FLG基因突变与支气管哮喘的相关性研究

发布时间：2020-04-27 08:55

【摘要】：研究背景：哮喘是一种复杂的多基因疾病,由易感基因和环境因素共同作用决定。自1996年通过全基因扫描发现第一个哮喘连锁位点以来,目前已发现了数百个与哮喘相关的基因。FLG基因是近几年新发现的一个与哮喘相关的基因,其突变位点与哮喘的关联在不同种族人群中存在较大的差异。而FLG突变3321delA、K4022X与汉族人群支气管哮喘的发生,及其与哮喘患者肺功能、血清嗜酸性粒细胞的关系尚未有相关研究。研究目的：研究FLG基因突变与支气管哮喘的发生是否具有相关性。方法：采用病例-对照研究,收集散发支气管哮喘患者90例,健康对照者100例,根据询问既往有无特应性皮炎(atopic disease, AD)病史,将哮喘组分为无AD病史组及有AD病史组；并对哮喘患者进行肺功能检测,及血清嗜酸性粒细胞(eosinophils, EOS)检测。所有研究对象均抽取外周静脉全血,提取全血细胞基因组DNA作研究对象,用PCR扩增FLG基因的两个突变位点(3321delA、K4022X)后进行直接测序。应用SPSS(13.0)软件包对检测结果进行统计学分析：应用t检验检测组间年龄是否均衡；应用χ2检验检测组间性别是否平衡；各组3321delA、K4022X等位基因频率及基因型频率的比较采用Pearson's检验或Fisher's检验(当n≥40但有1≤T5时,或当n40,或T1时)；对所选取的样本采用χ2检验检测Hardy-Weinberg遗传平衡度；应用SHEsis软件对3321delA、K4022X位点进行连锁不平衡分析；并对两个位点进行LD检验,构建单体型进行检验以分析单体型在不同组间的差异。定义P0.05时具有统计学意义。结果： 1.3321delA和K4022X不同基因型及等位基因在哮喘组与健康对照组中,其频率分布两组比较无统计学差异。 2.3321delA和K4022X不同基因型及等位基因在合并AD哮喘组与健康对照组、合并AD哮喘组与无AD哮喘组中,其频率分布两组比较均无统计学差异。 3.3321delA和K4022X不同基因型及等位基因在哮喘嗜酸性细胞增高组与健康对照组、哮喘嗜酸性细胞增高组与哮喘嗜酸性细胞正常组中,其频率分布两组比较均无统计学差异。 4.3321delA和K4022X不同基因型及等位基因在哮喘肺功能异常组与健康对照组、哮喘肺功能异常组与哮喘肺功能正常组中,其频率分布两组比较均无统计学差异。 5.健康对照组基因型频率符合Hardy-Weinberg平衡,具有良好的群体代表性。 6.3321delA、K4022X存在弱连锁不平衡。 7.对3321delA和K4022X进行单倍型分析,2条单倍体不传递。结论： 1.FLG基因突变3321delA、K4022X与支气管哮喘的发生可能无相关性； 2.FLG基因突变3321delA、K4022X与合并AD病史哮喘的发生可能无相关性。 3.FLG基因突变3321delA、K4022X与哮喘患者肺功能受损、嗜酸性粒细胞升高可能无相关性。
【图文】：

表皮,外显子,截短,屏障

(filagsrin)的无活性前体—丝聚合蛋白原(profilaggrin)，主要在表皮、子宫内膜、口腔及鼻粘膜等膜组织中表达【’2一，“]。FLG包含三个外显子[’“]，其中外显子1和外显子2均不编码蛋白质，外显子3编码大部分蛋白质(见图1一1)。FLG由N一端S一100钙离子结合区、B结构域、N一端截短FLG重复区，10一12个串联排列的FLG重复区，以及C一端截短FLG重复区、C一末端结构域依次组成，其中FLG重复区是最重要的功能域。Profilaggrin合成后被磷酸化成不可溶前体、存储在透明角质颗粒中。表皮终末分化的最后阶段(角质细胞从颗粒层迁移到角质层的过程)，profilaggrin经去磷酸化和多级水解形成约35KDa的filaggrin活性单体:单体特异性的聚合在表皮中表达角蛋白中间丝KRTI/KRTIO，，使其平行紧密排列成大纤维，构成角质层细胞被膜 (CornifiedCellEnvelope，CCE)的蛋白骨架、参与CCE的形成。filaggin形成的角质包膜为一个不能溶解的屏障，在阻止表皮水分流失的同时，保护机体不受环境的影响;且表皮屏障的完整性对于阻止外界过敏原的侵入具有十分重要

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8]。到目前为止，己经发现了40多种FLG突变，其突变位点具有人群、种族特异性I’9](见图1一2)。而国内研究FLG基因突变与汉族人群支气管哮喘的相关性报道不多，且我国地域辽阔，地区人群差异大，汉族人群支气管哮喘患者FLG基因突变尚未有报道，故有必要进行相关研究。3702d仑IG臼422X灌IOZgdelCAT翻W探飞狂岌，李苏XQ24谁了XKorea引3321de!A曝51。。·出·i一bi·di、“m·i二日dom·‘·滕，m，‘t厂 LGrep·at·到二G陀peats.。沁确 inaldomaln图1一 2:FLG已报导的突变分布图【20]本研究采用病例一对照的研究方法，以中国湖南地区汉族人群散发支气管哮喘患者和正常个体为研究对象，在FLG基因内部选择亚洲人群较多见的突变位点3321delA及K4022X进行研究
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R562.25

【参考文献】