沐舒坦对急性肺损伤防治作用的实验研究

发布时间：2020-05-17 00:21

【摘要】：目的: 通过建立急性肺损伤大鼠模型和体外肺泡巨噬细胞培养体系，观察急性肺损伤中，肺泡巨噬细胞在沐舒坦干预前后细胞因子表达的情况，探讨沐舒坦可能的肺损伤保护机制。 方法： 1、体内实验：大鼠24只，，随机分成3组，每组8只：（1）正常对照组；（2）急性肺损伤组：采用腹腔注射酵母悬液方法复制大鼠急性肺损伤模型；（3）沐舒坦治疗组：建立ALI大鼠模型后用沐舒坦干预。观察指标主要有： 肺部病理学改变、测量大鼠肺系数、血氧分压，肺泡巨噬细胞TNF-α、IL-10、IL-24 mRNA的表达则采用通过逆转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）技术检测。 2、体外实验：收集肺泡巨噬细胞后分3组：（1）正常对照组：肺泡巨噬细胞中加无菌生理盐水；（2）LPS组：予LPS10mg/L刺激肺泡巨噬细胞；（3）LPS+沐舒坦组：予LPS10mg/L和沐舒坦180μmol/L刺激肺泡巨噬细胞。分别于刺激前（0小时），刺激后（6、12、24小时）留取细胞，-80℃冻存备用；每个时点和实验组取6个复孔。通过RT-PCR技术检测肺泡巨噬细胞TNF-α、IL-10、IL-24 mRNA的表达变化。 结果： 1、体内实验：（1）急性肺损伤组大鼠两肺呈现充血、水肿、体积增大，可见广泛点状、片状出血灶，切面疏松、肿胀；沐舒坦治疗组大鼠病变与急性肺损伤组类似，但肺部出血灶明显减少。光镜观察，急性肺损伤组大鼠肺泡间隔明显增宽，肺泡壁完整性破坏，肺间质见红细胞及单核巨噬细胞、中性粒细胞浸润。沐舒坦治疗组病变轻于急性肺损伤组，出血、细胞浸润有所减轻。（2）急性肺损伤组大鼠肺系数明显升高，动脉血氧分压明显降低，与正常对照组比较差异有统计学意义（P0.05）；给予沐舒坦干预治疗后，肺系数均明显下降，与急性肺损伤比较差异有统计学意义（P0.05），动脉血氧分压有所升高，但仍低于正常对照组水平。（3）正常对照组大鼠肺泡巨噬细胞未检测到TNF-α、IL-10、IL-24 mRNA表达；与正常对照组比较，急性肺损伤组TNF-α、IL-10、IL-24 mRNA表达水平有显著升高；给予沐舒坦干预治 WP=5 疗后，TNF-α、IL-10、IL-24 mRNA表达水平均明显下降，与急性肺损伤组比较差异有统计学意义（P0.05），但仍高于正常对照组。 2、体外实验：正常对照组未检测到TNF-α、IL-10、IL-24 mRNA表达；LPS组和LPS+沐舒坦组在刺激前未检测到TNF-α、IL-10、IL-24 mRNA表达；LPS组6h时TNF-α、IL-10、IL-24 mRNA表达增高，随后维持在较高水平；LPS+沐舒坦组6h时起出现TNF-α、IL-10、IL-24 mRNA表达，但各时点TNF-α、IL-10、IL-24 mRNA表达水平明显低于LPS组，两者比较差异有统计学意义（P0.05）。 结论： 1、腹腔注射酵母悬液可复制急性肺损伤大鼠模型； 2、肺泡巨噬细胞可在急性肺损伤发病过程中激活，并观察到TNF-α、IL-10、IL-24mRNA表达水平增高； 3、，沐舒坦可抑制急性肺损伤或LPS刺激的肺泡巨噬细胞TNF-α、IL-10、IL-24细胞因子mRNA的表达水平。
【学位授予单位】：广西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2004
【分类号】：R563

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本文编号：2667591