溶血磷脂酸在内皮祖细胞移殖治疗急性肺损伤大鼠中的作用研究

发布时间：2017-04-19 10:22

  本文关键词：溶血磷脂酸在内皮祖细胞移殖治疗急性肺损伤大鼠中的作用研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：目标：探讨LPS引发的大鼠急性肺损伤(acute lung injury ALI),给予经溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid, LPA)预处理内皮祖细胞移殖治疗的效果,探究LPA对EPCs的存活及迁移活性的改善作用,提高EPCs移殖治疗ALI的效果,为生物学提供基础实验数据。方法：制建ALI模型,选用密度梯度的离心方法,单核细胞,经SD大鼠的骨髓中分离,得到内皮祖细胞,用DMEM-F12培养基(含20%优良胎牛血清及生长因子)诱导培育；体外分离、培养的内皮祖细胞,经LPA预处理,察看EPCs的增值活性在体外受LPA影响情况。进一步,经LPA过夜处理EPCs后,LPS诱导尾静脉注射的内皮祖细胞移殖,LPS+荧光标记的内皮祖细胞悬液,注入急性肺损伤模型大鼠体内,观察经LPA处理后的内皮祖细胞的移殖,治疗大鼠急性肺损伤的作用。大鼠随机分为4组：正常对照组、LPS对照组(LPS+PBS组)、内皮祖细胞对照组(LPS+EPCs组)、治疗组(LPS+EPCs+LPA组),大鼠ALI模型的建制,LPS诱导,方法静脉给药,LPS+内皮祖细胞移殖组,荧光标识的EPCs悬液(EPCs2×106/0.5ml),注入静脉于ALI模型中,治疗组(LPS+EPCs+LPA组)经LPA预处理的EPCs注射于ALI模型大鼠尾静脉。分别于移殖后1、7天取肺组织,选用HE染色评价病理改变；肺组织的干/湿比值(W/D)检测,选用实时荧光PCR方法,检测TLR4mRNA、NF-KBmRNA的表达情况,在肺组织中。结果：成功分离、培养EPCs；LPA能够促进EPCs的增殖, EPCs移植ALI大鼠结果显示,EPCs移殖可减轻急性肺损伤大鼠肺炎症细胞的浸润、细胞损伤,降低组织的W/D比值；EPCs经LPA预处理,大鼠外周血中内皮祖细胞的含量可显著提高；同时TLR4 mRNA、 NF-KBmRNA的表达在肺组织被下调,LPA预处理EPCs组相比单纯EPCs移殖组明显减少炎症细胞在急性肺损伤大鼠肺结构的浸润、细胞损伤,下降肺组织的W/D比值；TLR4 mRNA、 NF-KBmRNA的表达在肺组织被下调(p0.001)。 结论：1、选用密度梯度的离心方法,经大鼠的骨髓分离,培育了EPCs在体外；2、LPA预处理EPCs静脉移殖后能成功到达损伤大鼠的肺组织。3.LPA预处理EPCs移殖可缓解LPS诱导的急性肺损伤,修复了损伤的血管从而通过减少炎性细胞渗出和粘附,减轻了炎症应答；通过调节免疫细胞,下调了促炎症反应的应答,使机体恢复促炎一抗炎平衡。4.LPA促使EPCs增殖抗其凋亡,明显减缓LPS诱导的急性肺损伤,改善预后,为急性肺损伤治疗提供了新的思路。
【关键词】：溶血磷脂酸 内皮祖细胞 大鼠 急性肺损伤
【学位授予单位】：内蒙古大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2015
【分类号】：R563
【目录】：

• 摘要4-6
• ABSTRACT6-9
• ~.略词表9-11
• 引言11-19
• 参考文献14-19
• 1. 材料与方法19-26
• 1.1 材料19-20
• 1.2 方法20-26
• 2. 结果26-38
• 2.1 内皮祖细胞的分离培养26
• 2.2 LPA预处理内皮祖细胞26-28
• 2.3 溶血磷脂酸预处理内皮祖细胞移殖治疗急性肺损伤大鼠实验28-29
• 2.4.Real-time PCR 方法，检测 NF-kB mRNA 及 TLR4mRNA 表达29-34
• 2.5 流式细胞仪检测外周血中EPCs的含量34-38
• 3. 讨论38-43
• 参考文献43-49
• 结论49-50
• 文献综述50-56
• 参考文献53-56
• 致谢56-57
• 攻读学位期间发表的学术论文57

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前4条

1 贺兼斌;杨凯;向志;张书杰;李杰平;何平平;张平;;NF-κBp_(65)在实验性大鼠ALI肺组织中的表达及清开灵的干预研究[J];南华大学学报(医学版);2007年03期

2 滕纪媛;尚莉丽;;哮喘与气道重塑[J];临床肺科杂志;2010年01期

3 高朋;马筱玲;常文娇;周馨;张翠萍;周文静;;rPVL对Balb/C小鼠肺组织损伤及细胞因子的影响[J];临床肺科杂志;2011年06期

4 姚泓屹;邓立普;;炎症反应和细胞凋亡在急性呼吸窘迫综合征中的作用[J];蛇志;2013年04期

  本文关键词：溶血磷脂酸在内皮祖细胞移殖治疗急性肺损伤大鼠中的作用研究，由笔耕文化传播整理发布。

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本文编号：316091