组胺对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖及ERKmRNA、CyclinD1mRNA表达的影响

发布时间：2020-07-23 08:36

【摘要】：目的:探讨不同浓度组胺(Hist)对哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖的影响,及Hist对大鼠气道平滑肌细胞ERK mRNA、CyclinD1 mRNA表达的影响。方法: 第一部分:卵蛋白雾化致敏4周,建立哮喘大鼠模型,HE染色、图像分析判断是否形成气道重构。原代培养正常大鼠和哮喘大鼠平滑肌细胞(airway smooth muscle cells,ASMCs),给予不同浓度的组胺(Hist)干预ASMCs生长,依处理方式不同分为5组:(1)正常对照组(2)哮喘模型组;(3) 0.1mmol/L Hist组;(4) 0.3mmol/L Hist组;(5) 0.5mmol/L Hist组。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测气道平滑肌细胞(ASMCs)增殖能力,流式细胞术(FCM)测定各组大鼠ASMCs细胞周期。第二部分:原代培养正常大鼠和哮喘大鼠气道平滑肌细胞,根据第一部分确定的Hist浓度0.5mmol/L和ERK特异性抑制剂PD98059干预ASMCs生长,根据处理方式不同分别分为4组:(1)正常对照组;(2)哮喘模型组;(3)0.5mmol/L Hist组;(4)PD98059+Hist组:加入PD98059 10μmol/L培养1小时后,加入浓度为0.5mmol/L的Hist。采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测气道平滑肌细胞(ASMCs)吸光度A值,RT-PCR方法检测ERK1/2和CyclinD1 mRNA表达水平。结果: 第一部分: (1)肺组织HE染色、图像分析后哮喘模型组发生气道重构,模型复制成功。 (2)哮喘模型组、0.1mmol/L Hist组、0.3mmol/L Hist组、0.5mmol/L Hist组与正常对照组比较,吸光度A值增高(P0.01),G0/G1期细胞比例下降(P0.01),S+G2期比例升高(P0.01);随着组胺浓度增加,吸光度A值增高,G0/G1期细胞比例下降,S+G2期比例升高,0.5mmol/L Hist为第二部分实验干预浓度。第二部分: (1)哮喘模型组、0.5mmol/L Hist组、PD98059+Hist组与正常对照组相比,吸光度A值增高(P0.01);PD98059+Hist组与0.5mmol/L Hist组相比,吸光度A值下降(P0.01);PD98059+ Hist组与哮喘模型组相比,吸光度A值升高(P0.05)。 (2)哮喘组、0.5mmol/L Hist组、PD98059+Hist组与正常对照组相比,ERK1/2 mRNA和CyclinD1 mRNA的表达升高(P0.05);PD98059+Hist组与0.5mmol/L Hist组相比,ERK1/2 mRNA和CyclinD1 mRNA的表达下降(P0.05);PD98059+Hist组与哮喘模型组相比,ERK1/2 mRNA和CyclinD1 mRNA的表达升高(P0.05)。ERK1/2 mRNA和CyclinD1 mRNA的表达趋势基本一致。结论: (1)组胺可以进一步促进哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖,在一定浓度范围内组胺对气道平滑肌增殖的影响可能具有浓度依赖性。 (2)组胺可能通过了ERK信号通路上调CyclinD1 mRNA的表达,促进了哮喘大鼠气道平滑肌细胞增殖。 (3)在ERK信号通路之外,组胺可能还通过其他信号通路促进气道平滑肌细胞增殖。
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2011
【分类号】：R562.25
【图文】：

HE染色

正常对照组大鼠肺组织HE染色(100×)

HE染色

哮喘模型组大鼠肺组织HE染色(100×)

气道平滑肌细胞,生长形态,HE染色,大鼠

大鼠气道平滑肌细胞生长形态(100×)

【参考文献】