TRB3表达通过MAPK/ERK依赖信号通路对TGF-β刺激后小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞EMT影响
发布时间：2020-12-07 09:52
目的:通过观察Tribbles同源蛋白3（TRB3）过表达及表达下调与丝裂素活化蛋白激酶/细胞外调节蛋白激酶（MAPK/ERK）信号通路在腺病毒转染小鼠Ⅱ型肺泡上皮细胞MLE-12上皮细胞-间充质转分化（EMT）的关系,探讨TRB3及MAPK/ERK在肺纤维化中的相互作用。方法:1.实验分组:空白对照组（C组）,绿色荧光蛋白（GFP）示踪基因Ad-GFP感染组（G组）,Ad-TRB3感染组（TRB3组）,Ad-TRB3-sh RNA感染组（TRB3-sh RNA组）,单纯TGF-β1刺激组（T组）,TGF-β1+Ad-GFP组（T+GFP组）,TGF-β1+Ad-TRB3感染组（T+TRB3组）,TGF-β1+Ad-TRB3-sh RNA感染组（T+TRB3-sh RNA组）;2.Ad-GFP,Ad-TRB3,Ad-TRB3-sh RNA载体的构建,鉴定及扩增;3.以不同感染复数感染对数生长期的MLE-12,通过荧光显微镜和流式细胞技术了解最佳感染效率;4.CCK8法测定各组细胞DNA的合成;5.FACS法检测各组细胞凋亡情况;6.q PCR法检测TRB3,胶原蛋白Ⅰ（CollaⅠ）,...
【文章来源】：青岛大学山东省
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
干扰siRNA刺激后，TRB3蛋白的表达下降，以siRNA1最明显B3
3.1.2 TGF-β1 适宜刺激浓度为 10ng/mLE-Cadherin蛋白含量在不同TGF-β 1 浓度结果分析：1ng/mL（t=32.909，P＜0.01）、5ng/mL（t=1.559，P＞0.05）、10ng/mL（t=-8.444，P＜0.05）、15ng/mL（t=2.078，P＞0.05），Vimentin 蛋白含量在不同TGF-β 1 浓度结果分析：1ng/mL（t=1.894，P＞0.05）、5ng/mL（t=3.343，P＞0.05）、10ng/mL（t=15.588，P＜0.01）、15ng/mL（t=2.392，P＞0.05）。由此可见在TGF-β 1 刺激浓度为 10ng/mL时E-Cadherin表达最低P＜0.05，Vimentin表达最高P＜0.01，结果具有统计学意义。表 3.2 不同TGF-β 1 浓度刺激MLE-12 细胞中E-Cadherin、 Vimentin含量（n=3， x ±S）TGF-β 1浓度白含量cell 1ng/mL 5ng/mL 10ng/mL 15ng/mLE-Cadherin 1 1.57±0.03**1.09±0.10 0.61±0.08*1.24±0.Vimentin 1 1.35±0.32 1.83±0.43 2.98±0.22**1.29±0.
组TRB3 10.94±0.031.97±0.31*0.47±0.05**1.66±0.07**1.62±0.13*2.87±0.33*#&0.38±0.06**##Vimentin 11.00±0.011.59±0.03**0.74±0.03**1.31±0.02**1.39±0.09*1.94±0.08**##&0.81±0.02**##E-Cadherin 10.95±0.100.40±0.05**2.10±0.05**0.53±0.11*0.57±0.13*0.26±0.05**#&0.89±0.01**##Fibronectin 10.95±0.051.58±0.17*0.33±0.04**1.42±0.80**1.63±0.11*3.32±0.11**##&&0.46±0.04**##a-SAM 10.88±0.131.59±0.07**0.47±0.09**1.25±0.09*1.26±0.03**1.75±0.14*#&0.64±0.11**##ERK1/2 11.00±0.121.31±0.10*0.50±0.04**1.14±0.05*1.11±0.03*2.04±0.36*#&&0.61±0.03**##p-ERK1/2 11.00±0.011.34±0.07*0.53±0.03**1.14±0.04*1.11±0.04*2.04±0.11**##&&0.45±0.06**##p38MAPK 11.03±0.091.47±0.11*0.57±0.04**1.16±0.04*1.14±0.03*1.52±0.02**##&0.60±0.08*##p-p38MAPK 10.88±0.091.46±0.05**0.52±0.03**1.23±0.08*1.25±0.04**2.21±0.04**##&&0.61±0.05**##
【参考文献】：
期刊论文
[1]上皮间质转化相关信号通路在肺纤维化发生发展中的作用[J]. 韩姣,曾凡军,陈世雄. 山东医药. 2015(17)
[2]不同浓度TGF-β1对肺泡II型细胞系MLE-12表型及功能的影响[J]. 刘芳君,宋思思,邓春,郭春宝,符州,刘恩梅,刘莎,谭利,龚财惠. 中国细胞生物学学报. 2014(04)
[3]SB203580对肝纤维化大鼠肝脏Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响[J]. 杨新疆,齐翠花,郑勇,曹玉文,李睿,宋丽秀,赵强,陈卫刚. 世界华人消化杂志. 2014(03)
[4]特发性肺纤维化的治疗进展[J]. 田莉莹,于文成. 青岛大学医学院学报. 2013(03)
[5]肝纤维化大鼠肝脏中内质网应激相关分子CHOP和TRB3的表达变化[J]. 杜锡潮,韩冰,谢汝佳,邹河,杨勤. 中国病理生理杂志. 2013(05)
[6]JNK信号通路通过介导细胞凋亡对肺纤维化的调控作用[J]. 曹凤菊,刘学军,钟剑克. 中国药物与临床. 2012(03)
[7]TRB3在肾纤维化中的表达及其与上皮-间叶转化的关系[J]. 刘进稳,辛冰牧,慕容,花芳. 中国药理学通报. 2012(03)
[8]肺癌组织中E-cadherin和Vimentin的表达及其与上皮-间质转化的相关性[J]. 田茗源,王林辉,张雄,罗红池,李昱. 中国生物制品学杂志. 2011(09)
[9]CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型肝纤维化逆转与MAPK信号通路的研究[J]. 李政通,李俊,黄成,李浩,章圣鹏,黄艳,陶辉. 中国药理学通报. 2011(06)
[10]Notch/Jagged信号通路在肝纤维化大鼠模型中的动态表达及意义[J]. 叶超,陈永平,金晓芝,程瑗,戴志娟,林镯. 中华传染病杂志. 2011 (02)
博士论文
[1]Ⅰ型胶原蛋白和TGF-β1在食管鳞癌中生物学意义的研究[D]. 宋永明.山东大学 2014
[2]MAPK信号通道在TGF-β1诱导的肺泡上皮细胞转分化中的作用及沙利度胺的影响[D]. 陈海华.武汉大学 2013
[3]TRB3在肿瘤进展中的作用及其机制探讨[D]. 慕容.北京协和医学院 2012
[4]上皮-间充质转变（EMT）在百草枯中毒大鼠肺纤维化中的作用及机制探讨[D]. 易建华.浙江大学 2012
硕士论文
[1]TGF-β1/Smad3与JNK信号通路介导的细胞凋亡在小鼠肺纤维化中的作用及相互关系的研究[D]. 白琼.山西医科大学 2014
[2]核基因Tribble3调控MAPK信号通路在糖尿病肾病中的作用及机制[D]. 张锦航.山东大学 2014
本文编号：2903050
【文章来源】：青岛大学山东省
【文章页数】：74 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
干扰siRNA刺激后，TRB3蛋白的表达下降，以siRNA1最明显B3
3.1.2 TGF-β1 适宜刺激浓度为 10ng/mLE-Cadherin蛋白含量在不同TGF-β 1 浓度结果分析：1ng/mL（t=32.909，P＜0.01）、5ng/mL（t=1.559，P＞0.05）、10ng/mL（t=-8.444，P＜0.05）、15ng/mL（t=2.078，P＞0.05），Vimentin 蛋白含量在不同TGF-β 1 浓度结果分析：1ng/mL（t=1.894，P＞0.05）、5ng/mL（t=3.343，P＞0.05）、10ng/mL（t=15.588，P＜0.01）、15ng/mL（t=2.392，P＞0.05）。由此可见在TGF-β 1 刺激浓度为 10ng/mL时E-Cadherin表达最低P＜0.05，Vimentin表达最高P＜0.01，结果具有统计学意义。表 3.2 不同TGF-β 1 浓度刺激MLE-12 细胞中E-Cadherin、 Vimentin含量（n=3， x ±S）TGF-β 1浓度白含量cell 1ng/mL 5ng/mL 10ng/mL 15ng/mLE-Cadherin 1 1.57±0.03**1.09±0.10 0.61±0.08*1.24±0.Vimentin 1 1.35±0.32 1.83±0.43 2.98±0.22**1.29±0.
组TRB3 10.94±0.031.97±0.31*0.47±0.05**1.66±0.07**1.62±0.13*2.87±0.33*#&0.38±0.06**##Vimentin 11.00±0.011.59±0.03**0.74±0.03**1.31±0.02**1.39±0.09*1.94±0.08**##&0.81±0.02**##E-Cadherin 10.95±0.100.40±0.05**2.10±0.05**0.53±0.11*0.57±0.13*0.26±0.05**#&0.89±0.01**##Fibronectin 10.95±0.051.58±0.17*0.33±0.04**1.42±0.80**1.63±0.11*3.32±0.11**##&&0.46±0.04**##a-SAM 10.88±0.131.59±0.07**0.47±0.09**1.25±0.09*1.26±0.03**1.75±0.14*#&0.64±0.11**##ERK1/2 11.00±0.121.31±0.10*0.50±0.04**1.14±0.05*1.11±0.03*2.04±0.36*#&&0.61±0.03**##p-ERK1/2 11.00±0.011.34±0.07*0.53±0.03**1.14±0.04*1.11±0.04*2.04±0.11**##&&0.45±0.06**##p38MAPK 11.03±0.091.47±0.11*0.57±0.04**1.16±0.04*1.14±0.03*1.52±0.02**##&0.60±0.08*##p-p38MAPK 10.88±0.091.46±0.05**0.52±0.03**1.23±0.08*1.25±0.04**2.21±0.04**##&&0.61±0.05**##
【参考文献】：
期刊论文
[1]上皮间质转化相关信号通路在肺纤维化发生发展中的作用[J]. 韩姣,曾凡军,陈世雄. 山东医药. 2015(17)
[2]不同浓度TGF-β1对肺泡II型细胞系MLE-12表型及功能的影响[J]. 刘芳君,宋思思,邓春,郭春宝,符州,刘恩梅,刘莎,谭利,龚财惠. 中国细胞生物学学报. 2014(04)
[3]SB203580对肝纤维化大鼠肝脏Ⅰ、Ⅲ型胶原蛋白表达的影响[J]. 杨新疆,齐翠花,郑勇,曹玉文,李睿,宋丽秀,赵强,陈卫刚. 世界华人消化杂志. 2014(03)
[4]特发性肺纤维化的治疗进展[J]. 田莉莹,于文成. 青岛大学医学院学报. 2013(03)
[5]肝纤维化大鼠肝脏中内质网应激相关分子CHOP和TRB3的表达变化[J]. 杜锡潮,韩冰,谢汝佳,邹河,杨勤. 中国病理生理杂志. 2013(05)
[6]JNK信号通路通过介导细胞凋亡对肺纤维化的调控作用[J]. 曹凤菊,刘学军,钟剑克. 中国药物与临床. 2012(03)
[7]TRB3在肾纤维化中的表达及其与上皮-间叶转化的关系[J]. 刘进稳,辛冰牧,慕容,花芳. 中国药理学通报. 2012(03)
[8]肺癌组织中E-cadherin和Vimentin的表达及其与上皮-间质转化的相关性[J]. 田茗源,王林辉,张雄,罗红池,李昱. 中国生物制品学杂志. 2011(09)
[9]CCl4诱导的大鼠肝纤维化模型肝纤维化逆转与MAPK信号通路的研究[J]. 李政通,李俊,黄成,李浩,章圣鹏,黄艳,陶辉. 中国药理学通报. 2011(06)
[10]Notch/Jagged信号通路在肝纤维化大鼠模型中的动态表达及意义[J]. 叶超,陈永平,金晓芝,程瑗,戴志娟,林镯. 中华传染病杂志. 2011 (02)
博士论文
[1]Ⅰ型胶原蛋白和TGF-β1在食管鳞癌中生物学意义的研究[D]. 宋永明.山东大学 2014
[2]MAPK信号通道在TGF-β1诱导的肺泡上皮细胞转分化中的作用及沙利度胺的影响[D]. 陈海华.武汉大学 2013
[3]TRB3在肿瘤进展中的作用及其机制探讨[D]. 慕容.北京协和医学院 2012
[4]上皮-间充质转变（EMT）在百草枯中毒大鼠肺纤维化中的作用及机制探讨[D]. 易建华.浙江大学 2012
硕士论文
[1]TGF-β1/Smad3与JNK信号通路介导的细胞凋亡在小鼠肺纤维化中的作用及相互关系的研究[D]. 白琼.山西医科大学 2014
[2]核基因Tribble3调控MAPK信号通路在糖尿病肾病中的作用及机制[D]. 张锦航.山东大学 2014
本文编号：2903050
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