CBP与STAT4/STAT6结构相关关系研究及在哮喘Th失衡中的作用

发布时间：2021-03-07 22:35

　　STAT4和STAT6是Th0向Th1或Th2分化过程中的两个关键转录因子,他们分别诱导Th1和Th2类细胞因子转录。CBP是核内一种重要的协同激活分子,转录因子需通过竞争与CBP结合而启动基因转录。有研究显示,CBP在STAT4和STAT6介导基因转录过程中均起非常重要的作用,STAT4和STAT6可能就是通过竞争性结合CBP上有限的位点而影响靶基因转录。本试验拟分别构建STAT4,STAT6真核表达质粒（CBP表达质粒由伦敦大学阮雄中教授友情馈赠）,通过分别超表达STAT4或STAT6,研究二者竟争性与CBP结合从而影响Th1/Th2平衡的机制。目的:分别构建STAT4,STAT6重组真核表达质粒,与CBP表达质粒一起按不同比例共转染入COS7细胞,并分别检测游离STAT4或STAT6的量。方法:采用RT-PCR方法从小鼠脾脏组织中扩增STAT4/STAT6基因全长cDNA,T/A克隆到pMD19-T载体中,双酶切后亚克隆入pIRES2-EGFP载体,构建pIRES2-EGFP-STAT4/STAT6质粒,经限制性内切酶鉴定并测序后,与pcDNA3- CBP共转染入COS7细胞,2... 

【文章来源】：重庆医科大学重庆市

【文章页数】：52 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

小鼠总RNAFig.2-1TotalRNAofmouse

图 2-1 小鼠总 RNAFig.2-1 Total RNA of mouseM：NDA Marker DL 2000 ，1：Total RNTAT4 目的基因 STAT4 cDNA，将扩增产物于 1%琼脂00bp 稍上方出现清晰、明亮、均一的 2-2，2-3）

2-4 STAT4 Inner PCR 纯化产物Fig.2-4 Purified STAT4 Inner PCR produc DNA Marker，1：Purified STAT4 Inmple 质粒为模板扩增 STAT4 片后，采用 PCR 方法从重组 pM止密码、XhoⅠ/KpnⅠ酶切位在紫外观测仪中在 2027bp~247bp，长度与预计值相符（图

【参考文献】：
期刊论文
[1]过氧亚硝基阴离子对气道上皮细胞的损伤作用[J]. 朱铁年,赵瑞景,凌亦凌,谷振勇,周君琳.  中国病理生理杂志. 2001(06)



本文编号：3069922