mTOR信号通路及GRP78在慢阻肺中的调控作用和机制研究

发布时间：2021-03-27 09:08

　　慢性阻塞性肺疾病（Chronic obstructive pulmonary diseases,COPD）,简称慢阻肺,是呼吸系统疾病中常见的气道炎症性疾病。慢阻肺是一种持续气流受限为特征的可以预防和治疗的疾病。慢阻肺气流受限多呈进行性加重,并伴有对有害颗粒或气体（主要是吸烟）所致的肺部异常炎症反应。虽然慢阻肺直接累及肺,但也可引起显著的全身效应。世界各地慢阻肺的发病率和死亡率均有所不同,但慢阻肺由于其高致残率和致死率,已成为严重危害人类健康的一类疾病。据相关统计,在2012年,慢阻肺致死的患者约占全球死亡人数的6%。同时,慢阻肺不仅严重影响患者的生活质量,还给患者家庭以及社会带来沉重的经济负担。因此,对于慢阻肺发病机制的研究非常重要。目前慢阻肺普遍被认为是Th1及Tcl型免疫反应,并以气道、肺实质和肺血管的慢性炎症为特征,伴有粘液高分泌和纤毛粘液清除功能障碍。巨噬细胞、中性粒细胞甚至嗜酸性粒细胞在肺的不同部位浸润、激活,释放多种炎症介质,如:白介素-8（IL-8）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）,进一步促进中性粒细胞炎症,破坏肺的结构。另外,蛋白-蛋白酶失衡、氧化与抗氧化失衡等也是慢... 

【文章来源】：浙江大学浙江省 211工程院校 985工程院校 教育部直属院校

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【学位级别】：博士

【部分图文】：

图１．３．１吸烟抑制人肺组织ｍＴＯＲ信号通路

图１．３．２．１香烟烟雾暴露野生型小鼠２４周，Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ检测空气暴露组（ｎ＝８）??和烟雾暴露组（ｎ＝６）肺组织匀浆ｐ－ｍＴＯＲ和ＬＣ３Ｂ蛋白水平。??１．３．２．２气道上皮细胞（ＣＣ１０－ｒｔＴＡ／（ｔｅｔＯ）７－ｃｒｅ）或肺泡ＩＩ型上皮细胞??（ＳＰＣ－ｒｔＴＡ／（ｔｅｔＯ）７＿ｃｒｅ）条件性ｍＴＯＲ诱导敲除小鼠的构建??将气道上皮细胞的ＣＣ１０的启动子结合于表达反向四环素反式激活因子（ｒｔＴＡ）??上，ＣＣｌＯ－ｒｔＴＡ与ｔｅｔＯ－ＣＭＶ启动子相互结合，口服强力霉素诱导激活ＴＥＴ－Ｏｎ系??统，从而激活Ｃｒｅ重组酶，剪切插入ｆｌｏｘ序列的ｍＴＯＲ第４个外显子的表达，最??终导致气道上皮细胞ｍＴＯＲ的条件性敲除。与之类似，强力霉素激活肺泡ＩＩ型上??皮细胞的启动子ＳＰＣ所连接的Ｃｒｅ重组酶，剪切插入ｆｌｏｘ序列的ｍＴＯＲ，从而诱??导肺泡上皮细胞ｍＴＯＲ的条件性敲除。??为验证ｍＴＯＲ敲除效率，予转基因小鼠口服强力霉素２１天后处死。小鼠肺组??织提取组织蛋白，行Ｗｅｓｔｅｒｎ－Ｂｌｏｔ检测ｍＴＯＲ的表达。结果显示，和对照组小鼠??－－－＾＾ｘ－－－ｎ—ｏｘ

图１．３．２．２气道上皮细胞（ＣＣ１０－ｒｔＴＡ／（ｔｅｔＯ）７－ｃｒｅ）或肺泡ＩＩ型上（ＳＰＣ－ｒｔＴＡ／（ｔｅｔＯ）７－ｃｒｅ）条件性诱导ｍＴＯＲ敲除小鼠的敲除效率。（Ａ）?Ｗｅｓｔｅ检测ＣＣｌＯ－ｒｔＴＡＡｔｅｔＯＶ－Ｃｒｅ－ｍＴＯＲ＾＾ｘ小鼠肺组织句浆的ｍＴＯＲ蛋白表（Ｂ?）?Ｗｅｓｔｅｍ－Ｂｌｏｔ?检测?ＣＣ１０－ｒｔＴＡ／ＧｅｔＯＶ－Ｃｒｅ－ｍＴＯＲ１１１＾。３４?小鼠肺组织ｍＴＯＲ蛋白表达水平。??１．?３．?２．?３气道上皮细胞或肺泡ＩＩ型上皮细胞条件性ｍＴＯＲ诱导敲除小鼠的模型构建??本课题组前期予相关小鼠熏烟１２周，构建了小鼠气道炎症模型，实示，熏烟俎小鼠气道ＢＡＬＦ细胞总数明显高于空气暴露组小鼠，同时，在气道上皮细胞或肺泡上皮细胞ｍＴＯＲ特异性敲除小鼠组的气道ＢＡＬＦ细明显高于同窝对照组，反应了气道上皮细胞或肺泡上皮细胞ｍＴＯＲ特异性烟雾暴露诱导的气道炎症进一步恶化［２２］。肺气肿是慢阻肺区分于肺部其一ｍＴＯＲ

【参考文献】：
硕士论文
[1]哺乳动物雷帕霉素靶蛋白信号通路在吸烟诱导的气道炎症和慢性阻塞性肺疾病中的调控作用及机制研究[D]. 刘娟.浙江大学 2015



本文编号：3103247