维A酸、维生素A对大鼠实验性肺气肿的早期干预作用

发布时间：2020-05-22 12:58

【摘要】： 前言慢性阻塞性肺疾病(COPD)是一种具有气流受限特征的疾病，气流受限不完全可逆、呈进行性发展，与肺部对有害气体或有害颗粒的异常炎症反应有关，其特点是肺泡数量减少，不能为丰富的气体交换提供足够的表面面积。维生素A是一种人体必须的低分子有机化合物，对机体物质代谢和生长发育的调控作用受到人们的重视，其代谢活性物质维A酸(RA)对实验性肺气肿的逆转作用已经被Massaro等人所报告。为明确维生素A及RA对实验性肺气肿的早期干预作用，我们通过弹性蛋白酶气管内滴的方法复制大鼠肺气肿模型，观察RA及维生素A早期干预对大鼠肺气肿形成的影响。材料与方法一、实验动物与分组 Wistar雄性大鼠28只，体重(274±23)g，随机分为四组：对照组，模型组，RA组，维生素A组。模型组，RA组，维生素A组用弹性蛋白酶气管内滴复制肺气肿模型：麻醉大鼠，暴露气管，用1ml注射器取弹性蛋白酶生理盐水溶液(5000u／ml)，针头刺入气管滴入药液，2.0u／kg，注入空气保证药液进入，竖起鼠板摇动使药液分布均匀，缝合皮肤，，消毒。对照组手术方法相同，气管内滴入等量生理盐水。第二天开始RA组给RA蓖麻油溶液(500βg／kg体重)日一次腹腔注射，维生素A组给维生素A(50000u／kg体重)日一次灌胃，共25天。二、病理标本制备及免疫组织化学染色麻醉大鼠，打开胸腔，将一顶端膨大的大号针头插人气管结扎固定，接自制灌注装置，保持＊96kPa水柱压力，10％中性福尔马林灌注肺脏30 min，结扎气管，浸人10％中性福尔马林固定24／J’ 时以上。每只大鼠左肺最大横径处肺组织常规石蜡包埋切片，HE 染色，部分石蜡切片行增殖细胞核抗原（PCNA）免疫组织化学染色，阳性反应为胞核棕褐色颗粒状。三、形态学定量分析应用 MetaMonilfDP10／BX51系统的 Meta MOrth Imager System V4石软件进行分析，每只大鼠观测两张切片，每张随机选择八个视野，避开支气管及大、中血管。观察平均肺泡面积（MAAX计数每个视野肺泡数（NaX测出每个视野面积TA，HE染色阳性区面积PA，以 MAA＝（TA－PA）／Na计算每个视野平均肺泡面积；平均内村间隔（MLI人以每个视野正中为中心划“十”字线，计数经此线的肺泡间隔数（NS人测出十字线总长度（L＊以 MLI＝L／NS 得到平均内衬间隔。四JCNA指数：指计数 1000个细胞中 PCNA染色阳性的细胞的数量。计数每幅图像中的正常蓝染的细胞核的数量＊，手工计数PCNA染色阳性的细胞核的数量NZ，每幅图像的PCNA指数一 NZ八NI＋NZ厂求均值得出每张切片的 PCNA指数。五、统计学处理：采用 Microsoft Excel 2000对数据进行双样本异方差假设t检验。结果一、病理改变大体观察：模型组肺体积明显增大，颜色苍白，表面见多个大 ·二· 小不等的过度充气肺泡，肺弹性减弱，剖胸后不萎缩。RA组大鼠肺改变不明显，维生素A组有类似改变但不如模型组显著。光镜观察：模型组肺泡大小不等，结构紊乱，肺泡管、肺泡囊和肺泡明显扩张，壁变薄，有不同程度的断裂，部分融合成肺大泡。 RA组肺泡大小不均情况轻微，有较多小肺泡出现，肺泡壁断裂和气腔扩张情况很轻。维生素A组界于模型组和RA组之间。二、形态学定量分析模型组平均肺泡面积p745 L 679）pmz，与对照组O t 344…mz比增长 90％以上，平均内衬间隔为阳5．03．23）pm，较对照组（42．02 t 5．98）卜m变大；RA组平均肺泡面积为江626 t 230）pmz，较对照组增长33％左右，平均内村间隔为K6．35。3， 38）卜m；维生素 A组平均肺泡面积为妇428士 322）pm＼平均内衬间隔为K8．98。3．80）pm，与模型组比较无显著性差异。三、PCNA指数分析对照组PCNA指数为20。4，模型组PCNA指数上升为57 t 6 汀＜o．01人RA组利＊A指数显著升高，与对照组及模型组比较差异显著神值分别＜O．00且和0对门，维生素A组K＊A指数与对照组比较有升高，但与模型组比较差异不显著河＞0．05人讨论 1997年，Massaro等报告 RA治疗能减轻弹性蛋白酶5！起的大鼠肺气肿。以后，PaLila等重复了Massaro的研究并通过计算机辅助图像分析系统对肺泡面积和密度进行了分析，证实RA治疗可以逆转实验性肺气肿 50％的损害。Tepper等报告 ATRA可以显著减少肺气肿模型的肺总量和残气量变化，而肺活量没有显著减少。关于实验性肺气肿的早期药物干预和预防目前缺乏足够研究。本研究中RA组平均肺泡面积与模型组相比差异显著证实 ·3· M早期干预确实能减轻实验性肺气肿的发生。维生素A与肺的
【学位授予单位】：中国医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2003
【分类号】：R563.3

【参考文献】