【摘要】：实验一:高潮气量通气激活大鼠肺组织丝裂原活化蛋白激酶的时程变化 目的:研究高潮气量通气激活大鼠肺组织丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的时程变化。 方法: 清洁级SD大鼠18只分6组,分别为对照组和高潮气量机械通气15min、30min、45min、60min、120min组(n=3)。机械通气采用容量控制模式,潮气量25ml/kg,呼气末正压 3 cmH2O,吸呼比1:2,呼吸频率20次/分,吸入氧浓度100%。用Western免疫印迹法测定大鼠肺组织MAPK家族成员[细胞外信号调节激酶(ERK)、p38和c-jun N末端激酶(JNK)]磷酸化强度的变化。 结果:肺组织磷酸化ERK1/2表达在机械通气30min时最高(331.5±25.8),显著高于对照组和机械通气15min(分别为69.8±1.1和94.2±3.1,P均(0.05)。与机械通气30min比较,机械通气45min、60min及120min时,磷酸化ERK1/2表达逐渐降低,但120min时(149.4±31.4)仍显著高于对照组(P(0.05)。肺组织磷酸化p38表达在机械通气15min时为83±10,显著高于对照组(51±4,P(0.05),30min时表达量最高(107±6),45min、60min及120min时逐渐降低,60min及120min(62±6、65±8)已降至对照组水平。对照组及机械通气各组中肺组织磷酸化JNK均未表达。 结论:高潮气量机械通气激活肺组织ERK1/2和p38,并且呈现时间依赖性。 WP=5 实验二 高潮气量通气大鼠肺组织丝裂原活化蛋白激酶的激活 及脂多糖增敏作用 目的:研究高潮气量通气大鼠肺组织丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)的激活及脂多糖(LPS)的增敏作用。 方法:清洁级SD大鼠56只分成4组,(1) 高潮气量通气组(HV):潮气量(VT) 25ml/kg,呼气末正压(PEEP) 3cmH2O,呼吸频率(f) 20次/分,吸呼比(I:E) 1:2,吸入氧浓度(FiO2) 100%;(2) 正常潮气量通气组(LV):VT 8ml/kg,PEEP 3cmH2O,f 50次/分,I:E 1:2,FiO2 100%;(3) 高潮气量通气+LPS组(HVL):通气实施前20min静脉注射LPS 6mg/kg,通气条件同HV组;(4) 正常潮气量通气+LPS组(LVL):通气实施前20min静脉注射LPS 6mg/kg,通气条件同LV组。每组通气时间分别为15min (n=6)和30min (n=8)。Western免疫印迹法测定大鼠肺组织磷酸化MAPK家族成员[细胞外信号调节激酶(ERK)、p38和c-jun N末端激酶(JNK)]表达,逆转录聚合酶链反应法(RT-PCR)检测肺组织巨噬细胞炎症蛋白(MIP)-2和肿瘤坏死因子(TNF)-( mRNA表达。 结果: (1) 高潮气量机械通气促进ERK1/2和p38激活 机械通气30min HV组肺组织磷酸化ERK1/2表达(221±25)显著高于LV组(135±20,P(0.05),HV组肺组织磷酸化p38表达(268±109)较LV组(182±44)也显著增加(P(0.05),15min时HV和LV组磷酸化ERK1/2和p38表达均无显著差异(P均0.05)。HV和LV组机械通气15和30min肺组织磷酸化JNK均未表达。 (2) LPS对高潮气量机械通气引起的ERK1/2和p38激活具有增敏效应 机械通气15min时LVL组肺组织磷酸化ERK1/2为403±39,显著高于LV组(210±36,P(0.05),HVL组肺组织磷酸化ERK1/2表达(456±49)亦显著高于HV组(197±28,P(0.05)。机械通气30min时,LVL组肺组织磷酸化ERK1/2 (252±22)较LV组(135±20)显著增加(P(0.05),但HVL组肺组织磷酸化ERK1/2表达与HV组比较,差异无显著性(P0.05)。 机械通气15min时HVL组肺组织磷酸化p38表达(243±89)显著高于HV组(161±42,P(0.05),而30min时HVL组(132±44)较HV组(268±109)显著减少(P(0.05)。 WP=6 与LV组比较,LVL组肺组织磷酸化p38表达在机械通气15和30min均无明显差异(P均0.05)。 HVL和LVL组机械通气15和30min肺组织磷酸化JNK均未表达。 (3) 高潮气量机械通气增加肺组织炎症介质的表达 机械通气30min时,HV组肺组织MIP-2 mRNA表达(95±28)显著高于LV组(68±5,P(0.05)。机械通气15min时,HV组和LV组肺组织MIP-2 mRNA表达无显著差异(P0.05)。HV组和LV组机械通气30min时肺组织MIP-2 mRNA表达均明显高于15min(P均0.05)。与LV组比较,HV组肺组织TNF-( mRNA表达在机械通气15min和30min均无显著差异(P均0.05)。 (4) LPS对高潮气量机械通气引起的炎症介质表达有增敏作用 机械通气15min时,LVL组肺组织MIP-2 mRNA表达为99±3,显著高于LV组(47±8,P(0.05),HVL组肺组织MIP-2 mRNA表达(106±19)亦显著高于HV组(46±11,P(0.05)。机械通气30min时,LVL组肺组织MIP-2 mRNA表达(116±30)较LV组(68±5)显著增加(P(0.05),但HVL组肺组织MIP-2 mRNA表达与HV组比较,无显著差异(P0.05)。 机械通气15min时,LVL组肺组织TNF-(mRNA表达(92±6)显著高于LV组(73±7,P(0.05),HVL组肺组织TNF-(mRNA表达(95±11)也显著高于HV组(78±3,P(0.05)。机械通气30min时,LVL组肺组织TNF-(mRNA表达(104±13)与LV组(65±20)比较有显著增加(P(0.05),HVL组肺组织TNF-(mRNA表达(103±11)也显著高于HV组(70±13,P(0.05)。 结论:高潮气量通气和LPS均促进肺组织ERK1/2和p38激活,LPS对高潮气量通气引起的ERK1/2和p38激活具有增敏作用,同时炎症介质表达增加,加剧炎症反应。
【学位授予单位】：东南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2004
【分类号】：R563.8
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