Wnt/β-catenin信号通路参与高渗条件下气道上皮细胞黏液高分泌

发布时间：2021-07-28 11:20

　　目的研究高渗刺激对人气道上皮细胞（16HBE）黏蛋白（MUC）5AC分泌的影响,以及Wnt/β-catenin信号通路可能的介导作用。方法使用浓氯化钠配置高渗培养液,用高渗培养液刺激16HBE细胞,细胞分为常规培养（阴性对照组）以及高渗培养液刺激3、6、9、12 h组。ELISA法检测MUC5AC分泌量,Western blotting法检测人气道Wnt家族蛋白Wnt1、Wnt2、Wnt3a、Wnt4、Wnt5a、Wnt7a、Wnt10a、Wnt10b的表达情况。将Wnt4小片段siRNA转染16HBE细胞,再给予高渗培养液刺激。采用ELISA法检测培养上清的MUC5AC分泌量,采用Western blotting法检测细胞内经典Wnt/β-catenin通路相关信号分子的表达量,细胞免疫荧光法检测核因子（NF）-κB p65核转位情况。结果高渗培养的16HBE细胞上清及胞质中检测到的MUC5AC分泌量显著高于阴性对照组,且MUC5AC分泌量在一定范围内呈时间依赖性（均P<0.05）。高渗刺激组Wnt1、Wnt2、Wnt3a、Wnt5a、Wnt7a、Wnt10a和Wnt10b表达... 

【文章来源】：上海交通大学学报(医学版). 2014,34(05)北大核心CSCD

【文章页数】：6 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1. 1 主要材料和试剂
    1. 2 方法
        1.2.1细胞培养和高渗处理
        1.2.2 MTT法检测高渗对细胞活性的影响
        1.2.3细胞转染siRNA
        1.2.4 ELISA法检测胞质和培养上清液中MUC5AC蛋白的含量
        1.2.5 Western blotting检测Wnt家族蛋白及Wnt/β-catenin经典信号通路相关蛋白的表达
        1.2.6细胞免疫荧光法检测NF-κB p65的细胞内分布
    1. 3 统计学处理
2 结果
    2. 1 高渗刺激对细胞活性的影响
    2. 2高渗刺激对HBE16 细胞MUC5AC蛋白含量的影响
    2. 3高渗刺激对HBE16 细胞中Wnt和 β-catenin蛋白的影响
    2. 4 Wnt4 在高渗刺激诱导HBE16 细胞MUC5AC分泌中的影响
    2. 5 高渗刺激对HBE16 细胞NF-κB p65 胞内分布的影响
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]高渗诱导人气道上皮细胞系黏液高分泌[J]. 涂静,尤列·皮尔曼,维克多·科罗索夫,周向东.  基础医学与临床. 2011(07)
[2]机械牵张对人气道黏膜上皮细胞黏蛋白5AC表达的影响及其信号通路机制研究[J]. 钟甜,尤列·皮尔曼,维克多·科罗索夫,周向东.  上海交通大学学报(医学版). 2011(04)
[3]渗透压反应增强子结合蛋白对高渗下人气道上皮细胞黏液分泌的影响[J]. 涂静,尤列·皮尔曼,维克多·科罗索夫,周向东.  中华医学杂志. 2011 (08)



本文编号：3307818