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肝素抑制佛波酯诱导A549细胞表达MUC5AC和EGFR活性

发布时间:2021-04-09 06:31
  目的:观察肝素对肺上皮细胞株(A549细胞) EGFR活性及表达MUC5AC的影响及探讨可能的机制。方法:(1)体外培养人气道上皮细胞系A549细胞。(2)实验分为五组:对照组(无干预无刺激);模型组(PMA刺激),用10ng/ml的PMA刺激A549细胞1小时;干预组(G50:PMA和肝素50U/ml,G150: PMA和肝素150u/ml,G450: PMA和肝素450u/ml),干预组在PMA刺激前用不同浓度肝素预处理半小时。(3)各组处理24小时后用MTT法测的OD值分析各组药物对细胞活力的影响。(4)各组孵育24h后,采用RT-PCR检测各组细胞中MUC5AC mRNA含量及ELISA检测培养上清中MUC5AC;Western印迹分析磷酸化表皮生长因子(p-EGFR)蛋白水平。结果:(1)模型组和各干预组24小时后用MTT法测的OD值与对照组比较差异均无统计意义(P均>0.05),说明用于实验的不同浓度肝素和/或PMA对A549细胞的生长无影响。(2)模型组上清液中的MUC5AC蛋白含量与正常对照组相比有显著增高(为p<0.01);给予肝素干预后,明显降低了PMA... 

【文章来源】:重庆医科大学重庆市

【文章页数】:45 页

【学位级别】:硕士

【部分图文】:

肝素抑制佛波酯诱导A549细胞表达MUC5AC和EGFR活性


A549正常对照组(ⅹ200)

气道上皮细胞,肝素,灰度,比值


表 3 肝素对 PMA 诱导气道上皮细胞 p-EGFR 表达的影响( ±s ,n=3)Tab3 Effects of hepin on p-EGFR expression in each group组别 对照组 模型组 G50 组 G150 组 G450 组p-EGFR(灰度比值)0.763±0.026 1.130±0.070 0.960±0.097 0.736±0.071 0.608±0.011

电泳图,电泳


MUC5ACmRNA电泳结果


本文编号:3127106

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