盐酸小檗碱对ARDS肺组织炎症反应和suPAR表达水平的影响

发布时间：2020-11-17 22:14

　　 第一部分盐酸小檗碱对ARDS小鼠肺炎症损伤的影响及机制目的:脂多糖LPS诱导急性呼吸窘迫综合征(ARDS)小鼠,观察盐酸小檗碱BBR对肺炎症反应、组织损伤的影响,并探讨作用机制。方法:LPS诱导构建ARDS模型、BBR处理干预。HE染色观察肺损伤程度,肺取材计算湿/干重比值;ELISA、实时荧光定量PCR检测多种炎症因子的表达水平;蛋白免疫印迹法(WB)检测P65和p-P65的蛋白水平。结果:脂多糖诱导后小鼠肺组织有不同程度的损伤,微血管内有大量的微血栓、充血和出血,肺泡腔、肺间质有大量的炎症细胞浸润,肺泡间隔也有不同程度的增厚;肺湿/干重比值明显升高;TNF-α和IL-6升高,而IL-10明显降低。此外,脂多糖可以激活NF-κB信号通路,p-P65的表达水平明显上升(P0.05)。而盐酸小檗碱干预可显著抑制脂多糖对小鼠肺组织的炎症反应激活和肺组织损伤、且明显抑制脂多糖诱导激活的NF-κB信号通路,p-P65的表达水平相比较脂多糖诱导的小鼠明显降低(P0.05)。结论:盐酸小檗碱的干预可能通过抑制肺组织中NF-κB信号通路的异常激活,从而能够减轻脂多糖诱导的小鼠肺组织的炎症反应和损伤。第二部分suPAR在ARDS小鼠血浆中的表达水平及临床意义目的:探讨ARDS小鼠中可溶性尿激酶型纤溶酶原激活物受体(suPAR)的表达情况,及其与肺组织损伤、炎症反应严重程度的相关性。方法:利用脂多糖气管吸入法建立ARDS小鼠模型,并给与盐酸小檗碱BBR干预。ELISA实验方法检测血浆中suPAR的表达情况,相关性分析评估suPAR与炎症程度(小鼠血浆中TNF-α、IL-10等的表达水平)、肺组织损伤严重程度(包括肺组织损伤评分及肺湿/干重比值)的关联情况。结果:血浆中suPAR的含量在ARDS小鼠明显升高,BBR处理后,ARDS小鼠血浆中的suPAR的表达水平明显被抑制(P0.05)。相关性分析发现,血浆中suPAR与肺损伤评分(r=0.875)、肺组织湿/干重比值(r=0.792)、TNF-α(r=0.856)、IL-6(r=0.882)的含量呈显著正相关;但suPAR的水平与IL-10的含量呈显著负相关(r=-0.902,P0.05)。结论:suPAR的血浆含量在急性呼吸窘迫综合征小鼠中明显升高,升高的suPAR水平可能能够反映ARDS小鼠的肺炎性浸润、肺损伤程度。第三部分suPAR在脓毒血症所致ARDS患者血浆中的表达及临床意义目的:研究suPAR在脓毒症相关ARDS患者血浆中的含量变化,进一步探讨suPAR与该类患者的病情严重度、死亡风险大小的相关性。方法:总共162例ARDS患者入组,分成脓毒症组(n=104)和非脓毒症组(n=58)两组。根据氧合指数(Pa02/Fi02),将脓毒症组患者又分为轻度(n=32)、中度(n=41)和重度(n=31)三组。根据患者结局,将脓毒症组患者分为存活(n=73)、非存活(n=31)两个组。同时,评估每个患者的APACHE Ⅱ评分和SOFA评分。ELISA测定纳入患者的suPAR浓度。结果:脓毒症ARDS患者血浆中suPAR和PCT明显高于非ARDS组,此外,APACHE Ⅱ和SOFA评分也显著高于非ARDS组(P0.05)。非存活组ARDS患者血浆中suPAR明显高于存活组(P0.05)。ROC曲线分析血浆suPAR在预测ARDS患者死亡风险方面具有十分重要的诊断价值和临床意义。结论:脓毒症组ARDS患者血浆中suPAR异常升高,并与患者的病情严重程度及死亡风险密切相关。
【学位单位】：武汉大学
【学位级别】：博士
【学位年份】：2018
【中图分类】：R563.8
【部分图文】：

、盐酸小檗碱可减轻ＡＲＤＳ小鼠的肺损伤??经ＨＥ染色可看出对照组小鼠的肺组织没有发现炎症滲出，肺泡壁的结构??形态完整，肺泡壁没发现炎症损伤，肺泡之间的间隔没发现增厚（见图１Ａ）。??而ＬＰＳ处理组小鼠的肺组织经ＨＥ染色后，可见小鼠的肺组织有断裂或破损，??微血管内也有微血栓、充血和出血，大量的炎性细胞浸润在肺泡腔、肺间质，??肺泡之间的间隔也有增厚，说明ＬＰＳ处理组的小鼠的肺严重损伤（见图１Ｂ）。??经ＬＰＳ＋ＢＢＲ处理组小鼠的肺ＨＥ染色可发现，肺组织损伤明显减轻，微血管内??只有少量的的充血和出血，仅有少量的炎性渗出在肺泡腔和肺间质，肺泡间隔??厚度也明显变薄（见图１Ｃ）。此外，我们进一步根据肺组织的炎性细胞浸润、??肺泡之间间隔的厚度、肺泡腔和肺间质的充血出血等情况进行了肺组织损伤评??分，每一项分值在０－４分，分值越低代表损伤程度最轻，分值越高代表损伤程??度最重。分析后发现

每一项分值在０－４分，分值越低代表损伤程度最轻，分值越高代表损伤程??度最重。分析后发现，小鼠的肺组织损伤评分：ＬＰＳ组大于ＬＰＳ＋ＢＢＲ组，同??时大于对照组（见图２）。病理取材测量后发现，小鼠的肺组织的湿／干重比值：??ＬＰＳ组大于ＬＰＳ＋ＢＢＲ组，同时大于对照组，ＢＢＲ干预能显著降低ＬＰＳ诱导的??小鼠肺脏组织水肿程度（Ｐ＜〇．〇５，见图３）。以上同时提示ＢＢＲ的预防性给予可??以有效地减轻ＬＰＳ带来的肺水肿、炎症浸润和肺损伤。??１７??

时大于对照组（见图２）。病理取材测量后发现，小鼠的肺组织的湿／干重比值：??ＬＰＳ组大于ＬＰＳ＋ＢＢＲ组，同时大于对照组，ＢＢＲ干预能显著降低ＬＰＳ诱导的??小鼠肺脏组织水肿程度（Ｐ＜〇．〇５，见图３）。以上同时提示ＢＢＲ的预防性给予可??以有效地减轻ＬＰＳ带来的肺水肿、炎症浸润和肺损伤。??１７??
【参考文献】

相关期刊论文 前1条

1 ;Roles of nitric oxide in protective effect of berberine in ethanol-induced gastric ulcer mice[J];Acta Pharmacologica Sinica;2005年11期

本文编号：2887981