乌司他丁通过Nrf2/HO-1抗氧化途径在OVA诱导的支气管哮喘小鼠中发挥治疗作用

发布时间：2021-08-12 08:07

　　目的课题组之前的研究已证实在OVA诱导的哮喘小鼠模型中,乌司他丁通过抑制ROS的产生、诱导抗氧化酶的表达,起到治疗哮喘的作用,但具体机制尚不清晰;此研究将以Nrf2/HO-1这一氧化应激的关键通路为切入点,深入探讨乌司他丁抗氧化作用的潜在机制。方法建立OVA诱导的小鼠哮喘模型,腹腔注射乌司他丁（100 k U·kg-1·d-1）进行治疗,对照组用PBS（p H 7.4）代替;检测气道高反应性;ELISA法检测小鼠BALF中IL-4、IFN-γ、总Ig E及特异性Ig E的表达水平;双氢罗丹明（DHR）-123方法检测小鼠支气管肺泡灌洗液（BALF）细胞中ROS含量;检测小鼠肺组织中蛋白羰基含量（protein carbonyl）和丙二醛（MDA）水平;抗氧化酶试剂盒检测小鼠BALF中的抗氧化酶;Western blot及Real-time PCR检测小鼠肺组织中HO-1在蛋白和基因的表达水平;Western blot、IF及EMSA检测Nrf2核转移及结合活性。结果乌司他丁治疗组明显降低气道高反应;降低BALF中IL-4、特异性Ig E及ROS的表达水平,降低小鼠肺组织Protein ... 

【文章来源】：中国药理学通报. 2014,30(12)北大核心CSCD

【文章页数】：8 页

【文章目录】：
1 材料与方法
    1.1 试验动物及材料
    1.2 方法
        1.2.1 模型建立及分组
        1.2.2 小鼠气道反应性的测定
        1.2.3 支气管肺泡灌洗液 (BALF) 的采集
        1.2.4肺组织的采集
        1.2.5 小鼠BALF中细胞因子及总Ig E和OVA特异性Ig E的检测
        1.2.6 小鼠BALF细胞中ROS的检测
        1.2.7 小鼠肺组织中Protein carbonyl content和MDA水平的检测
        1.2.8 小鼠BALF中SOD、GSH和TAOC活性的检测
        1.2.9 Western blot检测肺组织蛋白中HO-1及Nrf2的表达
        1.2.1 0 Immunofluorescence (IF)
        1.2.1 1 EMSA检测肺组织Nrf2的结合活性
        1.2.1 2 Real-time PCR检测肺组织mRNA中HO-1的表达
    1.3 统计学方法
2 结果
    2.1 小鼠气道反应性变化
    2.2 UTI抑制OVA致敏小鼠BALF中总Ig E和OVA特异性Ig E的表达
    2.3 UTI抑制OVA诱导的Th1/Th2因子失衡
    2.4 UTI抑制OVA诱导的氧化应激
    2.5 UTI的治疗作用被HO-1的抑制剂Znpp逆转
    2.6 UTI在蛋白水平上诱导HO-1的表达且具有时间和剂量依赖性
    2.7 UTI诱导Nrf2的核转移
    2.8 UTI增强Nrf2与ARE的结合活性并上调HO-1在基因水平的表达
3 讨论


【参考文献】：
期刊论文
[1]转导血红素氧合酶-1蛋白减轻脑缺血/再灌注沙土鼠海马神经元的损伤[J]. 万晓红,王雁,赵国良,陈华梅,邵建林.  中国药理学通报. 2014(05)
[2]Ulinastatin for acute lung injury and acute respiratory distress syndrome: A systematic review and meta-analysis[J]. Yu-Xin Leng,Shu-Guang Yang,Ya-Han Song,Xi Zhu,Gai-Qi Yao.  World Journal of Critical Care Medicine. 2014(01)
[3]糖皮质激素对哮喘大鼠肺组织IL-8表达的抑制作用[J]. 范晓云,汪浩,徐轲,唐伟,陆兆双.  中国药理学通报. 2013(02)
[4]支气管哮喘小鼠模型应用评价[J]. 沈华浩,王苹莉.  中华结核和呼吸杂志. 2005(04)



本文编号：3337940