COPD模型大鼠骨骼肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的实验研究

发布时间：2017-04-08 23:18

  本文关键词：COPD模型大鼠骨骼肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的实验研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】： 目的:观察细胞凋亡对COPD模型大鼠骨骼肌萎缩影响及相关基因Bcl-2、Bax的表达。 方法:100只健康Wistar大鼠随机分为模型组80只,对照组20只。模型组采用1-29天,31-60天熏香烟,第30天气管内注入猪胰蛋白酶(PEE)的方法建立COPD大鼠模型。对照组不熏香烟,在模型组气管内注入PEE的同一天采用同一术式气管内注入等量生理盐水。继续饲养至第90天,以低于对照组大鼠平均体重的90%作为判断发生营养不良的标准,将实验大鼠分为:对照组、COPD营养正常组和COPD营养不良组。取大鼠膈肌、趾长伸肌制备石蜡切片,分别采用TUNEL法测定膈肌、趾长伸肌石蜡切片细胞凋亡率和免疫组织化学法测定Bcl-2、Bax表达,Image-Pro Plus version 6.0图像系统测定免疫组化表达强度,所得数据经SPSS 13.0软件进行单因素方差分析、t检验及相关性分析。 结果:1.COPD模型大鼠营养不良组膈肌、趾长伸肌的凋亡率均显著高于对照组(P＜0.01,P＜0.01)、COPD模型大鼠营养正常组(P＜0.01,P＜0.01)。三组大鼠膈肌凋亡率与趾长伸肌比较均无差异(P＞0.5)。2.对照组膈肌、趾长伸肌Bcl-2的表达均强于COPD模型大鼠营养正常组(P＜0.01,P＜0.01)、COPD模型大鼠营养不良组(P＜0.01,P＜0.01);COPD模型大鼠营养不良组膈肌、趾长伸肌的Bax表达均强于COPD模型大鼠营养正常组(P＜0.01,P＜0.01)、对照组(P＜0.01,P＜0.01)。三组大鼠膈肌Bcl-2、Bax与趾长伸肌比较均无差异(P＞0.5)。 结论:COPD模型大鼠存在明显骨骼肌凋率增加,细胞凋亡可能是COPD模型大鼠骨骼肌萎缩的重要机制。Bcl-2、Bax参与调节COPD模型大鼠骨骼肌凋亡。
【关键词】：慢性阻塞性肺疾病 骨骼肌肌萎缩 细胞凋亡 Bcl-2 Bax
【学位授予单位】：中南大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2008
【分类号】：R563.9
【目录】：

• 摘要4-5
• ABSTRACT5-11
• 前言11-13
• 第一章 材料与方法13-19
• 1.1 实验动物及分组13
• 1.1.1 实验动物13
• 1.1.2 实验动物分组13
• 1.1.3 实验动物编号13
• 1.1.4 实验动物饲养13
• 1.2 主要试剂13-14
• 1.3 主要仪器14
• 1.4 主要实验用溶液的配制14
• 1.4.1 猪胰弹性蛋白酶生理盐水溶液14
• 1.4.2 4%多聚甲醛14
• 1.4.3 0.01M柠檬酸盐缓冲液14
• 1.5 大鼠COPD模型建立14-15
• 1.5.1 气管内注入猪胰弹性蛋白酶14-15
• 1.5.2 被动吸烟方法15
• 1.6 COPD模型组大鼠营养不良的判断15
• 1.7 模型组成模后分组15
• 1.8 处死动物的时间、方式、肺功能的测定及标本的处理15-16
• 1.8.1 处死动物的时间15
• 1.8.2 肺功能的测定15-16
• 1.8.3 处死动物的方式16
• 1.8.4 肌肉组织的处理16
• 1.8.5 肺组织的处理16
• 1.8.6 骨骼肌、肺组织石蜡切片的制作16
• 1.9 肺组织病理学检查16-17
• 1.10 骨骼肌组织病理学检测17
• 1.11 骨骼肌细胞凋亡率测定17
• 1.11.1 方法17
• 1.11.2 结果观察和分析17
• 1.12 Bcl-2蛋白表达检测17-18
• 1.13 Bax蛋白表达检测18
• 1.14 Bcl-2、Bax观察和分析18
• 1.15 统计学分析18-19
• 第二章 结果19-37
• 2.1 模型评价19-21
• 2.1.1.大鼠一般情况19
• 2.1.2 大鼠肺组织、气道病理改变(见本章附图1)19
• 2.1.3.肺功能19
• 2.1.4 大鼠体重变化19-21
• 2.2 趾长伸肌骨骼肌重量变化21-22
• 2.3 骨骼肌病理变化(见本章附图2)22
• 2.4 骨骼肌凋亡率测定22-25
• 2.4.1 实验大鼠膈肌、趾长伸肌凋亡率(见本章附图3)22-23
• 2.4.2 趾长伸肌凋亡率与体重相关性分析23
• 2.4.3 趾长伸肌凋亡率与骨骼肌重量的相关性分析23-25
• 2.5 Bcl-2、Bax表达25-30
• 2.5.1 Bcl-2表达:(免疫组化图片见本章附图4)25-26
• 2.5.2 Bax的表达:(免疫组化图片见本章附图5)26-27
• 2.5.3 趾长伸肌凋亡率与Bcl-2、Bax相关性27-30
• 附图30-37
• 附图130-31
• 附图231-32
• 附图332-33
• 附图433-35
• 附图535-37
• 第三章 讨论37-43
• 3.1 COPD模型制备及本实验建立COPD大鼠模型的评价37-38
• 3.2 骨骼肌萎缩在COPD营养不良判定中的作用38-39
• 3.3 细胞凋亡在COPD模型大鼠骨骼肌萎缩中的作用39-40
• 3.4 Bcl-2家族蛋白对COPO骨骼肌细胞凋亡的调节作用40-43
• 第四章 结论43-44
• 参考文献44-49
• 附录 综述49-64
• 致谢64

【引证文献】

中国期刊全文数据库 前1条

1 李风森;高振;荆晶;徐丹;杨剑;哈木拉提·吾甫尔;;慢性阻塞性肺疾病西北寒燥证模型全身炎症反应状态研究[J];科技导报;2011年18期

  本文关键词：COPD模型大鼠骨骼肌细胞凋亡及Bcl-2、Bax表达的实验研究，，由笔耕文化传播整理发布。

本文编号：293919