高流量鼻导管氧疗联合氨溴索对ARDS大鼠肺炎症损伤的影响及机制的研究

发布时间：2020-08-02 19:55

【摘要】：目的探讨高流量鼻导管(High-flow nasal cannula,HFNC)氧疗联合氨溴索(Ambroxol,AMB)干预在ARDS大鼠模型中治疗效果。并以NF-κB信号传导通路及Nrf2-HO-1/NQO1抗氧化应激信号通路探讨机制。以期为ARDS临床治疗提供新的思路和方法,为优化ICU护理工作提供实践基础。方法用脂多糖(Lipopolysaccharides,LPS)“两次打击”法建立急性呼吸窘迫综合征(Acute respiratory distresssyndrome,ARDS)大鼠模型,60只SD大鼠随机选8只做正常对照组,其余52只建立ARDS模型,选取存活的大鼠32只随机分为ARDS对照组、HFNC氧疗组、AMB治疗组及联合(HFNC+AMB)治疗组,每组8只。HFNC氧疗组经鼻导管湿化温化高流量给氧。AMB治疗组尾静脉注射AMB,1次/d。联合(HFNC+AMB)治疗组给予鼻导管湿化温化高流量给氧同时尾静脉注射AMB,1次/d。正常对照组、ARDS对照组尾静脉注射PBS。连续给药5d,第5d取血及肺组织,对五组大鼠动脉血气分析、检测肺湿/干重比及肺组织病理改变,用比色法检测肺组织MPO活性,qPCR法检测肺组织IL-1、IL-6、TNF-α、NF-κB、Nrf2、HO-1和NQO1m RNA水平,组织免疫荧光染色法及Western blot法检测肺组织NF-κB表达情况。结果1、ARDS对照组动脉血氧分压(PaO_2)和氧饱和度(SaO_2)较比正常对照组显著下降(P0.01);HFNC氧疗组、AMB治疗组、联合(HFNC+AMB)治疗组PaO_2和SaO_2呈不同程度的升高,与ARDS对照组比较差异有统计学意义(P0.05),且联合(HFNC+AMB)治疗组升高的幅度高于HFNC氧疗组和AMB治疗组。2、ARDS对照组与正常对照组比较,肺组织W/D比值显著下降(P0.01);与ARDS对照组比较,HFNC氧疗组、AMB治疗组W/D比值降低(P0.05),联合(HFNC+AMB)治疗组呈显著下降趋势(P0.01)。3、肺组织HE染色显示,ARDS对照组肺组织出现广泛的组织实变和细支气管炎症,气道上皮坏死,炎性细胞浸润,弥漫性肺泡损伤伴水肿和出血。HFNC氧疗组:细支气管和肺泡周边有炎性细胞浸润,肺泡壁增厚并伴有炎性渗出。AMB治疗组:轻度细支气管炎症,少量肺泡损伤伴出血及炎性细胞浸润。联合(HFNC+AMB)治疗组:轻微细支气管和肺泡炎症。4、比色法检测结果所示,ARDS对照组大鼠肺组织MPO活性较比正常对照组明显升高(P0.01)。与ARDS对照组比较,HFNC氧疗组、AMB治疗组、联合(HFNC+AMB)治疗组MPO活性显著下降(P0.01),且联合(HFNC+AMB)治疗组下降的比例高于HFNC氧疗组和AMB治疗组。5、qPCR结果所示,ARDS对照组大鼠炎性细胞因子IL-1、IL-6、TNF-α、NF-κB、Nrf2、HO-1和NQO1 m RNA水平与正常对照组比较显著上升(P0.01)。与ARDS对照组比较,HFNC氧疗组、AMB治疗组、联合(HFNC+AMB)治疗组IL-1、IL-6、TNF-α、NF-κB m RNA表达明显降低(P0.01),而HFNC氧疗组、AMB治疗组和联合(HFNC+AMB)治疗组Nrf2、HO-1和NQO1 m RNA水平有不同程度的上升(P0.05),且联合(HFNC+AMB)治疗组各指标下降/上升的比例高于HFNC氧疗组和AMB治疗组。6、NF-κB免疫荧光强度分析和Western blot检测结果所示,ARDS组NF-κB表达量明显高于正常对照组(P0.01)。与ARDS对照组比较,HFNC氧疗组、AMB治疗组、联合(HFNC+AMB)治疗组NF-κB表达明显降低(P0.01),且联合(HFNC+AMB)治疗组降低的幅度高于HFNC氧疗组和AMB治疗组。结论HFNC与AMB联合治疗方案通过下调NF-κB信号途径抑制炎性细胞因子的表达,并上调Nrf2-HO-1/NQO1抗氧化应激信号,有效缓解LPS诱导的急性肺损伤,从而发挥对ARDS的治疗作用。
【学位授予单位】：锦州医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2019
【分类号】：R563.8
【图文】：

肺组织,比值,氧疗,对照组

分组 PaO2SaO2（%常对照组 86.43±7.65 97.34±4.3DS 对照组 60.23±18.36▲▲83.98±9.42▲NC 氧疗组 77.23±16.92△△92.12±12.0B 治疗组 71.75±19.70△87.34±10.合治疗组 82.75±17.25△△95.28±13.3照组；B：ARDS 对照组；C：HFNC 氧疗组；D：组；B 组与 A 组比较，▲代表 P＜0.05，▲▲代表 P＜05，△△代表 P＜0.01。D 比值与正常对照组比较，肺组织 W/D 比值显著下 ARDS 对照组比较，HFNC 氧疗组、AMB 治（HFNC+AMB）治疗组呈显著下降趋势（P<

病理变化,细支气管炎,氧疗,肺泡

注：A：正常对照组；B：ARDS 对照组；C：HFNC 氧疗组；D：AMB 治疗组；E：（HFNC+AMB）治疗组；B 组与 A 组比较，※代表 P＜0.05，※※代表 P＜0.01；C、D、E 组组比较，#代表 P＜0.05，##代表 P＜0.01。三、肺组织 HE 染色ARDS 对照组肺组织出现广泛的组织实变和细支气管炎症，气道上皮坏死，细胞浸润，弥漫性肺泡损伤伴水肿和出血。HFNC 氧疗组：细支气管和肺泡周边性细胞浸润，肺泡壁增厚并伴有炎性渗出。AMB 治疗组：轻度细支气管炎症，肺泡损伤伴出血及炎性细胞浸润。联合（HFNC+AMB）治疗组：轻微细支气管泡炎症。见图 2、3。

对照组,所指,氧疗,箭头

A B C D图 3 ARDS 对照组肺组织病理变化注： A：气管腔内炎性渗出物（黑色箭头所指）；B：炎性细胞浸润（白色箭头所指）；C：血管壁增厚及红细胞渗出（白色箭头所指）；D：气管周围纤维弥漫性增生（白色箭头所指）。四、肺组织 MPO 活性ARDS 对照组大鼠肺组织 MPO 活性较比正常对照组明显升高（P<0.01）。与ARDS 对照组比较，HFNC 氧疗组、AMB 治疗组、联合（HFNC+AMB）治疗组 MPO活性显著下降（P<0.01），且联合（HFNC+AMB）治疗组下降的比例高于 HFNC 氧疗组和 AMB 治疗组。见图 4。

【参考文献】