sTREM-1对小鼠肺炎克雷白杆菌肺炎诊断意义的实验性探讨

发布时间：2020-02-24 04:29

【摘要】：目的：测定肺炎克雷白杆菌肺炎小鼠治疗前后支气管肺泡灌洗液、血液及肺组织中sTREM-1的表达水平变化并与正常小鼠进行对比，探讨sTREM-1作为炎症标志物对肺炎克雷白杆菌肺炎的诊断意义。方法：选取昆明小鼠分为生理盐水对照组、肺炎组及治疗组，每组20只。取自临床感染病人痰培养获得的肺炎克雷白杆菌，经VITEK-2系统鉴定确认，由气管注入小鼠肺部，建立小鼠肺炎克雷白杆菌肺炎感染模型。对照组经气管缓慢注入等量无菌生理盐水。选用头孢他啶按成人与小鼠用药系数计算出小鼠等效治疗剂量，对治疗组小鼠进行腹腔注射治疗，每日总药量分两次，每隔12小时一次，，治疗三天。对存活小鼠的肺脏行大体标本及病理组织学观察。采用RT-PCR检测各组小鼠肺组织IL-6基因表达情况；用ELISA法检测各组小鼠肺泡灌洗液、血液及肺组织中sTREM-1表达含量变化以及血清CRP含量。实验结果采用SPSS15.0进行统计学分析。结果:对照组小鼠肺组织肉眼观察示表面颜色红润，质地柔软，肺组织无充血水肿现象。肺炎组肺组织颜色变深，质地变硬，水肿及充血现象明显，治疗后肺组织炎症反应明显减轻，颜色红润，质地柔软，水肿及充血现象不明显。IL-6标准化积分吸光度值（NII）肺炎组与对照组相比显著增高，治疗组与肺炎组相比明显下降，有统计学意义（P0.05）。 sTREM-1在肺泡灌洗液、血液及肺组织中的表达含量，肺炎组分别为420.48±57.99pg/ml、2372.17±229.00pg/ml、522.81±56.24pg/ml，较对照组（分别为34.69±2.92pg/ml、296.52±28.63pg/ml、45.98±3.17pg/ml）明显升高，有统计学意义（P0.05）；经头孢他啶治疗后治疗组三种样本中的sTREM-1表达含量（分别为210.73±58.47pg/ml、694.30±116.19pg/ml、188.49±59.22pg/ml）较肺炎组比较均明显下降，但仍高于对照组，均有统计学意义（P0.05）。肺炎组与治疗组肺组织sTREM-1与IL-6标准化积分吸光度值（NII）有明显的相关性，肺组织sTREM-1随IL-6NII增高而增高（P0.05），经治疗后sTREM-1随IL-6NII降低而降低（P0.05）。肺炎组与治疗组血清sTREM-1与CRP表达有明显的相关性，sTREM-1随CRP表达量增高而增高（P0.05），经治疗后sTREM-1随CRP表达量降低而降低（P0.05）。应用ROC曲线评估sTREM-1与CRP诊断效能。血清sTREM-1ROC曲线下面积（AUC）为0.886，CRP为0.822，sTREM-1联合CRP诊断的AUC为0.938。当血清sTREM-1水平为915pg/ml时，诊断肺炎的敏感度为90%，特异度为65%，约登指数为0.55；当血清CRP水平为2.82ng/ml时，诊断肺炎的敏感度为85%，特异度为75%，约登指数为0.6；sTREM-1联合CRP诊断肺炎的敏感度为95%，特异度为80%，约登指数为0.75。结论：小鼠肺炎克雷白杆菌肺炎肺泡灌洗液、血液、肺组织中sTREM-1表达明显升高，经治疗后表达量均明显下降，提示sTREM-1对细菌性肺炎的诊断有一定的参考价值。
【图文】：

细菌生长曲线,液体培养基,肺炎克雷白杆菌,克雷白杆菌

法炎克雷白杆菌菌悬液制备实验室鉴定的肺炎克雷白杆菌于 LB 固体培养基平板划线取菌环接种到 LB 液体培养基中，水浴培养(37℃，190 rpm 处不同时间段细菌的吸光光度值（OD 值），绘制生长长曲线在对数生长期较为合适的时间点(培养7～11小时验前一天挑单菌落至 LB 液体培养基，37℃水浴培养 8 小生理盐水溶解稀释，测定波长为 620nm 处细菌稀释液 O[10]。

肺组织,肺泡,小鼠,肺炎

结果1.肺大体标本与肺病理组织学观察对三组小鼠肺大体标本观察，对照组小鼠肺部表面颜色鲜红，肺组织较柔软无明显的组织充血水肿现象。肺炎组小鼠肺组织颜色变深、肺组织变硬及水肿充血现象明显。治疗组小鼠肺组织颜色红润，质地柔软，炎症反应较轻，水肿及充血现象减轻，见图 2。三组小鼠肺组织病理切片镜下检查显示，对照组肺泡腔与肺泡壁界限清晰，无肺泡融合现象，肺泡腔内无炎性细胞侵润。肺炎组肺泡壁与肺泡腔界限不清，出现肺泡壁组织融合现象，肺泡腔内有大量中性粒细胞侵润。治疗组与肺炎组比较，炎症较轻，组织融合减轻，肺泡腔界限清晰，有少量炎性细胞浸润，见图 3
【学位授予单位】：大连医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2012
【分类号】：R563.1

【参考文献】