红霉素抑制TNF-α对人支气管上皮细胞核因子-κB的激活

发布时间：2020-05-15 21:41

【摘要】：目的：从分子水平上探讨红霉素(EM)的抗炎作用机制，为临床防治慢性阻塞性肺疾病(COPD)提供新的思路。 方法：体外培养人支气管上皮细胞(16HBE)，将细胞随机分为8组，先加入红霉素干预，后加入肿瘤坏死因子(TNF-α)刺激。分组如下：1．空白对照组；2．TNF-α(20ng／ml,16h)；3．EM(0.3ug／ml，24h)+TNF-α(20ng／ml，16h)；4．EM(3ug／ml，24h)+TNF-α(20ng／ml，16h)；5．EM(30ug／ml，24h)+TNF-α(20ng／ml，16h)；6．EM(0.3ug／ml，48h)+TNF-α(20ng／ml，16h)；7．EM(3ug／ml，48h)+TNF-α(20ng／ml，16h)；8．EM(30ug／ml，48h)+TNF-α(20ng／ml，16h)。然后收集各组细胞分别提取RNA及核蛋白，应用逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)方法检测白介素-8(IL-8)mRNA、细胞间粘附分子-1(ICAM-1)mRNA的表达，并应用电泳迁移率改变分析法(EMSA)检测转录因子核因子-κB(NF-κB)的活性。 结果：EMSA结果显示，用前炎因子TNF-α刺激人支气管上皮细胞(16HBE)后，细胞内NF-κB表达增高；RT-PCR结果显示细胞IL-8mRNA、ICAM-1mRNA表达增高。先加入不同浓度及作用时间的红霉素，后加入前炎因子TNF-α刺激人支气管上皮细胞(16HBE)，EMSA结果显示各组细胞NF-κB表达均降低，且提示有随着红霉素浓度增加，作用时间延长，，NF-κB表达受抑制愈明显的趋势，但随着红霉素浓度增加及作用时间延长到一定的范围，NF-κB表达受抑制差别不明显。RT-PCR结果显示各组细胞IL-8mRNA表达均降低，但其降低的水平与红霉素作用浓度及时间无明显关系；各组细胞ICAM-1mRNA表达均降低，且提示有随着红霉素浓度增加，作用时间延长，ICAM-1mRNA表达受抑制越明显的趋势。 结论：1．前炎因子TNF-α能激活人支气管上皮细胞NF-κB，而NF-κB可能参与了IL-8基因、ICAM-1基因的表达调控，使其表达增高，促 进炎症的发生发展，在炎症进程中发挥着重要作用。 2.红霉素能抑制人支气管上皮细胞NF-KB的激活水平，且可能通过 抑制NF一B的激活水平，下调与炎症密切相关的细胞因子几一8、 ICAM一1的基因表达，从而抑制炎症进程，这可能是红霉素的抗炎作 用机制之一。
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2004
【分类号】：R563.9

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本文编号：2665671