实验性吸入性肺炎模型的建立及细胞焦亡的作用

发布时间：2021-03-26 07:56

　　目的:建立一种胃酸与内毒素的协同作用的实验性吸入性肺炎模型并探究吸入性肺炎与细胞焦亡的关系。方法:雄性清洁级SD大鼠74只,体重约为200-240g,10只大鼠用于提取大鼠胃内容物,通过过滤、高压灭菌、离心、盐酸调节PH值等方法制备酸性胃内容物（Combined acid and small particles,CASP）,将剩余64只SD雄性大鼠随机分配到4个组,分别为对照组（NS/NS组）,酸性胃内容物/盐水组（CASP/NS组）,盐水/LPS组（NS/LPS组）,酸性胃内容物/LPS组（CASP/LPS组）。所有动物在第一次滴注后（即在滴注酸性胃内容物悬液或生理盐水）6h或24h后麻醉放血处死。取肺组织行HE染色,光镜下观察肺组织病理改变并评估肺损伤;检测肺组织MPO;酶联免疫法检测IL-1β表达,Western blot检测GSDMD,NLRP3表达;免疫组织化学（Immunohistochemistry,IHC）检测GSDMD表达。检测湿干比,并通过支气管肺泡灌洗,检测BALF中总蛋白浓度、BALF中有核细胞计数。结果:1.HE染色病理:NS/NS组大鼠肺组织保持基本肺泡完整... 

【文章来源】：河北医科大学河北省

【文章页数】：56 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

大鼠肺组织HE染色后病理切片

肺组织MPO含量

研究论文264.不同吸入性肺炎中NLRP3，GSDMD蛋白的表达Westernblot结果显示：气管内滴注6h后，CASP/LPS组、CASP/NS组、NS/LPS组GSDMD表达明显高于对照组(P均<0.05)；造模24h后，CASP/LPS组、CASP/NS组、NS/LPS组GSDMD表达明显高于对照组(P均<0.05)（Fig.4A）。造模6h时，CASP/LPS组NLRP3表达明显高于对照组(均P<0.05)。造模24h后，CASP/LPS组、CASP/NS组NLRP3表达明显高于对照组(P均<0.05)。（Fig.4B）。8.免疫组织化学观察GSDMS表达：半定量结果示气管内滴注6h后，CASP/LPS组IOD/AREA[(1.94±0.12)×10-2]高于CASP/NS组[(0.82±0.05)×10-2]和NS/LPS组[(0.57±0.06)×10-2]及对照组[(0.53±0.04)×10-2]，CASP/NS组高于对照组(P均<0.05)。24h后，CASP/LPS组IOD/AREA[(1.29±0.13)×10-2]高于CASP/NSNS/NSNS/NSCASP/NSCASP/NSNS/LPSNS/LPSCASP/LPSCASP/LPS6h24h6h24h6h24h6h24h6hGSDMDGAPDHNLRP3AB图4各组大鼠GSDMD、NLRP3蛋白表达结果Fig.4ExpressionofGSDMD、NLRP3proteininlungtissue.*P＜0.05.


本文编号：3101265