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支原体巨噬细胞活化脂肽-2经MMP-9/TGF-α/EGFR诱导气道上皮细胞分泌MUC5AC

发布时间:2021-08-11 00:43
  黏液是分布于气道表面、由上皮杯状细胞和黏膜下腺细胞分泌的一层弹性凝胶,主要是由水和黏蛋白组成,而黏蛋白又以黏蛋白5AC(MUC5AC)最重要。黏蛋白在维持气道湿化、上皮细胞信号转导等方面发挥重要作用,也是呼吸系统抵御外界刺激的非特异性屏障。但在某些条件下,如病原体感染以及吸烟等,可促进黏蛋白分泌。细菌感染是气道黏液高分泌的常见原因。研究表明,肺炎支原体感染后,可上调气道上皮细胞分泌MUC5AC,从而参与支气管哮喘以及慢性阻塞性肺疾病(COPD)的急性发作,但迄今为止其机制尚未明了。本研究旨在明确支原体巨噬细胞活化脂肽-2(MALP-2)上调气道上皮细胞黏蛋白MUCSAC表达的调控机制。本研究首先体外培养人气道上皮细胞NCI-H292,采用MALP-2刺激后,ELISA和实时定量PCR检测MUC5AC的分泌以及mRNA表达水平;同时采用ELISA检测基质金属蛋白酶-9(MMP-9)以及转化生长因子-α(TGF-α)的分泌情况;Western blot分析表皮生长因子受体(EGFR)的磷酸化。最后分别采用EGFR和MMP-9抑制剂,以及TGF-α中和抗体预处理细胞,观察其对MUC5AC分泌... 

【文章来源】:南华大学湖南省

【文章页数】:52 页

【学位级别】:硕士

【文章目录】:
摘要
Abstract
第1章 绪论
第2章 材料和方法
    2.1 主要实验仪器
    2.2 细胞株
    2.3 实验主要试剂
    2.4 主要抗体
    2.5 其他
第3章 实验方法
    3.1 细胞培养与传代
    3.2 MALP-2 刺激实验
    3.3 Western Blot检测EGFR磷酸化
    3.4 ELISA检测MMP-9,MUC5AC和TGF-α的分泌
    3.5 实时定量PCR检测MUC5AC mRNA表达
    3.6 统计学分析
第4章 实验结果
    4.1 MALP-2 诱导NCI-H292细胞分泌MUC5AC
    4.2 MALP-2 诱导NCI-H292细胞表达MUC5AC mRNA
    4.3 MALP-2 诱导MUC5AC与MMP-9 有关
    4.4 MALP-2 诱导NCI-H292细胞分泌TGF-α
    4.5 EGFR调控MUC5AC分泌
第5章 讨论
第6章 结论
参考文献
文献综述 黏蛋白在呼吸道感染中的作用
    参考文献
科研成果
资助基金
致谢



本文编号:3335095

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