重组转化生长因子-β_3对小鼠放射性肺炎的影响研究

发布时间：2017-04-26 09:07

  本文关键词：重组转化生长因子-β_3对小鼠放射性肺炎的影响研究，由笔耕文化传播整理发布。

【摘要】：放射治疗是临床恶性肿瘤的常用治疗方法之一，广泛用于肺、食道、纵膈等部位肿瘤的治疗，并用于骨髓移植的预处理。由于肺脏是电离辐射的中度敏感器官，在接受电离辐射后常并发放射性肺炎。放射性肺炎发展到晚期可演变成为肺纤维化，造成肺脏结构和功能的不可逆损伤。因此，如何治疗放射性肺炎以延缓其向肺纤维化发展，已成为放射医学领域研究的一个热点。目前已知转化生长因子-β1(Transforming growth factor-β1，TGF-β1)在放射性肺炎的发生发展过程中发挥重要的作用。TGF-β1是TGF-β的一种亚型。在哺乳动物中，TGF-β存在TGF-β1、TGF-β2和TGF-β3三种亚型。有报道称，虽然TGF-β1介导了放射性肺炎的发生，而TGF-β3却没有促进炎症的作用。同时，TGF-β3具有抗肝纤维化和胰腺纤化的功能。本研究建立动物放射性肺炎模型，采用60Co-γ射线照射后，在TGF-β3的作用下，观察小鼠肺脏病理变化及其与循环纤维细胞（Circulating fibrocytes，CF）和辅助性T细胞17（T helper cell17，，Th17）变化之间的关系，探讨TGF-β3对放射性肺炎的作用，为临床治疗放射性肺炎提供实验依据。 本实验采用180只清洁级雌性C57BL/6小鼠，体重18-20g，购自北京维通利华实验动物技术有限公司。按体重随机分为对照组、照射组和TGF-β3组。每组按照射时间不同，分为3天、7天、14天和1个月组。照射组和TGF-β3组均予以20Gy60Co-γ射线单次全胸照射，照射后每周分别腹腔注射生理盐水和TGF-β3。于不同时间点活杀，观察小鼠的一般情况，检测外周血中血细胞水平，观察肺脏病理变化，比较肺脏中循环纤维细胞和Th17细胞的数量，检测肺匀浆液中细胞因子的表达情况。 结果显示： （1）与对照组相比，照射组和TGF-β3组小鼠体重增长减缓，具有统计学意义，而两组之间没有统计学差异。 （2）照射后各组小鼠肺重无明显差异，而照射组和TGF-β3组小鼠肺脏指数均高于对照组。照后3d和7d时，TGF-β3组小鼠肺指数明显低于照射组（P0.05）。 （3）照射后1m内，照射组和TGF-β3组外周血WBC数目均低于对照组，而两组之间没有统计学意义。照后3d照射组外周血HBG出现下降，7d时恢复至对照组水平，而照后1m又出现下降；而TGF-β3组均低于对照组。照射组外周血PLT浓度在照后7d时下降，1m时恢复至对照组水平；TGF-β3组在照后7d和14天与照射组呈类似趋势，而1m时增高且明显高于对照组和照射组。 （4）照后1m时，照射组小鼠肺脏肉眼可见点状实变；HE染色显示显示肺泡间隔破裂，部分肺泡融合，血管支气管等肺间质周围成纤维细胞增生，炎性细胞浸润，TGF-β3组小鼠肺脏肺泡融合和成纤维细胞增生较少，有炎性细胞浸润；Masson三色染色显示照射1m时照射组肺泡壁呈现明显的胶原沉积，TGF-β3组肺泡壁的蓝色均较照射组弱，提示TGF-β3减少了胶原纤维在肺泡壁的沉积。 （5）细胞因子结果显示： ①照后14d时，照射组和TGF-β3组肺内TNF-α浓度均明显高于对照组，TGF-β3组明显低于照射组（P0.05），照后1m时，TGF-β3组肺TNF-α浓度明显高于对照组和照射组（P0.05）； ②随着时间推移，照射组小鼠肺内IL-10浓度先降低后升高，在3d、7d和1m时均明显高于对照组（p0.05），TGF-β3组在照后3d时明显高于对照组，在照后7d时明显高于照射组，随后逐渐回复至对照组水平； ③照射组肺内IL-17浓度在照后3d与对照组持平，在照后7d到1m明显低于对照组差异均具有统计学意义（p0.05）。照射后，TGF-β3组肺内IL-17浓度持续低于对照组，照后7d时，TGF-β3组肺内IL-17浓度高于照射组（p0.05）。 （6）照射后小鼠肺内Th17细胞数出现下降，照后7d到14d，照射组Th17细胞数均明显低于对照组（P0.05），且呈逐渐上升的趋势，照后1m明显高于对照组（P0.05）。照后3d和14d时，TGF-β3组肺内Th17细胞数均明显低于对照组，照后1m时TGF-β3组肺消化液中Th17细胞数均明显高于对照组和照射组（P0.05）。而照射组小鼠肺内Th17/CD4+细胞的比例在7d时出现下降（p0.05），随后升高，14d和1m时已明显高于对照组，而TGF-β3在照后14d时抑制Th17的增高，1m时促进Th17的比例增加。 （7）照后3d和7d，照射组小鼠肺内循环纤维细胞数降低且明显低于对照组，照射后14d开始升高，明显高于对照组（P0.05）。TGF-β3组在照射后3d和7d时与对照组类似，照射后14d起抑制小鼠肺内循环纤维细胞数的增加（P0.05）。 由此可见，60Co-γ射线的照射导致小鼠放射性肺炎的发生，多种细胞因子存在相互促进或抑制的作用，共同构建的调控网络的失衡导致了肺炎的发生。TGF-β3调节了肺内Th17细胞和Th1/Th2细胞的平衡，减少了循环纤维细胞在肺内的募集，并调控了细胞因子网络的平衡，从而能减轻了肺脏炎症的程度，延缓了放射性肺炎向放射性肺纤维化的进展，对肺脏起到了一定程度的保护作用。
【关键词】：放射性肺炎 TGF-β3 Th17 循环纤维细胞 细胞因子
【学位授予单位】：安徽医科大学
【学位级别】：硕士
【学位授予年份】：2014
【分类号】：R730.55;R563.1
【目录】：

• 缩略词6-8
• 摘要8-11
• Abstract11-15
• 1 引言15-17
• 2 材料与方法17-24
• 2.1 主要实验仪器、耗材和试剂17-19
• 2.2 实验动物模型19-20
• 2.3 体重称量20
• 2.4 肺脏称重、肺指数及外周血细胞参数的检测20-21
• 2.5 肺病理切片的制作、染色及病理形态学观察21
• 2.6 肺匀浆液中细胞因子的检测21-22
• 2.7 肺消化液 Th17 检测22-23
• 2.8 肺脏循环纤维细胞计数23
• 2.9 统计学处理23-24
• 3 结果24-39
• 3.1 小鼠一般情况24-28
• 3.1.1 小鼠体重24
• 3.1.2 小鼠肺重及肺脏指数24-26
• 3.1.3 外周血血细胞26-28
• 3.2 肺脏病理28-30
• 3.2.1 HE 染色28-30
• 3.2.2 Masson 染色30
• 3.3 肺内细胞因子30-36
• 3.3.1 趋化因子30-31
• 3.3.2 促炎因子31-33
• 3.3.3 抑炎因子33-34
• 3.3.4 生长因子34-36
• 3.4 肺内 Th17 细胞36-38
• 3.5 肺内循环纤维细胞38-39
• 4 讨论39-43
• 5 结论43-44
• 参考文献44-49
• 附录49-52
• 致谢52-53
• 综述53-62
• 参考文献59-62

【参考文献】

中国期刊全文数据库 前3条

1 吴奎,毕玉田,孙鲲,夏俊波,王长征;屋尘螨提取液致敏BALB/c与C57BL/6小鼠肺部变应性炎症模型的比较[J];第三军医大学学报;2005年17期

2 张海;王炳胜;刘秀芳;李凤玉;雒书鹏;李宏伟;石军;;每周重复照射建立大鼠放射性肺损伤模型的评价[J];临床军医杂志;2009年03期

3 接亚敏;乔文波;;细胞因子预测放射性肺损伤[J];实用肿瘤学杂志;2007年05期

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本文编号：328132