STAT6圈套寡核苷酸对哮喘小鼠肺组织Eotaxin表达的影响

发布时间：2020-03-24 03:26

【摘要】： 目的：支气管哮喘是以嗜酸粒细胞(EOS)浸润为主的慢性气道炎症性疾病,EOS在气道聚集是哮喘发病的中心环节。其信号转导和转录激活因子6(STAT6)持续活化与过度表达,促进Th2型淋巴细胞优势表达,诱导Eotaxin等趋化因子激活,从而趋化EOS等细胞向气道聚集,导致气道炎症和气道高反应等表现。本研究通过观察STAT6圈套寡核苷酸(ODN)对哮喘小鼠肺组织嗜酸性粒细胞趋化因子(Eotaxin)蛋白含量及其mRNA表达、肺泡灌洗液(BALF)中EOS、WBC、LYM计数及肺组织病理改变,探讨STAT6圈套ODN对支气管哮喘气道炎症的影响。方法：将32只BALB/C雌性小鼠随机分成4组：正常对照组(N)、哮喘组(A)、STAT6圈套ODN哮喘组(ST-ODN)及无序ODN哮喘组(SC-ODN),每组各8只；以卵蛋白(OVA)建立小鼠哮喘模型；合成STAT6圈套寡核苷酸(ODN)及无序ODN,以滴鼻给药的方式,分别干预STAT6圈套ODN哮喘组(ST-ODN)及无序ODN哮喘组(SC-ODN)小鼠。在荧光显微镜下观察小鼠肺组织冰冻切片中FITC-ODN的分布；收集肺泡灌洗液分行白细胞,嗜酸性粒细胞及淋巴细胞的计数和分类；HE染色肺组织切片观察气道炎症变化；用免疫组化法检测各小鼠模型肺组织Eotaxin蛋白；RT-PCR法检测各小鼠模型肺组织Eotaxin mRNA表达。结果：1、取F1TC-ODN给药小鼠的肺组织冰冻切片直接在荧光显微镜下观察,发现小鼠肺组织呈现绿色荧光,以气道上皮细胞及气道下浸润的炎性细胞更为显著。2、HE染色观察各组小鼠肺组织,ST-ODN组与哮喘组比较炎症反应明显减轻,而SC-ODN组与哮喘组比较无明显差异。3、哮喘组小鼠与空白对照组小鼠比较,支气管肺泡灌洗液中白细胞,淋巴细胞,嗜酸性粒细胞均增高,差异有统计学意义(P0.05)；ST-ODN组则明显低于哮喘组,经统计学处理,有统计学差异(P0.05)；而SC-ODN组与哮喘组比较则无显著差异(P0.05)。4、哮喘组Eotaxin蛋白表达明显高于空白对照组(P0.01)；ST-ODN组低于哮喘组(P0.01),均有统计学差异；而SC-ODN组Eotaxin蛋白表达与哮喘组比较,差异无统计学意义(P0.05)。5、哮喘组Eotaxin mRNA表达高于空白对照组(P0.01)；ST-ODN组Eotaxin mRNA表达则低于哮喘组(P0.01),有统计学差异；而SC-ODN组Eotaxin mRNA表达与哮喘组比较则无显著差异(P0.05)。结论：STAT6圈套ODN可通过滴鼻方式到达小鼠气道；能显著抑制哮喘小鼠肺组织中Eotaxin蛋白及其mRNA表达；降低哮喘小鼠BALF中EOS等炎性细胞的浸润；减轻哮喘气道炎症。
【图文】：

3肺组织病理改变正常对照组小鼠支气管粘膜上皮、粘膜肌层完好，支气管管腔规则，周围无明显炎症细胞浸润，管腔内无明显分泌物贮留(图IA);哮喘组小鼠支气管收缩，管腔狭窄，支气管粘膜上皮水肿、变性和脱落，基底膜暴露，细小的支气管内可见粘液栓细支气管和小血管的管壁轻度增厚，肺泡腔融合扩大，周围组织水肿(图IB);支气管和血管周围及其管腔内炎性细胞浸润，以嗜酸性粒细胞及淋巴细胞渗出为主(图IC);与哮喘组比较，ST-ODN组小鼠支气管壁的损伤明显减轻(图ID)，管壁周围的炎症细胞浸明显减少(图IE)。而SC~ODN组炎症情况则同哮喘组相近(图IF)。

鼠支气管收缩，管腔狭窄，支气管粘膜上皮水肿、变性和脱落，，基底膜暴露，细小的支气管内可见粘液栓细支气管和小血管的管壁轻度增厚，肺泡腔融合扩大，周围组织水肿(图IB);支气管和血管周围及其管腔内炎性细胞浸润，以嗜酸性粒细胞及淋巴细胞渗出为主(图IC);与哮喘组比较，ST-ODN组小鼠支气管壁的损伤明显减轻(图ID)，管壁周围的炎症细胞浸明显减少(图IE)。而SC~ODN组炎症情况则同哮喘组相近(图IF)。
【学位授予单位】：泸州医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R562.25

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