miR-194靶向FoxA1基因对LPS诱导的肺泡上皮细胞损伤影响

发布时间：2021-05-17 00:48

　　目的探讨微小RNA（miR-194）靶向叉头盒蛋白A1（FoxA1）基因对脂多糖（LPS）诱导的肺泡上皮细胞损伤影响及其可能作用机制。方法正常培养的肺泡上皮细胞为NC组,LPS处理的肺泡上皮细胞为LPS组,分别或共同将miR-con、miR-194 mimic、si-con、si-FOXA1转染至肺泡上皮细胞后加入LPS处理。qRT-PCR与Western blot分别检测miR-194、FOXA1的mRNA及蛋白表达;MTT检测细胞活力;流式细胞术检测细胞凋亡率;检测乳酸脱氢酶（LDH）活性;双荧光素酶报告实验检测miR-194与FOXA1的作用关系;Western blot检测Bax、Bcl-2的蛋白水平。结果与NC组相比,LPS组肺泡上皮细胞增殖率明显降低,凋亡率明显上升,Bax蛋白表达上调,Bcl-2蛋白表达下调,LDH活性增强;双荧光素酶报告实验验证FOXA1是miR-194的靶基因;miR-194过表达与抑制FOXA1表达后细胞增殖率明显上升,凋亡率明显下降,Bax蛋白表达下调,Bcl-2的蛋白表达上调,LDH活性降低,而共转染miR-194 mimic与pcDNA-FOX... 

【文章来源】：免疫学杂志. 2020,36(03)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 试剂及材料
    1.2 细胞转染、LPS处理及分组
    1.3 qRT-PCR检测细胞中miR-194、FoxA1mRNA表达水平
    1.4 蛋白免疫印迹（Western blot）检测FoxA1、Bax、Bcl-2蛋白表达
    1.5 检测细胞活力及LDH含量
    1.6 流式细胞术检测细胞凋亡
    1.7 荧光素酶报告基因实验
    1.8 统计学分析
2 结果
    2.1 miR-194和FOXA1在LPS诱导的肺泡上皮细胞A549中的表达
    2.2 过表达miR-194对LPS诱导的肺泡上皮细胞A549中细胞损伤的影响
    2.3 过表达miR-194对LPS诱导的肺泡上皮细胞A549凋亡的影响
    2.4 miR-194靶向FOXA1
    2.5 干扰FOXA1对LPS诱导的肺泡上皮细胞A549损伤和细胞凋亡的影响
    2.6 转染miR-194和过表达FOXA1对LPS诱导的肺泡上皮细胞A549细胞活力及凋亡的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
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[4]miRNA-21对脂多糖诱导大鼠心肌细胞增殖的影响及其机制探讨[J]. 王圆,黄燕,杨丹英,姜虹.  山东医药. 2016(38)
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博士论文
[1]FOXA1在急性肺损伤肺泡Ⅱ型上皮细胞凋亡中的作用[D]. 宋岚.中南大学 2009



本文编号：3190736