肺泡巨噬细胞TLR4/MyD88信号通路参与并介导了机械通气所致的肺损伤

发布时间：2021-07-03 16:26

　　目的探讨肺泡巨噬细胞Toll样受体4/髓样分化因子88（TLR-4/My D88）信号通路在呼吸机相关性肺损伤中的作用。方法 30只成年SD大鼠行经口气管插管,给予40 m L/kg潮气量通气240 min,建立呼吸机相关性肺损伤模型,机械通气结束后,使用4℃PBS经气管导管缓慢注入并回收支气管肺泡灌洗液（BALF）,提纯肺泡巨噬细胞。收集并培养肺泡巨噬细胞,随机分为3组:PBS刺激组（CON组）;TNF-α刺激联合PBS组（STI组）;TNF-α刺激联合抗TLR4单克隆抗体（m Ab）干预组（ANT组）;每组8个样本。CON组细胞用PBS结合2 h后,继续用PBS培养16 h;STI组细胞用PBS结合2 h后,采用20 ng/m L TNF-α培养16 h;ANT组细胞用PBS液及TLR4 m Ab结合2 h后,用20 ng/m L TNF-α培养16 h。ELISA检测各组上清液TNF-α、IL-1β、IL-6的表达;反转录PCR检测各组肺泡巨噬细胞TLR4、TLR9、髓样分化因子88（My D88）、核因子κB（NF-κB）的mRNA表达,Western blot法检测各组肺泡巨... 

【文章来源】：细胞与分子免疫学杂志. 2015,31(02)北大核心CSCD

【文章页数】：5 页

【部分图文】：

三组大鼠支气管肺泡灌洗液中IL-1β、IL-6和TNF-α的

AM中MyD88、NF-κB、TLＲ4和TLＲ9的mＲNA表达

(P＜0．05，图3)，但TLＲ9的表达水平与CON组差异无统计学意义(P＞0．05);ANT组的AM中TLＲ4、MyD88和NF-κB蛋白水平明显低于STI组，差异有统计学意义(P＜0．05，图3)，但TLＲ9的水平与STI组相比，差异无统计学意义(P＞0．05)。aP＜0．05vsCON组;cP＜0．05vsSTI组．图3巨噬细胞MyD88、NF-κB、TLＲ4和TLＲ9的蛋白表达3讨论机械通气是临床麻醉和治疗ALI/AＲDS常用的重要治疗手段，而机械通气应用不当是呼吸机相关性肺损伤的主要病因，但其发病机制尚不清楚，主要认为是机械力的刺激及炎症因子释放异常的相互作用引起［6］。AM广泛分布于肺泡内以及支气管肺泡上皮表面，是气道固有免疫第一道防线的重要组分之一，其在支气管肺泡局部的固有免疫防御及过度免疫导致非细菌性炎症损害等方面的作用，近年来备受关注。AM在机械牵拉、感染等刺激作用下被激活，激活后其不仅具有较强的吞噬功能，并且能合成分泌多种炎症因子如IL-6、IL-1β、TNF-α等，诱发加重肺泡局部炎症反应［5］。Frank等［7］研究表明，AM参与VILI的发生、发展，可能是VILI初始发病机制的重要因素之一。本实验研究发现，在大潮气量通气后导致了肺泡灌洗液中及AM培养上清液的IL-1β、IL-6、TNF-α的含量增加，主要原因是由于机械通气产生的过度牵张、剪切力等机械刺激作用于AM，并将其转导成生物化学信号传入细胞内，导致局部炎症细胞激活和炎性反应扩大，引起细胞因子和炎性介质的大量释放，造成肺组织炎症性损伤［8］。TLＲ是一类重要的模式识别受体，能特异性识别病原相关分子模式(pathogenassociatedmolecularpatterns，PAMP)，调节固有免疫和获得性免疫。TLＲ4的外源性配体LPS是Gram－菌细胞壁外膜层的主要成分，可以活化炎性细胞

【参考文献】：
期刊论文
[1]Toll样受体3和4在大鼠呼吸机相关肺损伤肺组织中的表达[J]. 朱珊,潘灵辉,林飞,赵琼,魏癑.  临床麻醉学杂志. 2013(06)



本文编号：3262935