NF-κB抑制剂对慢性阻塞性肺病气道、肺血管重构的防治研究

发布时间：2020-05-18 19:52

【摘要】：目的①动态检测慢性阻塞性肺病(chronic obstructive pulmonary disease,COPD)各发展阶段肺组织气道、肺动脉重构的进展。②了解核因子-κB(the nuclear factor-κB,NF-κB)在COPD各阶段动态变化情况,以及NF-κB与气道、肺血管重构的关系。③观察NF-κB抑制剂吡咯烷二硫代氨基甲酸盐(pyrrolidine dithiocarbamate,PDTC)对COPD各发展阶段肺组织气道、肺动脉重构的影响,分析药物的防治效果。方法将48只雄性SD大鼠随机分为八个组,分别纳入实验组及药物干预组,每组6只。实验组为:A、B、C、D。正常对照组(A):正常饲养4周;慢支组(B):于实验第1、14天经气道内注入脂多糖(lipopolysaccharide , LPS),200μg/次,4周后检测;COPD组(C):第1、14天经气道内注入LPS,200μg/次,熏香烟1h/天,共4周;COPD并肺动脉高压组(D):第1、14天经气道内注入LPS,200μg/次,熏香烟1h/天,共6周,实验的最后两周在熏香烟的同时,给予18%低氧8 h/天。PDTC药物干预组为:A1(空白对照组)、B1(慢支干预组)、C1(COPD干预组)、D1(COPD并肺动脉高压干预组)。动物模型制作同各对应组,从第3周起给各药物干预组腹腔注射PDTC,剂量100mg·kg-1·d-1。A1组从第三周起腹腔注射同PDTC剂量相同的生理盐水。各组测定气道阻力、肺血流动力学和右心室肥厚指数,分别对肺组织行HE染色和三联染色,观测气道炎症,气道重构以及肺小动脉的病理形态学改变。用免疫组化法检测各组肺组织中NF-κB蛋白的表达,用RT-PCR、Western Blot分别检测各组肺组织匀浆中NF-κB mRNA和NF-κB蛋白的表达情况。结果①与A组相比,C、D组气道阻力明显增大(P 0.05)。②C、D组右心室收缩压(right ventricular systolic pressure,RVSP)平均肺动脉压力(mean pulmonary arterial pressure,mPAP)和右心室游离壁/左心室+室间隔(the ratio of the weight of right ventricle/left ventricle and septum,RV/LV+S)都明显高于A组(P 0.05)。D组RVSP高于C组(P 0.05)。C组与D组间RV/LV+S差异无意义(P 0.05)。C1与C组、D1与D组比较RVSP、mPAP值降低(P 0.05)。D1组的RV/LV+S值较D组降低(P 0.05)。③与A组比较,C、D组气道重构指标细支气管管壁厚度与气管外径比值(MT%)、管壁面积和气管总面积比值(MA%)均明显增高(P 0.05)。C、D组间MT%、MA%无差异(P 0.05)。C1组与C组,D1组与D组比较,细支气管MT%、MA%均下降(P 0.05)。④肺血管重构分析提示,与A组相比,C、D组肌化型动脉百分比增多(P 0.05),但C组尚未出现肺血管壁的增厚(P 0.05);D组肺小动脉管壁厚度与血管外径比值(WT%)、管壁面积与血管总面积比值(WA%)比值增大(P 0.05),说明出现明显的肺血管重构。与各实验组相比,C1、D1组肌化型动脉百分比降低(P 0.05),非肌化型动脉百分比增高(P 0.05)。D1组较D组WT%、WA%比值有所减小(P 0.05)。⑤免疫组化结果显示,C、D组NF-κB蛋白表达强于A组(P 0.05),C1、D1组较实验组C、D组NF-κB蛋白含量下降(P 0.05)。⑥RT-PCR结果说明,与A组相比,C、D组NF-κB mRNA表达增强(P 0.05),C组与D组间NF-κB mRNA表达也有差异(P 0.05)。C1组较C组、D1组较D组NF-κB mRNA表达减弱(P 0.05)。⑦Western Blot电泳结果显示,与A组相比,C、D组NF-κB蛋白表达明显增强(P 0.05),D组较C组NF-κB蛋白表达增强(P 0.05)。C1组较C组、D1组较D组NF-κB蛋白表达明显较弱(P 0.05)。⑧NF-κB的表达与气道重构指标MT%、MA%,肺血管重构指标WT%、WA%均呈正相关(P 0.01)。结论①COPD早期已出现肺血流动力学变化,随疾病进展逐渐出现进行性加重的肺血管、气道重构。表现为肺腺泡内肌化型动脉百分比增高、肌化型动脉管壁增厚;气道阻力增加、肺内小气道平滑肌层增厚。②随COPD病程进展,可检测到肺组织内NF-κB的表达增强,NF-κB的表达水平与气道、肺血管重构有一定相关性。③药物干预组与实验组对比,PDTC可抑制NF-κB的表达,部分改善气道、肺动脉重构。
【图文】：

气道阻力,实验组

C、D 组气道阻力明显增大（P <0.05）。B 组、C 组大（P <0.05）。说明随着疾病的进展，气道阻力有逐，，图 1。表 1 实验组各组气道阻力比较___________________________________________________组别例数气道阻力(kpa)___________________________________________________A 6 0.3750±0.0522B 6 0.3883±0.0408㤘C 6 0.5167±0.0480 #㤘D 6 0.6083±0.0736 #____________________________________________________# 与 A 组相比 P <0.05，㤘与 D 组相比 P <0.05

实验组

_____________________________________________________________组别例数 RVSP（mmhg） mPAP（mmhg）_____________________________________________________________A 6 27.03±2.30 22.07±1.85B 6 29.23±2.69 & 24.21±2.71 &C 6 35.32±3.80 # & 29.65±3.63 #D 6 42.34±5.62 # 34.61±5.80 #A1 6 26.45±2.15 22.54±2.10B1 6 29.05±4.81 23.89±3.53C1 6 29.53±4.20 * 24.41±1.91 *D1 6 29.96±5.45 * 25.51±2.61 *____________________________________________________________ 组比较 P <0.05，& 与 D 组比较 P <0.05，* 与各对应实验组比较 P
【学位授予单位】：桂林医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2010
【分类号】：R563.9

【参考文献】