萝卜硫素和N-乙酰半胱氨酸对香烟烟雾提取物刺激后的肺泡上皮细胞的保护作用及其与IGFBP-3的关系

发布时间：2017-03-25 22:08

  本文关键词：萝卜硫素和N-乙酰半胱氨酸对香烟烟雾提取物刺激后的肺泡上皮细胞的保护作用及其与IGFBP-3的关系，，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的：观察萝卜硫素(Sulforaphane,SFN)和N-乙酰半胱氨酸(N-acetyl-cysteine,NAC)对香烟烟雾提取物(Cigarette smoke extract,CSE)所致的A549细胞损伤是否具有保护作用,是否引起胰岛素样生长因子结合蛋白-3(Insulin-like growth factor binding protein-3,IGFBP-3)的表达水平变化,从而进一步揭示上述损伤与保护的机制。 方法：将A549细胞分为四组,分别为未经任何处理的对照组(Control),20%CSE处理组(20%CSE),5μM SFN预处理+20%CSE处理组,1mM NAC+20%CSE处理组。使用MTT比色法,分别测算各组细胞的存活率。利用流式细胞术,荧光染色和AnnexinV-FITC/PI双标记染色,分别计算各组细胞的周期阻滞情况和凋亡情况。使用活性氧荧光探针(DCFH-DA),测定各组细胞内的活性氧簇(ROS)变化。最后,利用RT-qPCR技术和Western Bolt技术分析各组IGFBP-3表达水平的变化。 结果：20%CSE处理后,细胞的存活率明显下降,SFN和NAC能在一定程度上拮抗CSE对细胞的影响。根据流式细胞术的分析,20%CSE可以使细胞周期阻滞在G1期,并增加其凋亡率,SFN和NAC可以有效地缓解CSE对细胞周期和生长的影响,形态学表现也符合上述变化。除此之外,SFN和NAC可以抑制CSE暴露后细胞内ROS水平。同时,CSE作用后IGFBP-3在mRNA水平和蛋白水平都明显增高,而在SFN和NAC处理后,IGFBP-3表达水平相比CSE处理组有所下降。 结论：CSE造成肺泡上皮细胞的损伤呈量效依赖关系,表现为细胞周期阻滞和凋亡率增高,SFN和NAC可以有效地缓解这种损伤,具有一定的保护作用。同时IGFBP-3的表达水平在上述过程中有明显改变,提示IGFBP-3可能是参与CSE损伤下肺泡上皮细胞生长调控的重要分子。
【关键词】：香烟烟雾提取物 IGFBP-3 萝卜硫素 N-乙酰半胱氨酸 肺泡Ⅱ型上皮细胞
【学位授予单位】：兰州大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2013
【分类号】：R563;R96
【目录】：

• 中文摘要3-4
• Abstract4-8
• 主要英文缩写词中英文对照表8-9
• 第一章 萝卜硫素和N-乙酰半胱氨酸对香烟烟雾提取物刺激后肺泡上皮细胞的保护作用及其与IGFBP-3的关系9-35
• 1 引言9-10
• 2 材料和方法10-21
• 3 结果21-30
• 4 讨论30-32
• 5 结论32
• 参考文献32-35
• 第二章 香烟烟雾引起的氧化应激在肺泡Ⅱ型上皮细胞损伤中的作用(综述)35-43
• 摘要35
• Abstract35
• 1 引言35-36
• 2 香烟烟雾引起的氧化应激导致细胞损伤的始动因素36
• 3 香烟烟雾引起的氧化应激对AECⅡ的损伤作用以及相关机制36-39
• 4 结论和讨论39-40
• 参考文献40-43
• 第三章 一种用于医学研究的香烟烟雾提取物制备装置的设计43-50
• 摘要43
• Abstract43-44
• 1 引言44
• 2 总体设计原理44-45
• 3 硬件设计及原理45-46
• 4 系统软件设计46-49
• 5 在实验中的使用效果49
• 6 结束语49-50
• 参考文献50

【参考文献】

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本文编号：267841