线粒体DNA对脂多糖诱导肺泡巨噬细胞炎症放大作用及机制研究

发布时间：2021-06-10 09:50

　　目的:阐明线粒体DNA（mitochondrial DNA,mtDNA）对脂多糖（lipopolysaccharide,LPS）诱导肺泡巨噬细胞（NR8383）炎症反应的放大作用,转染TLR9 siRNA后能抑制线粒体DNA的放大作用,并探讨线粒体DNA对LPS诱导肺泡巨噬细胞炎症反应的作用机制。方法:1)用线粒体DNA试剂盒提取mtDNA,并通过琼脂糖凝胶电泳检测所提取的mtDNA纯度。2)采用不同浓度梯度的mtDNA干预LPS诱导的肺泡巨噬细胞（NR8383）,将实验分组为Control组、LPS组、0.25μg/ml mtDNA+LPS组、0.5μg/ml mtDNA+LPS组、1μg/ml mtDNA+LPS组。LPS的终浓度为0.5μg/ml,24h后收集细胞上清液,采用酶联免疫吸附实验（Enzyme linked immunosorbent assay,ELISA）检测炎症因子TNF-α的含量,明确mtDNA放大LPS诱导肺泡巨噬细胞炎症作用及mtDNA最适浓度。3)体外50nM的TLR9siRNA转染细胞48h,采用RT-qPCR检测肺泡巨噬细胞中TLR9 mRNA的表达... 

【文章来源】：南昌大学江西省 211工程院校

【文章页数】：48 页

【学位级别】：硕士

【部分图文】：

琼脂糖电泳显示所提取的mtDNA

mtDNA 刺激肺泡巨噬细胞（*表示与 control 组相比，LPS 组相比，P＜0.05）TLR9siRNA后TLR9表达下调 结果，与对照组相比，TLR9siRNA 组的 TLR9表明转染成功（P＜0.05）（见图 3.3）。iRNA 的表达情况（与 Control 组相比，NS 为无统计

18LR9siRNA 的表达情况（与 Control 组相比，NS 为无统计学意0.05）检测上清液中TNF-α、IL-1β、IL-6蛋白的表TNF-α、IL-1β、IL-6分别为513.00±28.02pg/ml、539.080pg/ml，LPS+mtDNA 组的 TNF-α、IL-1β、IL-6 分别756.33±18.89pg/ml、477.50±15.82pg/ml ，与 LP

【参考文献】：
期刊论文
[1]TLR4在妊娠异常终止中的作用机制和研究进展[J]. 张谊,何自标,陈晨,鲜红,张明.  中国畜牧兽医. 2014(07)



本文编号：3222154