巨噬细胞移动抑制因子siRNA对脂多糖/流感病毒介导的急性肺损伤的保护作用及相关的信号转导机制

发布时间：2020-12-23 23:07

　　目的:本研究构建巨噬细胞移动抑制因子（MIF） siRNA,并探讨其对脂多糖/流感病毒介导的急性肺损伤的炎症反应和免疫反应的影响,及相关信号转导机制的作用,探索急性肺损伤治疗的新模式。研究内容和方法:第一部分:MIF siRNA在人肺泡上皮细胞A549的转染和干扰目的基因MIF表达将MIF siRNA用转染剂INTERFERin介导转染体外培养的A549细胞,通过RT- PCR方法观察不同浓度MIF siRNA转染后,对MIF mRNA表达的影响;采用细胞免疫荧光方法分析MIF蛋白表达的强弱;应用MTT方法测定MIF siRNA转染对细胞的毒性,及对LPS刺激A549细胞生存率的影响。第二部分:MIFsiRNA对脂多糖刺激/流感病毒感染人肺泡上皮细胞Toll样受体及其下游信号转导通路的影响离体研究:运用RT-PCR、Western-Blot、细胞免疫荧光和ELISA方法,分别从mRNA、蛋白、介质水平三个层面检测了LPS刺激/流感病毒感染人肺泡上皮细胞A549后TLR2、TLR3、TLR4的mRNA表达;下游MyD88依赖/非依赖信号转导通路元件MyD88和IRF3蛋白表达;核因子NF... 

【文章来源】：广州医科大学广东省

【文章页数】：142 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

转染MIFsiRNA/加入DXM后，LPS刺激6h，小鼠肺组织病理改变a：正常组、b：LPS刺激组、c：MIFsiRNA组、d：DXM组、e：MIFsiRNA+DXM组e

109图 24 转染 MIF siRNA /加入 DXM 后，LPS 刺激 6h，免疫组化检测小鼠肺组织 AQP1a：正常组、b：LPS 刺激组、c：MIF siRNA 组、d：DXM 组、e：MIF siRNA+DXM

110图 25 转染 MIF siRNA /加入 DXM 后，LPS 刺激 6h，免疫组化检测小鼠肺组织 AQP4a：正常组、b：LPS 刺激组、c：MIF siRNA 组、d：DXM 组、e：MIF siRNA+DXM


本文编号：2934500