大气混合污染物对大鼠肺脏HO-1蛋白变化的影响

发布时间：2017-03-22 01:10

  本文关键词：大气混合污染物对大鼠肺脏HO-1蛋白变化的影响，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：随着经济建设和工业化的进展,环境大气中颗粒污染物及多种气体污染物日渐增多。本研究通过制备大气混合污染物动物模型的方法,在病理学及分子水平上,对环境大气中所含颗粒污染物及多种气体污染物引起肺损伤的作用机制加以探索和研究,分析血红素氧合酶1(HO-1)在大气混合污染物致肺损伤时的作用机制。 本实验所采用的试验动物模型,为颗粒污染物及多种气体污染物染毒大鼠，具体方法采用向大鼠进行气管内注入PM2.5混悬液进行染尘,然后,动态吸入含有SO_2、NO_2及CO的空气混合气体进行染毒,对大鼠的各种病变进行观察,从而模拟大气污染所诱导的肺损伤。观察染尘染毒后大鼠肺组织大体形态的病理学变化及分子水平变化,采用常规切片染色法观察大鼠肺组织组织病理学变化,以RT-PCR技术分析大鼠肺组织中HO-1的mRNA表达的变化,采用Western blot法分析大鼠肺组织中HO-1蛋白的表达变化,采用免疫组化方法分析大鼠肺组织中HO-1蛋白的表达部位及变化,通过测定HO-1反应系底物浓度变化,分析大鼠肺组织中HO-1蛋白活性的变化,通过上述方法,研究HO-1在大气混合污染物诱导肺损伤时的分子及蛋白水平变化,探索肺损伤时其对机体的影响和作用机制。 实验结果显示,染毒组大鼠,于染毒后7d,肺组织与对照组相比出现充血、水肿、炎细胞浸润等病理变化,并持续至染毒后30d,染毒后30d大鼠肺组织出现水肿、炎细胞浸润等病理变化外,伴有部分间质纤维组织增生,染毒组大鼠中,染毒后7d开始大鼠肺组织中HO-1的mRNA表达及蛋白水平与对照组相比明显升高,并持续至染毒30d,免疫组化结果显示,染毒7d组大鼠肺泡上皮细胞及巨噬细胞呈现HO-1阳性,染毒后30d,大鼠肺泡和支气管上皮细胞持续HO-1阳性表达,同时,染毒组大鼠于染毒30d后HO-1蛋白活性比对照组明显升高。 本研究提示在大气混合污染物所致大鼠肺损伤的过程中,伴随着HO-1基因及蛋白表达的增加,及HO-1蛋白活性的增强。本研究结果提示,HO-1参与大气混合污染物所致肺损伤这一病理过程,在污染物所致肺损伤7天以后,HO-1诱导性增高,结合HO-1分解血红素的生理作用和其代谢产物的影响,提示诱导HO-1增高可作为预防和保护大气混合污染物所致肺损伤的一种方法,另外,在大气混合污染物诱导肺损伤的过程中, HO-1基因及蛋白表达也可作为检测早期肺损伤的敏感性指标之一。
【关键词】：HO-1 大气混合污染物 大鼠 肺损伤
【学位授予单位】：吉林大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R563.9;X503.221
【目录】：

• 内容提要4-6
• 中文摘要6-9
• Abstract9-15
• 前言15-17
• 第1章 文献回顾17-21
• 1.1 血红素氧合酶 1(HO-1)的分子生物学特性17-18
• 1.2 血红素氧合酶 1(HO-1)的诱导和调节18
• 1.3 血红素氧合酶 1(HO-1)和信号转导18-19
• 1.4 血红素氧合酶 1(HO-1)的抗炎症作用19
• 1.5 血红素氧合酶 1(HO-1)和肺脏疾患19-21
• 第2章 材料和方法21-31
• 2.1 实验技术路线图21-22
• 2.2 主要仪器与设备22
• 2.3 主要试剂22-23
• 2.4 试剂配制23-24
• 2.5 实验动物24
• 2.6 试验方法24-30
• 2.6.1 大气混合污染物的制备24
• 2.6.2 动物分组及模型的制备24-25
• 2.6.3 标本采集25
• 2.6.4 指标检测25-30
• 2.7 统计学处理30-31
• 第3章 结果31-37
• 3.1 肺组织病理形态学改变和肺损伤程度评分31-32
• 3.1.1 肺组织病理变化光镜观察31-32
• 3.1.2 肺组织病理变化形态学评分:32
• 3.2 肺组织 HO-1mRNA 的表达32-33
• 3.3 肺组织 HO-1 蛋白的表达(Western blot)33-35
• 3.4 肺组织中 HO-1 蛋白的表达(免疫组化)35-36
• 3.5 肺组织 HO-1 的活性测定36-37
• 第4章 讨论37-40
• 第5章 结论40-41
• 参考文献41-45
• 致谢45

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前5条

1 洪传洁,阚海东,陈秉衡;城市大气污染健康危险度评价的方法 第五讲 大气污染对城市居民健康危害的定量评估(续五)[J];环境与健康杂志;2005年01期

2 刘少华;马可;许兵;徐鑫荣;;一氧化碳吸入对脂多糖诱导大鼠急性肺损伤的保护作用(英文)[J];生理学报;2006年05期

3 姜智海,宋伟民,周晓瑜,张一帆;PM_(2.5)对小鼠肺急性损伤的试验研究[J];卫生研究;2004年03期

4 季方兵,刘少华;内毒素性急性肺损伤大鼠肺HO-1的表达及其意义[J];实用临床医药杂志;2005年09期

5 黄新莉;韦鹏;周晓红;凌亦凌;;HO-1在CCK-8减轻脂多糖所致的急性肺损伤中的作用[J];中国病理生理杂志;2007年12期

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本文编号：260576