氧化苦参碱对哮喘大鼠肺组织IL-10、CTLA-4及IL-17表达的影响

发布时间：2020-08-19 17:22

【摘要】：目的:观察剂量不同的氧化苦参碱(Oxymatrine,Oxy)药物对哮喘大鼠的作用,探讨氧化苦参碱治疗哮喘的作用机制。方法:40只清洁级、雌性、健康的SD大鼠按随机数字表法分成5组,每组8只。A组(哮喘组):第1、8天用新鲜配制的卵蛋白(Ovalbumin,OVA)/Al(OH)3悬浊液行腹腔注射致敏,15d-21d5%的OVA雾化液雾化激发,每天60min。B组(低剂量组):致敏、激化方式同A组,15d-21d雾化前30分钟,Oxy 50 mg/kg腹腔注射。C组(中剂量组):致敏、激化方式同A组,15d-21d雾化前30分钟,Oxy 100 mg/kg腹腔注射。D组(高剂量组):致敏、激化方式同A组,15d-21d雾化前30分钟,Oxy 150 mg/kg腹腔注射。E组(对照组):第1d、8d腹腔注射1ml 0.9%生理盐水。15d-21d0.9%生理盐水进行雾化,每天60min,15d-21d雾化前30分钟0.9%生理盐水0.5ml/鼠/次腹腔注射。实验过程中,观察大鼠活动、饮食、呼吸等生活情况,末次激发24 h后处死全部大鼠,取大鼠肺脏,HE染色观察肺组织病理改变,采用免疫组化、RT-PCR、Western Blot测定各组肺组织中IL-10、IL-17、CTLA-4基因及蛋白水平的表达。结果:1、各组实验大鼠致敏激发后生活状态哮喘组大鼠逐渐出现易激惹、搔抓、呼吸频率增快、喜蜷伏、食欲减退,部分大鼠出现毛发脱落、行动迟缓、皮肤紫绀,重者可闻哮鸣音。予以Oxy干预的各组大鼠也出现哮喘组情况,但症状减轻,中、高剂量Oxy干预组症状减轻更为明显。对照组大鼠活动、进食、呼吸等情况未见异常。2、各组实验大鼠肺组织的改变肺组织HE染色结果显示,正常对照组大鼠肺组织气管直径正常,未见炎症细胞浸润;哮喘组大鼠肺组织气管直径减小,管壁增厚,周围大量炎症细胞浸润,气道上皮倒伏,管腔分泌物增多。经Oxy干预后,气道狭窄及炎症细胞侵入情况较哮喘组改善,且病变改善程度与氧化苦参碱用药剂量呈正比。3、各组实验大鼠肺组织IL-10、CTLA-4、IL-17的表达免疫组化检测肺组织IL-10、CTLA-4的表达:哮喘组IL-10与CTLA-4表达最低,对照组IL-10与CTLA-4表达最高,两者相比差异有统计学意义(P0.05)。Oxy干预组随药物剂量增加IL-10与CTLA-4的表达逐渐增加,其中高剂量组与对照组比较差异无显著性(P0.05)。免疫组化检测肺组织IL-17的表达:哮喘组IL-17表达最高,对照组IL-17表达最低,两者相比差异有统计学意义(P0.05)。Oxy干预组随药物剂量增加IL-17表达逐渐减弱,其中高剂量组与对照组比较差异无显著性(P0.05)。4、各组实验大鼠肺组织IL-10、CTLA-4、IL-17 m RNA的表达肺组织IL-10、CTLA-4 m RNA的表达:哮喘组IL-10与CTLA-4m RNA表达最低,对照组IL-10与CTLA-4 m RNA表达最高,两者相比差异有统计学意义(P0.05)。Oxy干预组随药物剂量增加表达逐渐增加,其中高剂量组与对照组比较差异无显著性(P0.05)。肺组织IL-17 m RNA的表达:哮喘组IL-17 m RNA表达最高,对照组IL-17 m RNA表达最低,两者相比差异有统计学意义(P0.05)。Oxy干预组随药物剂量增加表达逐渐减弱,其中高剂量组与对照组比较差异无显著性(P0.05)。5、各组实验大鼠肺组织IL-10、CTLA-4、IL-17蛋白水平的表达肺组织IL-10、CTLA-4蛋白的表达:哮喘组IL-10与CTLA-4蛋白表达最低,对照组IL-10与CTLA-4蛋白表达最高,两者相比差异有统计学意义(P0.05)。Oxy干预组随药物剂量增加表达逐渐增强,其中高剂量组与对照组比较差异无显著性(P0.05)。肺组织IL-17蛋白的表达:各组中哮喘组IL-17蛋白表达最高,对照组IL-17蛋白表达最低,两者相比差异有统计学意义(P0.05)。予以Oxy干预组随药物剂量增加表达逐渐减弱,其中高剂量组与对照组比较差异无显著性(P0.05)。结论:1.氧化苦参碱有改善哮喘大鼠症状、抑制其肺组织炎症反应的作用。2.氧化苦参碱对哮喘大鼠抑制作用的机制可能与促进肺组织IL-10、CTLA-4的表达及抑制肺组织IL-17的表达有关。
【学位授予单位】：南华大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R562.25

【参考文献】