阿奇霉素在结核性胸膜炎中的免疫纠偏作用研究

发布时间：2020-06-09 12:39

【摘要】： 目的:研究阿奇霉素对结核性胸腔积液中淋巴细胞表达细胞因子(IFN-γ、TGF-β、IL-4、IL-12)功能的影响,探讨阿奇霉素在结核病中可能的免疫纠偏作用。方法:以诊断明确的结核性胸膜炎患者为研究对象;无菌术收集胸腔积液,上清液冻存备用,以人淋巴细胞分离液及贴壁培养方法分离其中细胞;CD4单克隆抗体孵育提纯细胞后经免疫细胞化学染色验证所得细胞类型;并将分离细胞以0.1%台盼蓝染色活细胞计数,调细胞浓度为1×10~6/ml,设阴性对照组(不施加药物干预)、阳性对照组(给予不同浓度多抗甲素干预)、试验组(以不同浓度阿奇霉素干预),接种于12孔板(含10%胎牛血清、100mg/L植物血凝素的完整RPMI 1640培养基),其中,阴性对照组设5个复孔,阳性对照组和试验组分别按同一浓度组设5个复孔,置37℃、5%CO_2孵箱中培养;各培养孔内均不更换培养基,分别于12、24、48、72小时离心,取培养液及细胞沉渣备用;抽提总RNA,用逆转录-聚合酶链式反应法(reverse transcription -polymerase chainreaction,RT-PCR)观察不同干预下各阶段γ-干扰素(interferon-gamma,IFN-γ)、细胞转化生长因子(transforming growth factor-beta,TGF-β)、白细胞介素-4(interleukin-4,IL-4)、白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)mRNA表达水平;同步用酶联免疫吸附试验(enzyme linked immunosorbentassay,ELISA)检测不同阶段各组上清液及培养液内IFN-γ、TGF-β、IL-4、IL-12浓度。结果:以CD4单克隆抗体孵育结核性胸腔积液中分离细胞经免疫化学染色,明显呈棕色反应,提示CD_4+T淋巴细胞阳性率为74.73%。目的基因扩增电泳条带灰度扫描结果显示,试验组IFN-γ、IL-12 mRNA表达上调,TGF-β、IL-4mRNA表达下调,与阴性对照组相比有统计学差异(P＜0.05),与阳性对照组差异无统计学意义(P＞0.05)。ELISA检测结果与RT-PCR分析结果基本一致,呈同向变化,即试验组IFN-γ、IL-12浓度增加,TGF-β、IL-4浓度减少,与阴性对照组有统计学差异(P＜0.05),与阳性对照组差异无统计学意义(P＞0.05)。并且,前述结果呈现一定时间以及剂量依赖性,即随阿奇霉素浓度增加、作用时间延长,IFN-γ、IL-12表达上调,及TGF-β、IL-4表达下调逐渐显著;以80μg/ml组孵育细胞、作用48小时,效果最为明显。结论:阿奇霉素体外干预结核性胸腔积液中CD4+T淋巴细胞可上调IFN-γ、IL-12表达以及下调TGF-β、IL-4表达,其作用与多抗甲素相当(P＞0.05),并与时间及浓度有一定关系。
【学位授予单位】：泸州医学院
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2009
【分类号】：R521.7

【相似文献】

相关期刊论文 前10条

1 杨文林;单腔静脉导管治疗结核性胸腔积液30例报告[J];邯郸医学高等专科学校学报;2005年04期

2 吴松远,张锐,岳彩霞,石荷芹;应用斑点免疫金渗滤法检测胸腔积液抗结核分枝杆菌抗体[J];中原医刊;2003年14期

3 张新娜;陈瑞香;冷梅;;隔蒜灸辅助治疗结核性胸腔积液58例疗效观察[J];中国煤炭工业医学杂志;2009年07期

4 魏义法;;结核性胸膜炎抽液后肺水肿12例诊治经验[J];中国社区医师(医学专业半月刊);2009年18期

5 常桂林;中西医结合治结核性胸腔积液82例[J];江西中医药;1998年04期

6 尹洪云;杨妍;史祥;吴福蓉;;C-反应蛋白在结核性胸腔积液诊断中的价值[J];临床内科杂志;2007年07期

7 郭宏;;结核性胸膜炎19例临床分析[J];首都食品与医药;2016年04期

8 高雯聪;马明禄;;腺苷脱氨酶检测在胸腔积液中的诊断价值[J];基层医学论坛;2011年07期

9 路庆龙;袁亮;孙建明;娄连发;许小广;孔令春;;肺癌并发胸腔积液与结核性胸腔积液的X线对照分析[J];新乡医学院学报;1986年03期

10 马伟路;;结核性胸腔积液的20年经验[J];国外医学.呼吸系统分册;1992年02期

相关会议论文 前10条

1 谢灿茂;何桥;谭守勇;邓晓华;易小萍;蔡杏珊;许蕴怡;关平;刘燕;;糖皮质激素治疗结核性胸腔积液的实验研究[A];中华医学会2008年全国结核病学术会议论文汇编[C];2008年

2 雷元金;袁金娥;;360例大量结核性胸腔积液2种治疗方法效果分析[A];中国防痨协会临床委员会、中国防痨协会基础委员会学术研讨会论文集[C];2008年

3 张景洪;王新锋;;腺苷脱氨酶检测对结核性胸腔积液的诊断价值[A];结核与肺部疾病论文集[C];2006年

4 邓学辉;彭海燕;田天武;;52例中量以上结核性胸腔积液治疗效果观察[A];中华医学会结核病学分会2006年学术会议论文汇编[C];2006年

5 刘雅;;神经元特异性烯醇化酶、癌胚抗原、细胞角蛋白19片段、对癌性与结核性胸腔积液的鉴别诊断意义[A];中华医学会第11届全国内科学术会议论文汇编[C];2007年

6 杨晓丽;陈东进;王皎磊;孔冬青;郑林;李建军;李伟;;评分法对结核性胸腔积液诊断价值的研究初探[A];中国防痨协会80周年纪念暨2013年全国学术大会论文集[C];2013年

7 郑桂兰;华华;郑四海;;结核性胸腔积液抽液前后肺功能变化[A];2011年中国防痨协会全国学术会议论文集[C];2011年

8 王敬萍;刘东洋;马屿;;细胞因子和结核性胸腔积液(摘要)[A];中华医学会结核病学分会2002年学术会议论文汇编[C];2002年

9 谢灿茂;;结核性胸腔积液的诊治进展[A];耐药结核病与肺部感染性疾病诊疗进展专题研讨会资料汇编[C];2013年

10 颜晓霞;;中心静脉导管置入引流并山莨菪碱治疗结核性胸腔积液[A];中华医学会呼吸病学年会——2011（第十二次全国呼吸病学学术会议）论文汇编[C];2011年

相关重要报纸文章 前10条

1 首都医科大学附属北京朝阳医院呼吸与危重症医学科主任 施焕中;控制结核性胸腔积液不推荐使用埋管引流[N];健康报;2019年

2 北京朝阳医院呼吸与危重症医学科主任 施焕中 白莎琳 整理;结核性胸膜炎诊断有新指标[N];健康报;2015年

3 衣晓峰 齐丽;结核性胸膜炎微创引流[N];健康报;2004年

4 本报记者 李海清;治结核性胸膜炎有两怕[N];健康时报;2003年

5 吴虑;盐水选种要注意浓度[N];河南科技报;2019年

6 记者 张懿;全面展示城市的双创“浓度”[N];文汇报;2019年

7 记者 刘宇男;8市未完成PM10平均浓度目标[N];四川日报;2015年

8 记者 陈星 整理;购买化肥浓度要适宜[N];新疆科技报(汉);2007年

9 记者 任学光;8月石家庄空气指数退出全国“倒二十”[N];河北日报;2019年

10 记者 江瑜;南京PM2.5年均浓度超额完成“国考”[N];南京日报;2014年

相关博士学位论文 前5条

1 张明周;结核性胸腔积液无创诊断评分模型的建立和验证研究[D];第三军医大学;2017年

2 李晓;Tc17细胞在结核性胸腔积液中的免疫学特征及调节机制[D];华中科技大学;2012年

3 杨海波;Toll样受体及炎症因子与胸膜疾病的关系研究[D];广西医科大学;2009年

4 张霞;结核性胸腔积液与恶性胸腔积液的比较蛋白质组学研究[D];北京市结核病胸部肿瘤研究所;2014年

5 李政;城市和边远地区大气汞的浓度、形态及影响因素[D];中国科学技术大学;2012年

相关硕士学位论文 前10条

1 傅玉琼;阿奇霉素在结核性胸膜炎中的免疫纠偏作用研究[D];泸州医学院;2009年

2 曹晶;白介素-35在结核性胸腔积液中的表达水平及意义[D];广西医科大学;2016年

3 罗湘;IL-35在肺结核血清、肺泡灌洗液和结核性胸腔积液中的表达和意义[D];广西医科大学;2018年

4 褚尧;血浆D-二聚体在结核性胸腔积液及部分肺部疾病中的临床意义[D];兰州大学;2019年

5 侯跃嵩;T-SPOT.TB试验在结核性胸腔积液诊断中的临床价值[D];皖南医学院;2018年

6 韦旋;白介素12家族在结核性胸腔积液和恶性胸腔积液中的表达和意义[D];广西医科大学;2017年

7 桂金沭;T-SPOT.TB、内科胸腔镜活检、TB-qPCR定性检查在结核性胸腔积液诊断中的应用[D];昆明医科大学;2018年

8 陈慧敏;内科胸腔镜对不明原因胸腔积液诊断价值及结核性胸腔积液镜下表现特征分析[D];安徽医科大学;2018年

9 黄陆颖;胸腔积液可溶性髓系细胞触发受体-1的水平及意义[D];广西医科大学;2007年

10 刘云龙;碳酸酐酶Ⅻ在恶性和结核性胸腔积液鉴别诊断中的临床意义和可靠性[D];济南大学;2013年

，

本文编号：2704702