Keap1/Nrf2信号通路在铜绿假单胞菌脂多糖上调气道粘蛋白MUC5AC表达中的作用

发布时间：2021-03-27 05:01

　　目的探讨Keap1/Nrf2信号通路在PA-LPS上调A549细胞粘蛋白MUC5AC表达中的作用。方法体外培养人体气道上皮细胞系A549细胞,用不同浓度（5ug/mL、10 ug/mL和15 ug/mL）PA-LPS干预不同时间（0h、8h、12h、24h）,实时荧光PCR（Q-PCR）分别检测干预后MUC5AC mRNA的表达水平,以明确PA-LPS是否能上调A549细胞MUC5AC的表达,以及PA-LPS最佳干预浓度和时间。干预24h后采用Western Blot检测MUC5AC以及抗氧化因子蛋白的表达。用不同剂量Nrf2 siRNA转染A549细胞,转染24h后,去血清过夜培养,加入10ug/mL LPS干预不同时间,Q-PCR检测该细胞Nrf2及MUC5AC mRNA的表达情况以确定最佳转染剂量和PA-LPS干预时间。同前方法检测PA-LPS干预Nrf2 siRNA转染后A549细胞MUC5AC、Keap1/Nrf2及其下游氧化基因mRNA及蛋白的表达情况。结果 10ug/mL PA-LPS干预24h后,A549细胞粘蛋白MUC5AC mRNA及蛋白水平均明显上调（p<0... 

【文章来源】：2011年第三十三届浙江省呼吸系病学术年会暨呼吸疾病诊治新进展学习班论文汇编浙江省科学技术协会会议论文集

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本文编号：3102934