哮喘CC16表达及糖皮质激素和白三烯受体拮抗剂影响的实验研究

发布时间：2020-10-28 08:43

　　 目的 观察哮喘小鼠气道Clara细胞主要分泌蛋白CC16表达以及布地奈德和孟鲁司特干预后对其的影响,探讨CC16在哮喘发病中的作用。 方法 取96只BALB/C小鼠,随机分为4组:哮喘模型组(A组),布地奈德干预组(B组),孟鲁司特干预组(C组),正常对照组(D组),每组24只。除对照组外,其余3组小鼠分别在第0、7d腹腔注射卵清蛋白(OVA)混悬液0.5 mL(含OVA 100μg,氢氧化铝凝胶400μg)致敏,第14d起以10g/L OVA溶液50mL超声雾化激发,每日30min,连续7d。孟鲁司特组在雾化吸入后1小时按6 mg/kg口服孟鲁司特4周;布地奈德组在雾化吸入后1小时吸入布地奈德混悬液30 min(布地奈德原液2ml+NS3ml),连续4周;正常对照组:小鼠第0和第7d腹腔注射生理盐水0.5 mL,第14d起以生理盐水50mL溶液超声雾化,每天30min,连续7d。每周各组各处死6只小鼠,连续4周。4组小鼠眼球摘除采血,取血清,采用ELISA(酶联免疫)法测分泌类蛋白(CC16)。左肺组织用10%甲醛固定后常规石蜡包埋切片,部分行苏木精-伊红(HE)染色观察炎症细胞的浸润;部分行免疫组化观察肺组织CC16表达;右肺组织RT-PCR检测CC16mRNA表达。 结果 1、各组小鼠外周血CC16蛋白表达 第1、2、3周A、B、C三组CC16蛋白OD值均显著低于D组(P＜0.05),第4周CC16蛋白OD值四组比较无统计学意义(P＞0.05):B组、C组与A组比较仅第1周有统计学意义(P＜0.05);A、B、C三组随时间延长CC16蛋白OD值均显著升高(P＜0.05),D组随时间延长CC16蛋白OD值无显著变化(P＞0.05)。 2、各组小鼠肺组织CC16蛋白免疫组化 第1、2、3、4周A、B、C三组CC16蛋白免疫组化灰度值均显著高于D组(P＜0.05);B组各周灰度值均显著低于A组(P＜0.05);C组与A组比较仅第4周有统计学意义(P＜0.05),而C组与B组比较仅第4周无统计学意义(P＞0.05);A、B、C三组随时间延长CC16蛋白免疫组化灰度值均显著降低(P＜0.05),D组随时间延长CC16蛋白免疫组化灰度值无显著变化(P＞0.05)。 3、各组小鼠肺组织CC16mRNA表达 第1、2、3、4周A、B、C三组CC16mRNA表达量均显著低于D组(P＜0.05);B组各周CC16mRNA表达量均显著高于A组(P＜0.05);C组CC16mRNA表达量仅第1、第4周显著高于A组(P＜0.05),而C组与B组比较仅第1周无统计学意义(P＞0.05);A、B、C三组随时间延长CC16mRNA表达量均显著增加(P＜0.05),D组随时间延长CC16mRNA表达量无显著变化(P＞0.05)。 4、小鼠外周血CC16蛋白与肺组织CC16mRNA表达总体相关性 外周血CC16蛋白与肺组织CC16mRNA表达总体呈正相关(r=0.777,p＜0.0001)。 结论 1、哮喘小鼠肺组织内CC16mRNA表达水平和外周血CC16蛋白浓度均降低,且随肺部炎症细胞增多而逐渐降低,因此CC16可作为反映哮喘气道炎症的指标。 2、吸入性糖皮质激素(布地奈德)干预可以显著增加哮喘小鼠CC16蛋白的表达,且随治疗时间延长CC16表达增加更加明显,抗哮喘气道炎症的作用更强。 3、自三烯受体拮抗剂(孟鲁司特)干预4周以上可以增加CC16蛋白表达水平;起效较布地奈德慢,到4周后效果与布地奈德相似。 4、外周血CC16和肺组织CC16 mRNA表达情况呈正相关,故其能反映肺组织CC16 mRNA表达,可间接反映哮喘炎症的严重程度。
【学位单位】：苏州大学
【学位级别】：硕士
【学位年份】：2009
【中图分类】：R562.25
【部分图文】：

图25C组第三周(免疫组化染色x400)图26c组第四周(免疫组化染色x400)三、各组小鼠肺组织CCI6mRNA表达情况第一周A组、B组、C组、D组小鼠肺组织CC16m丑NA表达量均数差异有学意义(F=103.3s2，P<o.0001)。A组、B组、e组ee一6mRNA表达量显著低于。差异有统计学意义(P<0.05);B组和C组均高于A组，差异有统计学意义(P<0但B组与C组差异无统计学意义(P>0.05)。第二周各组小鼠肺组织ccl6lnRNA表达量均数差异有统计学意义(介6P<0.oool)。A组、B组、c组ccl6mRNA表达量显著低于D组，差异有统计学(尸<0.05);B组高于A组与C组，差异有统计学意义(P<0.05);C组与A异无统计学意义(P>O.05)。第三周各组小鼠肺组织CC16mRNA表达量均数差异有统计学意义(介50P<0.0001)。A组、B组、c组cc16mRNA表达量显著低于D组，差异有统计学

图25C组第三周(免疫组化染色x400)图26c组第四周(免疫组化染色x400)三、各组小鼠肺组织CCI6mRNA表达情况第一周A组、B组、C组、D组小鼠肺组织CC16m丑NA表达量均数差异有学意义(F=103.3s2，P<o.0001)。A组、B组、e组ee一6mRNA表达量显著低于。差异有统计学意义(P<0.05);B组和C组均高于A组，差异有统计学意义(P<0但B组与C组差异无统计学意义(P>0.05)。第二周各组小鼠肺组织ccl6lnRNA表达量均数差异有统计学意义(介6P<0.oool)。A组、B组、c组ccl6mRNA表达量显著低于D组，差异有统计学(尸<0.05);B组高于A组与C组，差异有统计学意义(P<0.05);C组与A异无统计学意义(P>O.05)。第三周各组小鼠肺组织CC16mRNA表达量均数差异有统计学意义(介50P<0.0001)。A组、B组、c组cc16mRNA表达量显著低于D组，差异有统计学

哮喘CC16表达及糖皮质激索和白三烯受体拮抗剂影响的实验褚讲究结果高于第1周差异有统计学意义第4周表达量最高，(尸<0.05);第2周与第3周比较差异无统计学意义(尸>0.05)与第2、3周比较差异有统计学意义(尸<0.05)。C组小鼠四周肺组织CC16mRNA表达量均数差异有统计学意义(F=12.o一9尹<0.0001)。第2周表达与第1、第3周比较差异无统计学意义(P>o.05);第3周CC16mRNA表达量显著高于第1周，差异有统计学意义(P<0.05);第4周表达量最高，与第1、2、3周比较差异有统计学意义(尸<0.05)。D组小鼠四周肺组织ccl6mRNA表达量均数差异无统计学意义(F=o.176，p一0.911)。l见表IB、图IBI
【参考文献】

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本文编号：2859856