矽肺发生发展过程中CC16和SP-D变化规律研究

发布时间：2017-03-22 22:02

  本文关键词：矽肺发生发展过程中CC16和SP-D变化规律研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：【研究目的】 探讨CC16和SP-D在矽肺发生发展过程中变化及作用，为矽肺早期诊断和早期治疗疗效评估提供依据。 【研究方法】 1.动物实验：选择SPF级雄性Wistar大鼠84只，体重160-180克。随机将大鼠分为对照组和染矽尘组，每组42只。染矽尘组采用非气管暴露法1ml浓度为100mg/ml矽尘悬液一次性的气管内注入，对照组注入灭菌0.9%NaCl。染尘后分别在第3d、7d、14d、21d、28d、60d这6个时间点各取7只大鼠处死，进行在体支气管肺泡灌洗，取肺组织和支气管肺泡灌洗液（BALF,bronchoalveolarlavage fluid）。肺组织经多聚甲醛固定后石蜡包埋，切片，并做HE染色及免疫组织化学实验。观察肺组织病理变化及免疫组化阳性表达结果。采用酶联免疫吸附法（ELISA）测定大鼠BALF中CC16，SP-D浓度变化并做统计分析。 2.人群研究：选取某金矿工人240名，其中Ⅰ期矽肺患者80人，Ⅱ期矽肺患者40人，接尘组80人，对照组40人。ELISA法检测血清中CC16及SP-D含量并进行分析比较。 【研究结果】 1染尘大鼠肺组织病理学观察 对照组大鼠肺组织结构完整，未见明显病变；染矽尘组大鼠染尘3d肺组织出现充血，炎性细胞（中性粒细胞，巨噬细胞）浸润；7d充血明显，肺泡间隔增宽且水肿，炎性细胞浸润；14d肺泡间隔进一步增宽，大量巨噬细胞增生、聚集；21d肺泡腔萎缩，部分消失，肺泡间隔断裂，炎性细胞主要为淋巴细胞和浆细胞；28d肺泡结构大部分遭到破坏，成纤维细胞增生，胶原纤维增多，部分肺组织呈肺不张样改变；60d肺泡结构遭到严重破坏，肺广泛纤维化。 2染尘大鼠肺组织免疫组化染色 对照组大鼠Clara细胞形态正常完整，排列整齐，Clara细胞的胞浆中大量表达CC16蛋白。染矽尘3d组，与对照组相比无明显改变，Clara细胞胞浆内仍然高表达CC16蛋白；7d组细支气管Clara细胞受损，有少许细胞脱落；14d组细支气管受损，Clara细胞大量脱落，CC16蛋白表达减少；21d时，CC16蛋白表达明显减少，且Clara细胞受损加重，脱落明显，呈现破损状；28d组Clara细胞被成纤维细胞及胶原纤维细胞所取代；第60d时，CC16阳性表达极少，肺组织广泛纤维化。 正常肺组织中的SP-D表达于肺泡Ⅱ型细胞和Clara细胞中，主要表达于肺泡Ⅱ型细胞。染矽尘组3d后，肺组织SP-D阳性细胞增多不明显；7d组，肺泡Ⅱ型细胞SP-D阳性表达增多，肺泡结构未有明显改变；14d时，肺泡结构遭到破坏，SP-D强阳性表达；21d时，SP-D表达减少，肺泡结构遭到破坏；第28d时，肺泡结构遭到大量破坏，SP-D阳性表达大量减少，细胞界限模糊；60d时，，肺泡Ⅱ型细胞受破坏严重，肺组织广泛纤维化，SP-D阳性表达模糊不清。 3大鼠BALF中CC16，SP-D含量变化 染矽尘大鼠BALF中CC16含量在各时间点与对照组相比较，均有不同程度的降低，差异有统计学意义（P0.05），并且随时间的延长，含量逐渐减少。 染矽尘大鼠BALF中SP-D含量在3d、7d、14d、21d时间点较对照组均有不同程度的升高，28d、60d较对照组降低，差异有统计学意义（P0.05），呈先增加后降低趋势，在第14d时增高达高峰，此后开始降低。 4人血清中CC16，SP-D含量变化 与对照组相比，接尘组，矽肺Ⅰ期组、矽肺Ⅱ期组CC16及SP-D含量都明显降低，差异有统计学意义（P0.05），但接尘组、矽肺Ⅰ期组、矽肺Ⅱ期组之间CC16及SP-D含量差异无统计学意义（P0.05）。 【研究结论】 1CC16和SP-D在矽尘引起的炎症反应过程中发挥重要调节作用，两者量的表达与肺组织病理改变密切相关。 2矽尘诱导大鼠BALF和接尘工人血清中CC16含量的不断降低，检测CC16可反映矽肺早期肺组织中Clara细胞的损伤情况。 3染矽尘大鼠肺组织及BALF中SP-D表达增加，且其量随时间延长而有规律变化；接尘人群血清中SP-D含量较对照组降低，提示检测SP-D含量可反映矽肺早期发生发展过程中矽尘对肺泡Ⅱ型细胞及肺泡结构的损伤程度。 4CC16和SP-D对矽肺的早期诊断及治疗疗效评估有一定的辅助意义。检测两者在血清中的含量可辅助判断矽肺病情的严重程度。
【关键词】：矽肺 二氧化硅 免疫组织化学 CC16 SP-D
【学位授予单位】：济南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R135.2
【目录】：

• 研究生导师及课题指导小组成员简介5-6
• 目录6-8
• 中文摘要8-11
• ABSTRACT11-15
• 主要符号表15-16
• 前言16-21
• 技术路线21-22
• 第一部分 染矽尘大鼠 CC16、SP-D 变化的实验研究22-39
• 材料与方法22-29
• 1 材料22-23
• 1.1 实验动物22
• 1.2 主要试剂与仪器设备22-23
• 2 方法23-29
• 2.1 实验试剂配制23-24
• 2.2 实验动物分组24-25
• 2.3 实验动物染矽尘模型建立25
• 2.4 支气管肺泡灌洗液的收集25-26
• 2.5 大鼠 BALF 中 CC16、SP-D 测定26
• 2.6 大鼠肺组织病理学观察及免疫组织化学测定26-28
• 2.7 统计学分析28-29
• 结果29-39
• 1 不同时间点大鼠肺组织标本肉眼观察29-30
• 2 大鼠肺组织切片 HE 染色30-32
• 3 大鼠肺组织免疫组织化学染色结果32-35
• 4 大鼠 BALF 中 CC16 含量变化35-37
• 5 大鼠 BALF 中 SP-D 含量变化37-39
• 第二部分 矽肺不同发展阶段 CC16、SP-D 变化的现场研究39-44
• 对象与方法39-41
• 1 研究对象39
• 2 主要试剂与仪器设备39-40
• 3 方法40-41
• 3.1 问卷调查40
• 3.2 血样收集40
• 3.3 血清 CC16、SP-D 测定40
• 3.4 统计学分析40-41
• 结果41-44
• 1 人群一般资料41
• 2 各观察组血清中 CC16、SP-D 含量比较41-44
• 讨论44-48
• 结论48-49
• 参考文献49-55
• 附表55-56
• 综述56-64
• 参考文献61-64
• 攻读硕士期间已（待）发表论文64-65
• 致谢65

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前10条

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本文编号：262276