CD69在小鼠嗜酸性粒细胞中的表达及其抗体对哮喘小鼠气道炎症的抑制作用及机制研究

发布时间：2021-03-13 14:11

　　研究背景嗜酸性粒细胞（Eos）是哮喘发病机制中最重要的炎症效应细胞。Eos在气道的浸润与活化与哮喘的严重程度及气道高反应性（AHR）的进展相关，IL-5缺陷鼠进一步证实了气道Eos的浸润与粘液分泌、AHR的内在联系。哮喘气道慢性炎症本质为气道Eos的激活与凋亡障碍。诱导气道活化Eos凋亡是治疗哮喘的关键。目前哮喘的急性发作仍需应用全身激素。它可非特异性地作用于所有细胞并抑制皮质轴反应导致全身副作用，这给它的应用带来限制，特别是儿童和青少年哮喘患者的治疗；此外，还有少部分病人是激素抵抗型的。因此，寻找特异性诱导气道活化Eos凋亡的药物仍是全球研究工作者的艰巨任务。细胞表面抗原CD69的发现为这一需求带来了新的希望。CD69于1981年发现，早期被称为AIM、EA-1、LEU-23、MLR-3等，被认为是T细胞的活化标记物，在T细胞活化后1小时即有表达，并可持续至72小时，对T细胞的增殖分化有一定的作用。后来的研究发现CD69可在几乎所有髓系细胞中表达。CD69通常以同源二聚体形式存在，由分子量为225KD的两条多肽链通过不同的糖基化组成。CD69在细胞表面表达均为磷酸化形式，这对它与其它... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

【文章页数】：77 页

【学位级别】：博士

【部分图文】：

不同细胞因子作用卜EoS表面CD69的表达与细胞的存活率

哮喘组小鼠BALF可见中大量Eos积聚(数据未显示)，且BALF中EoS表面有CD69的高度表达，无论是正常小鼠还是哮喘小鼠外周血中Eos与新鲜提纯的外周血EoS一样，表面均无CD69的表达(见表3，图3)，而正常组小鼠BALF中几乎没有Eos(见FACS图)。哮喘组小鼠的肺组织切片中可见支气管周围大量姗P阳性细胞浸润，而正常组小鼠肺组织切片中几乎MBP阳性细胞(见照片2)。表3不同部位EoS表面CO69的表达 Table3ExPressionofCD69onEosfrombloodorBALF组别新鲜Eos外周血wsW0 BALFWO GMFl 2.28士0.04 2.28士0.06 2.40士0.1919.50士2.97*注:与新鲜Eos相比，*p<0.05，“ *pco.OOla69G0·山几卜。合!su毖u一n公uea三。石。三。。0 Ff6Sh.05WO、blood图3外周血、BALF中Eos表面CD69的表达 Fig3CD69exPressiononeosinoPhilsfrombloodorBALF TherewasnoCD69exPressiononeosinoPhilsfrombloodofasthmatiemiee， neitherdid eosinoPhilsfromeontrolgrouP.ButeosinoPhilsfrom

2.1气道反应性结果BUXCO数据显示，各组的基础Penh无明显差别，逐次增加吸入Mch浓度后均有Penh的增高(见表4，图4)。WS组、Da组、CD69组小鼠在吸入50mg/ml的Mch时Penh略有增高， 1oomg/rril时Penh值明显增高。而WO组、IgG对照组吸入在吸入25mg/ml浓度Mch时Penh即有明显增高，此后在50mg/nil、100哩/而时增高幅度更大。此两组在各个浓度点的Penh无明显差别，但从50mg/ml浓度点起，两组的Penh值与WS组相比较均有显著增高(p<0.05)。Dp组在25mg/ml的浓度时开始明显高于ws组，但差别无统计学意义。提示抗原的致敏激发可诱导小鼠AHR，而antiCD69mAb可抑制这一反应。表4抗原致敏激发后小鼠对Mch的气道反应性(实际Penh与基础Penh的比值) Table4A扮 wayresPonsiVenesseXPressedbyPereeniofbaselinePenhinducedby OVAsensit试 ionandprovocation(percentofbaselinePenh)WS组WO组IgG组CD69组na组DP组Saline 1.10士 0.071.16士0.10 1.20士 0.101.10士 0.051.21士 0.071.08士0.053mg/ml 1.31士 0.091.56士 0.201.51士0.161，23士 0.121.11士 0.071.29士0.1112呵而 1.65士 0.182.59士0.76 2.79士 0.581.37士 0.131.34士 0.181.62士0.27兮月*4.勺


本文编号：3080359