矽肺相关肺上皮细胞间质转分化中miR-34a-5p的作用
发布时间：2021-03-08 14:40
目的目前矽肺发病机制尚未阐明,其预防和控制是中国职业病防治工作的重要任务之一。普遍认为,在矽尘等多种因素作用下,肺泡Ⅲ型上皮细胞通过上皮-间质转化（epithelial-mesenchymal transition,EMT）转变为肌成纤维细胞,大量增殖并分泌胶原等相关蛋白,是肺纤维化发生发展中重要的生物学事件。以往研究表明,miR-34a-5p 及其靶基因 SMAD4（drosophila mothers against decapentaplegichomolog4）共同参与了肿瘤和肝纤维化等疾病的EMT过程中,可能是EMT过程的重要环节和潜在干预靶点。然而,其在矽肺相关EMT过程中的作用尚未见报道。因此,构建SiO2粉尘诱导的小鼠矽肺模型和体外肺上皮细胞EMT模型,观察miR-34a-5p和SMAD4在其中的存在状况和变化情况,并采用脂质体转染技术对miR-34a-5p和SMAD4进行干预以进一步研究其在EMT中的生物学作用,为深入探索矽肺发病机制提供新的思路和参考依据。方法1.矽肺小鼠EMT过程中miR-34a-5p存在状况实验观察C57BL6/N品系小鼠随机分成不同时间点（包括...
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：88 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３．１不同时间段小鼠肺组织ＨＥ、Ｍａｓｓｏｎ染色结果（ｘ２００）??
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【参考文献】：
期刊论文
[1]尘肺合并肺结核患者并发肺癌调查分析[J]. 朱春梅. 世界最新医学信息文摘. 2019(67)
[2]矽肺的治疗进展[J]. 周笑云,刘桂桃. 世界最新医学信息文摘. 2018(A5)
[3]miR-34a mediates oxaliplatin resistance of colorectal cancer cells by inhibiting macroautophagy via transforming growth factor-β/Smad4 pathway[J]. Chen Sun,Fu-Jing Wang,Hao-Gang Zhang,Xun-Zheng Xu,Rui-Chun Jia,Lei Yao,Peng-Fei Qiao. World Journal of Gastroenterology. 2017(10)
[4]虎杖苷对TGF-β1诱导的人类肺泡上皮A549细胞EMT的影响[J]. 杨珺超,徐璐,宋康,王媛,高润娣,陈瑞琳,曹羽. 中国中西医结合杂志. 2016(04)
博士论文
[1]miR-205靶向调控Smad4影响宮颈癌增殖、凋亡及侵袭的机制研究[D]. 华方方.郑州大学 2017
[2]microRNA和基因功能网络构建与分析方法[D]. 徐云刚.哈尔滨工业大学 2014
硕士论文
[1]MiR-702-3p调控TGF-β1在纳米二氧化硅致肺上皮—间质转化中的作用机制研究[D]. 李明月.东南大学 2017
[2]游离二氧化硅诱导大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞转分化及其时间—效应关系[D]. 陈慧婷.郑州大学 2017
[3]Smad4介导的丙戊酸钠（VPA）抑制肾细胞癌上皮间质转化（EMT）的机制研究[D]. 毛少为.山东大学 2017
本文编号：3071219
【文章来源】：郑州大学河南省 211工程院校
【文章页数】：88 页
【学位级别】：硕士
【部分图文】：
图３．１不同时间段小鼠肺组织ＨＥ、Ｍａｓｓｏｎ染色结果（ｘ２００）??
????３．１．２小鼠肺组织中ＥＭＴ相关基因表达情况??ＲＴ－ｑＰＣＲ检测了上皮标志物Ｅ－ｃａｄ及间充质标志物Ｖｉｍｅｎｔｉｎ和ａ－ＳＭＡ的??ｍＲＮＡ相对表达水平，结果见图３．２和表３．１。结果显示：与生理盐水对照组相??比，在Ｓｉ０２处理的第５６天小鼠肺组织中上皮标志物Ｅ－ｃａｄ?ｍＲＮＡ表达下调??（尸＜０．０５）；间质标志物Ｖｉｍｅｎｔｉｎ和ａ－ＳＭＡ?ｍＲＮＡ表达升高（ＰＯ．０５）。??〇?２〇＂｜?■Ｓａｌｉｎｅ??？５??￡?？?ｃ?＊?＊?Ｄ?Ｓｉｌｉｃａ??ａ１－５＇?Ｔ?工??ＩＭＩ??Ｅ－ｃａｄ?Ｖｉｍｅｎｔｉｎ?ａ－ＳＭＡ??图３．２小鼠肺组织中ＥＭＴ相关基因ｍＲＮＡ表达情况??注：＊表示与对照组相比，尸＜０．０５。??表３．１小鼠肺组织中ＥＭＴ相关基因ｍＲＮＡ表达情况（??基因?Ｓａｌｉｎｅ?Ｓｉｌｉｃａ?ｔ?Ｐ??Ｅ－ｃａｄ?１．００±０．０７?０．７７士０．１３＊?５．９０３?０．０２３??Ｖｉｍｅｎｔｉｎ?１．００±０．１０?１．３７?士０．１２＊?－３．９００?０．０１８??ａ－ＳＭＡ?１．００?士?０．１１?１．３４?士?０．０５＊?－４．８０６?０．００９??注：＊表示与对照组相比，??ＷＢ检测了上皮标志物Ｅ－ｃａｄ及间充质标志物Ｖｉｍｅｎｔｉｎ和ａ－ＳＭＡ的蛋白相??对表达水平，结果见图３．３和表３．２。结果显示：与生理盐水对照组相比，在Ｓｉ０２??处理的第５６天小鼠肺组织中上皮标志物Ｅ－ｃａｄ蛋白表达显著下调（Ｐ＜０．０５）；??间质标志物ａ－ＳＭＡ蛋白表达升高（Ｐ＜０．０５）。此外，免疫荧光法检测了上皮标??２５??
?＾???志物Ｅ－ｃａｄ表达水平，结果见图３．４。结果显示：与对照组相比，实验组小鼠肺??组织中Ｅ－ｃａｄ表达降低。这与Ｗｅｓｔｅｒｎ?ｂｌｏｔ结果相一致。??｜?２０?■Ｓａｌｉｎｅ??ＳａＭｎｅ?Ｓｉｌｉｃａ?ｌ１＇５＇?自?Ｄ?■??Ｅ－ｃａｄ?—?一細一?｜?！３５ｋＤ?｜?１〇＿?■?？?■??ａ－ＳＭＡ?｜咖》］?４２ｋＤａ?｜?０．５－?■?＇?Ｋ?；??Ｐ－ａｃｔｉｎ?ｉ?ｉ?？?４２ｋＤａ?ｉ?〇?〇．?＿ＩＴ?９＿ＪＨｔ?９?＿??Ｅ－ｃａｄ?ｕ－ＳＭＡ??图３．３小鼠肺组织中ＥＭＴ相关基因蛋白表达情况??注：＊表示与对照组相比，／＞＜〇．〇５。??表３．２小鼠肺组织中ＥＭＴ相关基因蛋白表达情况（Ｓｂ，ｎ＝３）??基因?Ｓａｌｉｎｅ?Ｓｉｌｉｃａ?ｔ?Ｐ??Ｅ－ｃａｄ?１．００?土０．０２?０．７１土０．０３＊?１９．１８８?＜０．００１???ａ－ＳＭＡ?１．００?士?０．０３?１．５０?士?０．０５＊?－１６．２６３?＜０．００１??注：＊表示与对照组相比，Ｐ＜０．０５。??Ｅ－ｃａｄｈｅｒｉｎ?ＤＡＰｌ?Ｍｅｒｇｅ??ｍｕｍ??？■??图３．４小鼠肺组织中Ｅ－ｃａｄ表达??２６??
【参考文献】：
期刊论文
[1]尘肺合并肺结核患者并发肺癌调查分析[J]. 朱春梅. 世界最新医学信息文摘. 2019(67)
[2]矽肺的治疗进展[J]. 周笑云,刘桂桃. 世界最新医学信息文摘. 2018(A5)
[3]miR-34a mediates oxaliplatin resistance of colorectal cancer cells by inhibiting macroautophagy via transforming growth factor-β/Smad4 pathway[J]. Chen Sun,Fu-Jing Wang,Hao-Gang Zhang,Xun-Zheng Xu,Rui-Chun Jia,Lei Yao,Peng-Fei Qiao. World Journal of Gastroenterology. 2017(10)
[4]虎杖苷对TGF-β1诱导的人类肺泡上皮A549细胞EMT的影响[J]. 杨珺超,徐璐,宋康,王媛,高润娣,陈瑞琳,曹羽. 中国中西医结合杂志. 2016(04)
博士论文
[1]miR-205靶向调控Smad4影响宮颈癌增殖、凋亡及侵袭的机制研究[D]. 华方方.郑州大学 2017
[2]microRNA和基因功能网络构建与分析方法[D]. 徐云刚.哈尔滨工业大学 2014
硕士论文
[1]MiR-702-3p调控TGF-β1在纳米二氧化硅致肺上皮—间质转化中的作用机制研究[D]. 李明月.东南大学 2017
[2]游离二氧化硅诱导大鼠肺泡Ⅱ型上皮细胞转分化及其时间—效应关系[D]. 陈慧婷.郑州大学 2017
[3]Smad4介导的丙戊酸钠（VPA）抑制肾细胞癌上皮间质转化（EMT）的机制研究[D]. 毛少为.山东大学 2017
本文编号：3071219
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