到红色焚光（图3-1 )。■■■图3-1焚光显微镜下小鼠肺部红色焚光蛋白的表达（X100)注：A. PBS 组；B. CSE 组；C. GSE+Adenovi rus 组。3.3小鼠肺功能的检测与PBS组比较，CSE组与CSE+Adenovirus组小鼠肺阻力（RAW)增高，动态肺顺应性（Cdyn)降低，差异均具有统计学意义（p<0.05，，表3-1;图3-2，图3-3)。但与CSE组比较，CSE+Adenoviras组小鼠RAW及Cdyn无明显差异(p>0.05,表 3-1;图 3-2，图 3-3)。各组间小鼠呼吸频率（f)

差异亦具有统计学意义（p<0.05,表3-2，图3-7)。与CSE组比较，CSE+Adenovirus组MLI、DI以及MAST均无明显区别，差异无统计学意义（/7>0.05,表 3-2，图 3-5，图 3-6,图 3-7)。
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：博士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R563.3

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本文编号：2544904