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HR通过MMP-9/p38信号通路减少小鼠模型痰液和黏蛋白MUC5AC表达

发布时间:2021-08-06 16:48
  [目的]急性支气管炎、慢性阻塞性肺疾病与支气管哮喘是常见的呼吸系统疾病,这些疾病常表现为咳嗽、痰多、喘息等症状。HR是一个复方制剂,临床应用证明它是一个很有效的镇咳祛痰药物,药效学研究提示它有很强的镇咳作用,但它是否有祛痰作用及其作用机制尚不清楚,本文重点研究它在祛痰方面的作用及其机制。[方法]1.首先采用常规的简易祛痰模型小鼠气道酚红排泄试验,评价HR是否具有祛痰作用。2.建立内毒素脂多糖(LPS)诱导诱导的小鼠急性气管炎模型:模型建立后,①气道内滴入碳墨,评价HR对模型小鼠气道碳墨的清除能力;②采用咔唑比色法测定灌洗液中的黏多糖,评价HR能否减少模型小鼠气道黏液黏多糖含量;③采用real-time PCR法测定肺组织中MUC5AC mRNA的表达和ELISA法检测灌洗液中的MUC5AC的蛋白含量,观察HR对黏蛋白MUC5AC mRNA表达与蛋白水平的影响。3.建立卵白蛋白(OVA)诱导的小鼠哮喘模型:模型建立后,①取肺进行病理切片,PAS染色,观察HR对黏液分泌细胞气道杯状细胞增生的影响;②采用real-time PCR法测定肺组织中MUC5AC mRNA的表达,观察HR对黏蛋白M... 

【文章来源】:扬州大学江苏省

【文章页数】:67 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
ABSTRACT
符号说明
前言
1. 实验材料
    1.1 实验动物
    1.2 实验仪器
    1.3 实验试剂
2. 实验方法
    2.1 药物配制
    2.2 墨汁配备
    2.3 小鼠气道酚红排泄试验
    2.4 LPS诱导的小鼠急性气管炎模型
        2.4.1 HR对LPS诱导的小鼠急性气管炎模型气道黏膜纤毛清除功能的影响
        2.4.2 HR对LPS诱导的小鼠急性气管炎模型黏液黏多糖分泌、MUC5ACmRNA与蛋白表达的影响
    2.5 OVA致敏的小鼠哮喘模型
    2.6 吸烟诱导的小鼠急性气管炎模型
        2.6.1 HR对吸烟诱导的小鼠急性气管炎模型气道黏膜纤毛清除功能的影响
        2.6.2 HR对吸烟诱导的小鼠急性气管炎模型黏液黏多糖分泌、MUC5ACmRNA与蛋白以及相关蛋白表达的影响
    2.7 咔唑比色法测定BALF中黏液黏多糖含量
    2.8 ELISA法检测BALF中MUC5AC蛋白含量
    2.9 肺组织总RNA提取与逆转录
    2.10 小鼠肺组织石蜡包埋切片
    2.11 过碘酸—Schiff氏(PAS)染色
    2.12 SABC免疫组化
3. 统计学
4. 实验结果
    4.1 墨汁中碳粒直径
    4.2 HR对小鼠气道酚红排泄的促进作用
    4.3 HR增强LPS诱导的小鼠气管炎模型气道黏膜纤毛清除能力
    4.4 HR抑制LPS诱导的小鼠急性气管炎模型BALF中黏液黏多糖分泌
    4.5 HR抑制LPS诱导的小鼠急性气管炎模型BALF中MUC5AC的表达
    4.6 HR抑制LPS诱导的小鼠急性气管炎模型肺组织MUC5AC mRNA表达
    4.7 HR抑制OVA致敏的小鼠哮喘模型肺组织中杯状细胞增生
    4.8 HR抑制OVA致敏的小鼠哮喘模型肺组织MUC5AC mRNA的表达
    4.9 HR增强吸烟诱导的小鼠急性气管炎模型气道黏膜纤毛清除能力
    4.10 HR抑制吸烟诱导的小鼠急性气管炎模型气道黏液黏多糖分泌
    4.11 HR抑制吸烟诱导的小鼠急性气管炎模型MUC5AC的蛋白表达
    4.12 HR抑制吸烟诱导的小鼠急性气管炎模型MUC5AC mRNA表达
    4.13 HR抑制吸烟诱导的小鼠急性气管炎模型MMP-9与p-p38蛋白表达
讨论与小结
结论
参考文献
综述
    参考文献
致谢


【参考文献】:
期刊论文
[1]MUC5AC EXPRESSION UP-REGULATION GOBLET CELL HYPERPLASIA IN THE AIRWAY OF PATIENTS WITH CHRONIC OBSTRUCTIVE PULMONARY DISEASE[J]. Rui Ma1*, Ying Wang2, Gang Cheng3, Hui-zhen Zhang2, Huan-ying Wan1, and Shao-guang Huang1 1Department of Respiratory, Ruijin Hospital, Shanghai Second Medical University, Shanghai 200025 2Institute of Immunology, Shanghai Second Medical Universitry, Shanghai 200025 3Department of Pathology, Chest Hospital, Shanghai 200030.  Chinese Medical Sciences Journal. 2005(03)
[2]杯状细胞的研究进展[J]. 史玉兰,段相林.  解剖科学进展. 2001(04)



本文编号:3326132

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