小鼠侵袭性肺曲菌病NOD2表达及其在巨噬细胞抗曲菌免疫中的作用

发布时间：2021-02-18 16:45

　　目的:了解在免疫受损小鼠侵袭性肺曲菌病模型肺组织中NOD2表达的改变,并进一步研究其NOD2在小鼠巨噬细胞RAW264.7抗曲菌免疫中的作用。方法:（1）采用环磷酰胺腹腔注射的方法造成小鼠粒细胞缺乏,经鼻滴入烟曲菌孢子,建立小鼠侵袭性肺曲菌病模型,检测感染前后肺组织中NOD2和RIP2基因表达情况;（2）合成针对小鼠NOD2的三条siRNA序列及阴性对照序列,转染RAW264.7细胞,通过实时荧光PCR方法及western blot方法检测基因沉默效果,筛选出有效序列;（3）以筛选出的有效siRNA序列转染RAW264.7细胞,设置正常RAW264.7细胞做对照,分别以底液、MDP、Af、MDP+Af刺激两组细胞,并观察24h、48h、72h,收集细胞和上清,检测NOD2和RIP2基因及其蛋白的表达情况、NF-κB蛋白表达情况和上清液TNF-α、IL-8的变化。结果:（1）免疫受损小鼠接种烟曲菌后肺部病理切片显示明显的充血、水肿、中性粒细胞浸润并形成多发病灶,六胺银染色可见孢子生发成菌丝并呈多发集落分布,至18～48小时最为显著,提示侵袭性肺曲菌病小鼠建模成功,而对照组炎症反应轻于免疫... 

【文章来源】：复旦大学上海市 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：79 页

【学位级别】：博士

【文章目录】：
中英文词汇对照
中文摘要
ABSTRACT
前言
第一部分 免疫受损小鼠肺曲菌病模型的建立及其肺组织中NOD2和RIP2的表达
    材料和方法
    结果
    讨论
第二部分 针对RAW264.7细胞NOD2的siRNA序列筛选
    材料与方法
    结果
    讨论
第三部分 NOD2在RAW264.7细胞抗曲茵免疫中的作用
    材料和方法
    结果
    讨论
参考文献
综述
致谢



本文编号：3039818