HIF-1α和TGF-β1在人胚肺成纤维细胞内的表达及IL-4、INF-γ对其表达的影响

发布时间：2021-04-19 11:32

　　目的观察人胚肺成纤维细胞（MRC-5）在LPS刺激前后HIF-1α、TGF-β1的表达情况及对增殖、凋亡、迁移的影响,并通过IL4、INF-γ的干预,分析MRC-5中HIF-1α和TGF-β1的表达变化,从而为COPD患者气道重塑的机制提供理论支持。方法采用100μg·L^-1 LPS干预MRC-5,用CCK8、流式细胞仪和Transwell分别检测MRC-5增殖、凋亡及迁移情况,并使用RT-PCR、Western blot法检测细胞内HIF-1α,TGF-β1的表达情况;同时加入不同浓度IL-4,INF-γ刺激MRC-5,检测不同时间点细胞内HIF-1α和TGF-β1蛋白表达变化。结果与MRC-5组相比,LPS+MRC-5组的细胞增殖能力明显增强（P<0.05）,处于S期的细胞百分数显著增多（P<0.05）,细胞凋亡率明显减少（P<0.05）,细胞迁移能力明显提高（P<0.05）,同时HIF-1α和TGF-β1的mRNA及蛋白水平均显著升高（P<0.05）。而INF-γ对MRC-5细胞刺激时间的增加,HIF-1α和TGF-β1表达量同... 

【文章来源】：沈阳药科大学学报. 2020,37(08)北大核心CSCD

【文章页数】：7 页

【文章目录】：
1 仪器与材料
2 方法
    2.1 细胞培养
    2.2 CCK8法检测细胞增殖能力
    2.3 流式细胞术检测细胞周期
    2.4 Annexin V/PI双染检测细胞凋亡
    2.5 细胞迁移功能测定
    2.6 RT-PCR法检测LPS刺激下MRC-5细胞内HIF-1α、TGF-β1 mRNA的表达
    2.7 Western blot法检测LPS刺激下MRC-5细胞内HIF-1α、TGF-β1蛋白的表达
    2.8 Western blot法检测IL-4、INF-γ刺激下MRC-5中HIF-1α、TGF-β1 蛋白的表达
    2.9 统计学方法
3 结果
    3.1 细胞增殖
    3.2 细胞周期
    3.3 细胞凋亡
    3.4 细胞迁移能力
    3.5 LPS刺激下MRC-5细胞内HIF-1α、TGF-β1 mRNA及蛋白的表达
    3.6 INF-γ刺激下MRC-5细胞内HIF-1α、TGF-β1 蛋白的表达
    3.7 IL-4刺激下MRC-5细胞内HIF-1α、TGF-β1 蛋白的表达
4 讨论与结论



本文编号：3147468