增龄对小鼠肺纤维化模型端粒酶活性影响的研究

发布时间：2017-04-12 07:14

  本文关键词：增龄对小鼠肺纤维化模型端粒酶活性影响的研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目的:通过对青年小鼠及老年小鼠的肺纤维化过程中E-钙粘蛋白(E-Cadherin,E-Cad)、α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)及端粒酶逆转录酶(TERT)的表达水平进行研究,对比不同年龄的小鼠肺纤维化模型病变的程度及端粒酶活性的高低,研究增龄对小鼠肺纤维化程度及纤维化过程中端粒酶活性变化的影响。方法:将50只20周龄的雄性C57BL/6小鼠随机分为两组,其中25只小鼠作为青年组,另外25只饲养25周作为老年组,将青年组及老年组再随机分成对照组(n=5)及博来霉素(BLM)造模组(n=20)。对照组气管注入0.9%氯化钠注射液于第28天处死,留取左肺;博来霉素造模组小鼠平均分为四组,每组5只,分别在气管注入博莱霉素稀释液(5mg/kg)的第7、14、21、28天处死,留取左肺标本。对肺组织进行HE染色及Masson染色,观察小鼠肺纤维化模型是否造模成功。运用肺组织石蜡切片免疫组化染色法,对可反映小鼠肺纤维化病变程度的上皮细胞标志蛋白E-钙粘蛋白(E-Cadherin,E-Cad),间质细胞标志蛋白α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、波形蛋白(Vimentin)及可反映端粒酶功能活性的指标端粒酶逆转录酶(TERT)进行平均灰度值检测,对比各项指标在青年小鼠和老年小鼠的对照组与造模组间的差异,结果分析采用独立样本量t检验统计分析法并对其进行相关性分析。结果:小鼠肺组织石蜡切片HE染色及Masson染色结果表明气管注入BLM诱导小鼠肺纤维化模型成功。老年小鼠肺纤维化病变程度较青年小鼠严重。在模型组中,与青年组相比,E-Cadherin在老年组中表达少(P0.05);与对照组相比,模型组中E-Cadherin表达均减少(P0.05),且随造模时间延长而减少(P0.05)。在模型组中,与青年组相比,α-SMA、Vimentin在老年组中表达增多(P0.05);与对照组相比,模型组中α-SMA、Vimentin表达增加(P0.05),且随造模时间延长而增多(P0.05)。与青年组相比,TERT在老年组中表达率波动范围大,其阳性率随时间变化先升后降(P0.001),于第14天达到最高峰处,28天降回第7天程度。结论:气管注入BLM(5mg/kg)诱导小鼠肺纤维化模型成功,老年小鼠普遍比青年小鼠肺病变程度严重。肺纤维化过程中,E-钙粘素(E-Cadherin,E-Cad)表达下降,α平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及波形蛋白(Vimentin)表达升高,端粒酶的逆转录酶(TERT)功能先升后降。老年小鼠端粒酶活性波动值比青年小鼠波动值大,增龄可通过影响小鼠肺纤维化模型中端粒酶的活性来改变肺纤维化病变程度。
【关键词】：特发性肺纤维化 端粒及端粒酶 TERT 增龄
【学位授予单位】：山西医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2016
【分类号】：R563;R-332
【目录】：

• 中文摘要5-7
• 英文摘要7-10
• 常用缩写词中英文对照表10-11
• 前言11-13
• 1 材料与方法13-18
• 1.1 实验材料13-14
• 1.2 实验方法14-18
• 2 结果18-29
• 2.1 肺组织的病理变化18-21
• 2.2 肺组织E-Cadherin、α-SMA、Vimentin及TERT的免疫组化染色结果21-28
• 2.3 E-Cadherin、α-SMA、Vimentin及TERT表达相关性分析28-29
• 3 讨论29-31
• 3.1 小鼠肺纤维化模型的病理染色29
• 3.2 青年小鼠与老年小鼠肺纤维化病变程度对比29
• 3.3 增龄对小鼠肺纤维化模型中端粒酶活性的影响29-31
• 4 结论31-32
• 参考文献32-34
• 综述34-38
• 参考文献36-38
• 致谢38-39
• 个人简历39

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本文编号：300978