miR-29b通过调控Bax基因抑制LPS诱导的肺泡上皮细胞系A549凋亡

发布时间：2021-04-27 01:41

　　目的探讨miR-29b对脂多糖（LPS）诱导的肺泡上皮细胞系A549凋亡的影响及其机制。方法将体外培养的A549细胞分为对照组、LPS组（给予10 mg/L的LPS处理）、LPS+miR-NC组（转染miR-29b mimics阴性对照后给予LPS处理）、LPS+miR-29b组（转染miR-29b mimics后给予LPS处理）;用RT-qPCR检测细胞中miR-29b的表达水平;MTT法检测细胞存活率;流式细胞仪检测细胞凋亡率;Western blot检测Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3蛋白的表达;双荧光素酶报告基因实验检测Bax和miR-29b的靶向关系。结果与对照组相比,LPS组、LPS+miR-NC组和LPS+miR-29b组细胞中miR-29b、Bcl-2蛋白的表达水平和细胞存活率均明显降低,而细胞凋亡率和Bax、cleaved caspase-3蛋白的表达水平均明显升高（P<0.05）;与LPS组相比,LPS+miR-29b组细胞中miR-29b、Bcl-2蛋白的表达水平和细胞存活率均明显升高,而细胞凋亡率和Bax、cleaved caspas... 

【文章来源】：基础医学与临床. 2020,40(06)CSCD

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 细胞及试剂
    1.2 方法
        1.2.1 细胞的培养、分组与处理:
        1.2.2 RT-qPCR检测miR-29b的表达:
        1.2.3 MTT法检测细胞存活率:
        1.2.4 流式细胞仪检测细胞凋亡率:
        1.2.5 Western blot检测Bcl-2、Bax和cleaved caspase-3蛋白的表达:
        1.2.6 双荧光素酶报告基因实验:
    1.3 统计学分析
2 结果
    2.1 转染后A549细胞中miR-29b表达升高
    2.2 miR-29b过表达对A549细胞活力的影响
    2.3 miR-29b过表达对A549细胞凋亡的影响
    2.4 miR-29b过表达对A549细胞凋亡相关蛋白表达的影响
    2.5 miR-29b靶基因的预测及其验证
3 讨论



本文编号：3162518